基于综合评分法的不同产地加工方法对瓜蒌子质量的影响

目的:了解优选黔产瓜蒌子的最佳产地加工方法。方法:分别采用阴干、晒干、烘干等不同产地加工方法对瓜蒌子药材进行加工处理,以瓜蒌子中3,29—二苯甲酰基栝楼仁三醇、总氨基酸以及石油醚浸出物含量为评价指标,采用综合评分法优选瓜蒌子的最佳产地加工方法。结果:瓜蒌子不同产地加工方法的综合评分值差异较大,从大到小的顺序依次为:40℃烘干法(0. 89) 30℃烘干法(0. 79) 50℃烘干法(0. 67) 60℃烘干法(0. 45)晒干法(0. 37) 70℃烘干法(0. 32)阴干法(0)。结论:在产地加工方法中,40℃烘干法的综合评分值最高,其分值达0. 89,为最佳产地加工方法,其工艺为:从瓜蒌中取出瓜蒌子,于40℃的烘箱内干燥。该方法能较好地控制瓜蒌子药材的质量。     

6，7-二乙酰黄芩素对大鼠急性肝性脑病的防治作用及机制研究

目的 研究6,7-二乙酰黄芩素对硫代乙酰胺致大鼠急性肝性脑病模型的防治作用及机制。方法 Wistar雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组、乳果糖（阳性药,6 g/kg）组和6,7-二乙酰黄芩素低、中、高剂量（6.25、12.50、25.00 mg/kg）组,每天ig给药1次,连续给药7 d。第5天给药结束后,除对照组外,采用硫代乙酰胺（300 mg/kg）连续ip 2 d建立大鼠肝性脑病模型。观察大鼠状态,考察大鼠肝性脑病评分与死亡率;测定各组大鼠血氨、结肠pH值、血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）水平;采用苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠肝组织病理学变化;采用ELISA试剂盒法检测大鼠脑组织中γ-氨基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）、血浆中的5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）的含量;采用Western Blotting试验测定脑组织中GABA-α₁蛋白的表达。结果 造模48 h后,与模型组比较,6,7-二乙酰黄芩素高剂量组大鼠体质量显著升高（P<0.05）,肝性脑病评分显著降低（P<0.05）;各剂量组死亡率均降低;中、高剂量组血清ALT、AST、ALP和TBIL水平均显著降低（P<0.05）;低、中、高剂量组血氨水平显著降低（P<0.05、0.01）;中、高剂量组结肠pH显著降低（P<0.05、0.01）;中、高剂量组大鼠肝脏组织病理学损伤明显改善;各剂量组脑组织中GABA水平显著降低（P<0.01）;中、高剂量组血浆中5-HT水平显著降低（P<0.01）;高剂量组血浆中NE水平显著降低（P<0.01）;高剂量组脑组织中Glu含量显著增加（P<0.01）;高剂量脑组织中GABA-α₁蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论 6,7-二乙酰黄芩素对肝脏具有保护作用,对急性肝性脑病具有防治作用,其机制可能与降低血氨、降低结肠pH、调节神经递质水平、抑制相关神经递质受体的表达有关。     

健脾温胃散对脾气虚胃炎大鼠血清TNF-α,IL-6及胃组织IRAK-4mRNA表达的影响

目的:探讨健脾温胃散对脾气虚胃炎大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)及胃组织白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)mRNA表达的影响,为中药方剂治疗脾气虚胃炎提供实验依据。方法:Wistar大鼠60只,随机分正常组,胃炎模型组,阳性药物组(丽珠得乐胶囊,0.016 g·kg~(-1)·d~(-1))及健脾温胃散高、中、低剂量组(0.324,0.259,0.194g·kg~(-1)·d~(-1)),除正常组外均建立大鼠脾气虚胃炎动物模型,测量各组大鼠的肛温变化,各组大鼠ig相应药物30 d治疗后,采用放射免疫法测定其血清中IL-6,TNF-α的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察胃组织病理学情况;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察健脾温胃散对胃炎大鼠模型胃黏膜IRAK-4 mRNA表达的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠肛温变化显著降低,大鼠血清IL-6,TNF-α含量显著升高,大鼠胃组织IRAK-4 mRNA表达显著升高(P0.01),大鼠胃黏膜的病理损伤较明显;与模型组比较,健脾温胃散高、中、低剂量组能明显改善模型大鼠的证候特征及肛温变化,改善胃黏膜的病理形态,能显著降低胃炎模型大鼠血清IL-6,TNF-α含量(P0.01),下调胃组织IRAK-4 mRNA表达(P0.01)。结论:健脾温胃散能使模型大鼠的肛温恢复正常,改善胃黏膜的病理形态,降低脾气虚胃炎模型大鼠血清IL-6,TNF-α含量,抑制IRAK-4表达,可能是其治疗胃炎的作用机制之一。     

黄独素B的体外代谢通路及其代谢产物研究

目的基于体外代谢模型对黄独素B的代谢稳定性、主要CYP450代谢酶表型及其代谢产物进行研究。方法黄独素B分别在人肝微粒体(HLM)和大鼠肝微粒体(RLM)中共同孵育,采用UPLC-MS/MS检测孵育液中剩余的黄独素B含量,分析其在HLM和RLM中的代谢稳定性。利用10种重组人CYP450酶(1A1、1A2、1B1、2A13、2A6、2B6、2D6、2C9、2C19、3A4)分别与黄独素B共同孵育,确定其代谢酶表型,结合大鼠离体肝灌流模型对黄独素B的主要代谢酶表型进行确认。此外,分别对HLM和RLM孵育体系中的黄独素B代谢产物进行定性分析,考察黄独素B在HLM和RLM中代谢产物的区别。结果在HLM和RLM中,黄独素B的转化率分别为37%、59%,经HLM和RLM代谢的体外半衰期(t1/2)为97.4、52.3 min,推算得到的HLM和RLM中的固有清除率(CLint, in vivo)为8.23、23.9 mL/(min·kg),肝清除率(CLh)为5.89、16.8 mL/(min·kg),由此可知黄独素B在RLM体系中的代谢转化速率较HLM中快。黄独素B体外代谢酶表型结果可知其I相代谢是由多个CYP同工酶介导的,包括3A4、2C19、2C9、1A13及1A1,其中CYP3A4对黄独素B的代谢起主导作用;肝灌流实验结果显示,随着酮康唑给药剂量的增加,对肝脏中CYP3A4的抑制作用增强,黄独素B在肝脏中的代谢减少,在灌流液中的剩余量增加,印证了CYP3A4对黄独素B的代谢作用。此外,2种肝微粒体孵育后的黄独素B都只产生了1个代谢产物(M1),为黄独素B去甲基化产物。结论黄独素B在RLM中的代谢转化速率较HLM中快。黄独素B的主要代谢酶表型为CYP3A4,其在HLM和RLM中产生的代谢物均为去甲基化产物。     

黔产瓜蒌不同种植栽培技术研究

目的:对黔产瓜蒌的种植栽培技术进行研究。方法:结合贵州本地实际,对瓜蒌的不同繁育技术进行对比研究,对黔产瓜蒌的种植条件、栽培过程、肥水管理、病虫害防治等方面进行总结。结果:黔产瓜蒌的种子繁殖、分根繁殖、不定根繁殖、压条繁殖4种繁育技术的发芽率或存活率均大于96. 0%;分根繁殖的出苗快,植株生长茂盛,挂果率高;分根繁殖、不定根繁殖、压条繁殖的雌雄株比例可控制,以收获果实为主;种子繁殖天花粉产量高,雌雄株的比例不易控制,对于生产瓜蒌和瓜蒌籽的周期较长,种子繁殖的种植成本比分根繁殖低。结论:以生产天花粉为目的时,宜选择种子繁殖技术;以生产瓜蒌和瓜蒌籽为主时,宜选择分根繁殖法;不定根繁殖、压条繁殖也可作为瓜蒌的补充繁殖技术。本研究对提高瓜蒌和天花粉的产量和质量具有重要作用,为瓜蒌种植栽培技术的选择提供参考。     

黄芪六一汤抗糖尿病肾病的药效组分筛选研究

目的 对黄芪六一汤中黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖及甘草酸、甘草总黄酮、甘草多糖分别进行提取、分离,并筛选具有防治糖尿病肾病作用的药效组分。方法 单因素法筛选树脂型号、上样浓度和体积、洗脱溶剂及用量建立大孔吸附树脂法对黄芪总皂苷、总黄酮进行富集分离;运用碱液萃取法对甘草酸、甘草总黄酮进行分离,采用水提醇沉法对黄芪多糖、甘草多糖进行纯化。12周龄雄性db/m小鼠8只作为对照组,将12周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组、黄芪六一汤和各组分的高、低剂量（临床等效剂量的4、1倍）组,小鼠一般情况及血生化指标以盐酸罗格列酮片（RSG）为阳性对照;尿白蛋白（U-Alb）水平以缬沙坦分散片（API）为阳性对照,每组8只。各组小鼠分别在ig给药12周前、后,称质量。禁食12 h,自由饮水,收集24 h尿液,马斯亮蓝法检测24 h U-Alb浓度;尾静脉采血测空腹血糖（FBG）;摘取眼球取血,采用全自动生化分析仪检测血清血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）含量。对照组、模型组及黄芪六一汤高、低剂量组小鼠肾组织经固定、石蜡包埋切片,Masson染色后,光学显微镜下观察。结果 制得的黄芪总黄酮、黄芪总皂苷、黄芪多糖、甘草酸、甘草总黄酮、甘草多糖质量分数分别为（70.58±2.16）%、（72.97±1.06）%、（67.12±2.60）%、（81.02±1.04）%、（53.56±1.63）%、（64.62±1.27）%。与模型组比较,给予黄芪六一汤治疗后的各组小鼠肾纤维化程度较轻;与给药前比较,模型组小鼠体质量显著减轻（P＜0.05）,甘草总黄酮高、低剂量和甘草多糖低剂量组体质量显著降低（P＜0.05、0.01）,其他给药组无显著差异;与模型组比较,黄芪六一汤、黄芪总皂苷、黄芪多糖、黄芪总黄酮、甘草酸FBG、24 h U-Alb显著降低（P＜0.05、0.01）,黄芪总皂苷、黄芪六一汤、黄芪总黄酮、甘草酸组Scr显著降低（P＜0.05、0.01）,黄芪六一汤、黄芪多糖、甘草酸、黄芪总黄酮组BUN显著降低（P＜0.05、0.01）,黄芪六一汤、黄芪总皂苷、甘草酸、黄芪多糖高剂量组TG显著降低（P＜0.05、0.01）,黄芪六一汤、黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖组TC显著降低（P＜0.05、0.01）。结论 各组分确定的制备工艺稳定、科学、可行;黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪多糖、甘草酸可能是黄芪六一汤防治糖尿病肾病的药效物质基础。     

基于综合评分法的不同产地加工方法对天花粉药材质量的影响

目的为了优选黔产天花粉的最佳产地加工方法。方法分别采用阴干、晒干、烘干、微波干燥、水浸后捣碎晒干等不同加工方法对新鲜天花粉药材进行加工处理,以天花粉蛋白、多糖、皂苷、水溶性浸出物、醇溶性浸出物为评价指标,采用综合评分法优选天花粉的最佳产地加工方法。结果天花粉不同产地加工方法的综合评分值差异较大,从大到小的顺序依次为微波干燥(0.71)﹥烘干(0.47)﹥晒干(0.25)﹥阴干(0.17)﹥水浸后捣碎晒干(0.00)。结论微波干燥为天花粉的最佳产地加工方法,最佳工艺为:取天花粉鲜药材,除去杂质泥土,刮去外皮,切成0.5cm厚的斜片,于55℃微波干燥箱中烘干。该方法能较好地控制天花粉药材的质量。     

戊己胃漂浮缓释片提取方法考察

目的:优选戊己胃漂浮缓释片的提取方法。方法:采用高效液相色谱法测定,以芍药苷、盐酸小檗碱、吴茱萸碱及吴茱萸次碱的含量为指标,对提取方法、提取溶剂、提取溶剂浓度和提取时间进行考察。结果:优化的提取条件为以纯甲醇为提取溶剂,超声提取30min。结论:优化提取工艺简便、稳定合理可行,为戊己胃漂浮缓释片提取方法及质量控制提供了较好的实验依据。     

高效液相色谱法测定葛根芩连结肠定位片中葛根素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定葛根芩连结肠定位片中葛根素含量的方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.015mol/L磷酸二氢钾溶液;检测波长:270nm;流速:1m L·min-1;柱温:30℃。结果:葛根素在0.02040~0.1226mg·m L-1范围内浓度与峰面积呈良好线性,线性方程为Y=23952860.5024X,R=0.9999,平均加样回收率为101.2%,RSD为1.7%。结论:本实验建立的含量测定方法简便快捷,结果准确,可用于葛根芩连结肠定位片质量控制。     

基于综合评分法的不同产地加工方法对黔产瓜蒌皮的质量影响

目的:优选黔产瓜蒌皮最佳产地加工方法。方法:分别采用阴干、晒干、烘干等不同加工方法对新鲜瓜蒌皮药材进行加工处理,以瓜蒌皮多糖、氨基酸、水溶性浸出物、醇溶性浸出物为评价指标,采用综合评分法优选瓜蒌皮最佳产地加工方法。结果:瓜蒌皮不同产地加工方法的综合评分值差异较大,从大到小的顺序依次为:30℃烘干(0.94)﹥60℃烘干(0.72)﹥70℃烘干(0.63)﹥50℃烘干(0.61)﹥40℃烘干(0.57)﹥晒干(0.27)﹥阴干(0.00)。结论:30℃烘干是瓜蒌皮的最佳产地加工方法,最佳工艺为:取新鲜瓜蒌皮,切成1~2cm宽的长条,于30℃的烘箱内干燥。