二甲双胍对人HER2阳性乳腺癌细胞作用的体外研究

回顾性临床研究表明,二甲双胍能改善伴发2型糖尿病的乳腺癌患者的预后[1].本研究通过检验二甲双胍对HER2阳性乳腺癌细胞的体外增殖、细胞凋亡、热休克蛋白90 (heat shock protein 90,HSP90)表达等的影响,探讨二甲双胍对HER2阳性乳腺癌的作用及可能的分子机制. 材料与方法 一、主要材料与实验试剂 乳腺癌细胞系SK-BR-3(ER-/PR-/Her-2+++)由复旦大学乳腺癌研究所提供.DMEM培养液、胎牛血清由Gibco公司生产.MTT、二甲双胍由Sigma公司生产,AnnexinV-FITC&PI凋亡检测试剂盒由南京凯基生物公司提供,产品编号:KGA105,鼠HSP90一抗由Abcam公司生产,鼠GAPDH一抗及鼠抗兔二抗由SANTA公司生产.     

CXCR7-shRNA慢病毒表达载体对人结肠癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨CXCR7-shRNA慢病毒表达载体靶向抑制CXCR7的表达对人结肠癌细胞增殖、迁移活性的影响.方法 将人结肠癌细胞HT-29分为实验组、阴性对照组和空白对照组;实验组加入CXCR7-shRNA慢病毒表达载体;阴性对照组加入CXCR7-shRNA慢病毒阴性对照;空白对照组不做任何处理.Westrn blot方...     

甲状腺手术中显露喉返神经的可行性分析

目的 探讨甲状腺手术中显露喉返神经的可行性.方法 回顾性分析430例甲状腺手术中显露喉返神经患者(显露组)及400例甲状腺手术中不显露喉返神经患者(对照组)的临床资料,比较两组喉返神经损伤、喉上神经损伤、甲状旁腺损伤的发生率.结果 显露组发生暂时性喉返神经损伤5例(1.2％,5/430),永久性喉返神经损伤0例,对照组分别为7例(1.8％,7/400)、6例(1.5％,6/400),两组暂时性喉返神经损伤发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05),而两组永久性喉返神经损伤发生率比较差异有统计学意义(P＜0.01);两组喉上神经损伤、甲状旁腺损伤发生率比较差异无统计学意义(P＞ 0.05).结论 甲状腺手术中显露喉返神经安全、可行,是预防喉返神经损伤的可靠方法.     

胸乳入路腔镜甲状腺癌根治术经验探讨

目的 探讨经胸乳入路腔镜甲状腺癌根治术的临床应用价值.方法 回顾性分析13例胸乳入路腔镜甲状腺癌根治手术患者的临床资料.结果 11例成功完成手术,2例因术中操作困难中转开放手术;其中1例术后第2天出现声音嘶哑,1个月后发音恢复正常;本组患者均未出现呛咳、呼吸困难、四肢麻木及抽搐等并发症;术后常规口服左甲状腺素片,随访2～28个月,平均17个月,未发现局部复发、区域淋巴结转移、胸前壁皮下“隧道”种植和远处转移病例.结论 对低危的分化型甲状腺癌患者施行经胸乳入路腔镜甲状腺癌根治术,疗效可靠、安全性高,美容效果满意.     

腔镜手术序贯131I消融治疗甲状腺癌的可行性研究

目的探讨腔镜手术序贯131I消融治疗甲状腺癌的可行性。方法回顾性分析2008年2月至2011年10月我院收治39例低危甲状腺癌患者临床资料,其中行腔镜手术序贯131I消融治疗19例(腔镜组),行传统开放手术治疗20例(传统组),统计学分析两组间手术时间、术中出血量、术后引流量、术后肿瘤种植及复发转移率、患者切口满意度和并发症发生率等指标的差异。结果腔镜组19例患者均成功完成手术。腔镜组术后患者满意度高于传统组,有显著性统计学差异(P<0.01);而手术时间、术中出血量、术后引流量、术后并发症、术后肿瘤种植及复发转移,两组间无统计学差异(P>0.05)。结论腔镜手术序贯131I消融治疗低危的分化型甲状腺癌安全、可行。     

槲皮素诱导下乳腺癌细胞对三苯氧胺耐药的增敏效应

目的探讨槲皮素对逆转乳腺癌细胞内分泌耐药的应用价值。方法选用雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞株MCF-7,高浓度短时间冲击法建立三苯氧胺(tamoxifen,TAM)耐药细胞株(MCF-7Ca/TAM-R)。根据槲皮素给药浓度将实验组MCF-7Ca/TAM-R细胞分为实验1组(10μmol/L)、实验2组(25μmol/L)和实验3组(50μmol/L),各浓度组再分成2个亚组:槲皮素+OHT(4-hydroxytamoxifen,4-OH-TAM)同时干预组、槲皮素干预12 h后加入OHT序贯干预组;阴性对照组加入OHT;空白对照组不加任何药物。噻唑蓝法(MTT)检测各组细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测各组细胞的凋亡。结果高浓度短时间冲击法成功建立人乳腺癌三苯氧胺耐药细胞株。各实验组细胞均有不同程度的增殖抑制和凋亡(P=0.000),该效应随槲皮素诱导剂量的递增而增强(P=0.000);低剂量(10μmol/L)用药对耐药细胞的增殖和凋亡无显著影响(P>0.05和P>0.002),槲皮素和三苯氧胺同时或序贯给药差异亦无统计学意义(P>0.05和P>0.002)。结论在槲皮素诱导下,三苯氧胺对耐药细胞的增殖抑制和凋亡效应随槲皮素诱导剂量的增加而增强,提示槲皮素可能具有逆转乳腺癌细胞对三苯氧胺的耐药性,该效应与槲皮素和三苯氧胺同时或序贯给药无关。     

慢病毒介导的双自杀基因诱导胃癌细胞凋亡的研究

目的 观察慢病毒介导的KDR启动子驱动的CD/TK双自杀基因体系对胃癌细胞SGC-7901的体外杀伤作用.方法 用重组慢病毒FGW-KDRP-CD/TK体外感染SGC-7901细胞.噻唑蓝(MTT)比色法检测前药对细胞的杀伤效应;透射电镜及流式细胞术观察细胞凋亡及细胞内DNA含量.结果 慢病毒的感染率随病毒滴度的增高而递增.当前药更昔洛韦(GCV)为100 mg/L、5-氟胞嘧啶(5-FC)为320 mg/L时,对未转基因及转基因细胞的抑制率分别为18%、94%,两者筹异有统计学意义(P<0.01).电镜下用药组出现细胞凋亡.流式细胞仪检测显示,随着药物浓度的增加,凋亡细胞所占的比例逐渐增加.结论 KDR启动子可调控双自杀基因系统选择性杀伤SGC-7901细胞,并且该体系可以诱导胃癌细胞凋亡.     

靶向抑制CXCR7基因表达对结肠癌生长的影响

目的探讨靶向抑制CXCR7基因表达对人结肠癌荷瘤裸鼠瘤体生长的影响。方法建立人结肠癌荷瘤鼠模型。将人结肠癌荷瘤裸鼠随机分为3组,治疗组：瘤体内注射LV-CXCR7shRNA 50μl;阴性对照组：瘤体内注射LV-shRNA negative control 50μl;空白对照组：瘤体内注射PBS 50μl。24天后测量瘤体的体积;处死动物,剥离瘤体,测量其重量。采用Westrn Blotting方法测定瘤体组织中CXCR7蛋白表达水平。结果治疗组瘤体体积显著缩小（P〈0.05）、重量显著减轻（P〈0.05）。治疗组瘤体组织中CXCR7蛋白表达水平显著降低（P〈0.05）。结论靶向抑制CXCR7基因的表达能显著抑制人结肠癌荷瘤裸鼠的瘤体生长,CXCR7是人结肠癌治疗潜在的分子靶标。     

肿瘤细胞在活体小鼠肝脏微循环中动态变化的可视性研究

目的:在小鼠活体内动态观察肿瘤细胞在肝脏微循环中的运动、分布及凋亡。方法:用Calcein AM荧光标记B16F1黑色素瘤细胞,将其注射入C57BL/6小鼠的肠系膜静脉,在荧光倒置显微镜下动态观察肿瘤细胞在肝脏微循环中的运动及分布,测量并计算肿瘤细胞在终末门静脉中的运动速度。注射肿瘤细胞8小时后,切取肝脏,用凋亡标记荧光素对肝组织切片进行原位DNA末端标记,在荧光显微镜下计算凋亡细胞百分比。结果:B16F1黑色素瘤细胞进入肝脏微循环中后,90%的细胞通过机械性嵌顿停留在肝窦中,10%的肿瘤细胞通过黏附停留在终末门静脉中,B16F1细胞在肝脏终末门静脉中的运动速度为648±53μm/s。在注射肿瘤细胞8小时后,在肝窦中约有30%的肿瘤细胞发生凋亡,在终末门静脉中约有10%的肿瘤细胞发生凋亡。结论:利用荧光标记的肿瘤细胞及荧光倒置显微镜为探讨肿瘤肝转移机制提供了一个良好的活体观察方法。     

经胸乳入路腔镜甲状腺手术的临床应用

目的 探讨胸乳入路腔镜甲状腺手术的临床应用价值.方法 回顾分析2009年8月～2012年7月52例经胸乳入路腔镜甲状腺手术的临床资料.结果 52例手术均成功,其中甲状腺腺瘤切除术11例,单侧甲状腺部分或大部分切除术33例,双侧甲状腺大部分切除术8例.平均手术时间95m in(75～130m in),术中出血量25 mL(15～40 mL),术后住院时间6d(5～7d).术后无严重并发症.52例随访1～6个月,无复发,所有患者对美体效果满意.结论 胸乳入路腔镜甲状腺手术安全、可行,值得临床推广.