基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨炙甘草汤抗大鼠MIRI致室速和室颤的作用机制

目的:通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,探讨炙甘草汤干预心肌缺血再灌注损伤(MIRI)致心律失常(室速和室颤)的作用及其机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,炙甘草汤低、中、高剂量组(11.43,22.86,45.72 g·kg~(-1)),稳心颗粒组(2.43 g·kg~(-1)),连续给药干预10 d。末次给药2 h,采用结扎冠状动脉左前降支法制备大鼠MIRI模型,记录心电图的变化。造模成功后采集血液及心脏组织,检测血清中肌酸肌酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)及丙氨酸氨基转移酶(AST)的含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌肌钙蛋白(CtnI)的含量;免疫组化法检测心肌PI3K,Akt,mTOR的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3),自噬标志物Beclin1和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达及磷酸化p-PI3K,p-Akt,p-mTOR的水平。结果:模型组大鼠100%发生室速,91.67%发生室颤;与假手术组比较,模型组大鼠血清CK,LDH,AST以及CtnI的含量显著升高(P0.01),心肌组织中PI3K,Akt,mTOR表达显著升高(P0.01),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin1的相对表达量显著升高(P0.01),p-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt,p-mTOR/mTOR显著降低(P0.01);与模型组比较,炙甘草汤高剂量组室速、室颤发生率显著降低(P0.01),较其他给药组持续时间短(P0.01);炙甘草汤高剂量组CK,LDH,AST水平及CtnI含量显著降低(P0.01);炙甘草汤给药组的PI3K,Akt,mTOR的表达随剂量的增加而显著降低(P0.01);LC-3,Beclin1的表达随炙甘草汤各剂量组的增加有不同程度地下降(P0.01),而PI3K/Akt/mTOR相关蛋白表达比值明显升高(P0.05,P0.01)。结论:炙甘草汤预处理能使异常升高的心肌酶CK,LDH,AST,CtnI降低,抑制细胞的过度自噬,上调PI3K,Akt和mTOR的表达,说明炙甘草汤抗MIRI致心律失常的作用可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

益心解毒方对Nox2和Nox4亚基过表达的心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响

目的通过观察益心解毒方含药血清对Nox2、Nox4亚基过表达的H9c2心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响,揭示其作用环节是否与干预相应亚型的NADPH氧化酶调控环节有关。方法采用PCR方法扩增Nox2、Nox4基因全长序列,经双酶切、连接载体和转化后提取重组质粒,经酶切鉴定的阳性质粒进行DNA测序,测序正确后按照lipofectamine 2000试剂的说明书瞬时转染H9c2细胞,转染后的心肌细胞分组给予不同的药物干预,24 h后检测NADPH氧化酶活性。结果 1含有Nox2/Nox4亚基的重组质粒载体通过测序鉴定,结果与Gen Bank报道的完全一致。2通过荧光显微镜下观察转染72 h后的H9c2细胞,可见大量发绿色荧光的细胞,流式细胞术计数结果显示转染率均在60%左右,符合实验要求。3空质粒载体组、模型组、益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达明显高于正常组(P<0.01,P<0.05);模型组和益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达高于空载体组(P<0.01);模型组NADPH氧化酶活性表达均明显高于其他各组,而益心解毒方各组的NADPH氧化酶活性表达均明显低于模型组(P<0.01,P<0.05)。结论成功构建大鼠心肌细胞Nox2、Nox4亚基的重组质粒载体,该重组质粒载体可以在心肌细胞中过表达,益心解毒方可以有效地降低NADPH氧化酶活性的表达。提示此复方治疗心衰的机制可能是抑制了Nox2和Nox4型NADPH氧化酶的表达。     

炙甘草汤治疗心律失常的研究进展

通过对近10年炙甘草汤治疗心律失常的相关文献分析,概述经方炙甘草治疗心律失常的研究进展情况。由方论解读可知炙甘草汤的组成、煎煮方法和适用范围;临床观察和实验研究文献显示,炙甘草汤组的临床疗效优于常规治疗组的疗效,且不良反应少;实验结果表明炙甘草汤对多种心律失常大鼠模型具有防治作用。证实炙甘草汤具有明显的抗心律失常作用,为临床推广应用炙甘草汤治疗心律失常提供了临床及实验依据。     

小柴胡汤对C6 胶质瘤抑瘤作用的实验研究

目的:探讨不同剂量小柴胡汤对体外培养的C6 胶质瘤细胞的抑瘤作用及其作用机理。方法:将C6 胶质瘤细胞分别接种于96 孔、24 孔及6 孔培养板中,每种培养板均分为4 组:对照组、小柴胡汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,待细胞铺满培养板底80% ~90%,开始加药,培养24 小时后终止培养。采用CCK-8、活体染色、ELISA、免疫细胞化学及流式细胞仪检测细胞增殖活性、细胞存活率、ESM-1 和VEGF 的蛋白含量及蛋白阳性表达强度和细胞的早期、晚期凋亡状况。结果:CCK-8 法检测显示小柴胡汤低、中、高剂量组对C6 胶质瘤细胞的生长均有抑制作用; ELISA 和免疫细胞化学法显示,小柴胡汤低、中、高剂量组均能降低ESM鄄1 和VEGF 的蛋白阳性表达强度及蛋白含量水平;流式细胞仪检测显示小柴胡汤低、中、高剂量组均能促进细胞凋亡;倒置显微镜观察可见随剂量增加细胞排列逐渐松散、萎缩,细胞漂浮死亡数量增多;各种检测法均显示随剂量增加抑制作用增强且具有剂量依赖性,组间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:小柴胡汤对C6 胶质瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,它可能通过下调ESM-1 和VEGF 蛋白水平、促进细胞凋亡,从而发挥抑瘤作用。     

玉屏风散治疗慢性肾小球肾炎的临床疗效评价及作用机制研究（英文）

本研究通过meta分析评价玉屏风散(YPF)治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的临床疗效,并利用网络药理学和分子对接探讨其作用机制。检索国内外数据库CNKI、维普、中国生物医学、万方、PubMed和Cochrane建库至2023年5月YPF治疗CGN临床随机对照试验,根据纳入和排除标准,纳入研究。运用RevMan5.4软件进行质量评估和meta分析,使用TSABeta软件对主要结局指标进行序贯分析。通过TCMSP、GeneC ards、OMIM、TTD数据库检索YPF的有效成分及CGN靶点,利用Venny2.1.0获取两者交集靶点,运用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析。通过AutoDockVina1.5.6软件进行分子对接。共纳入14项研究, 1072名患者。meta分析结果显示, YPF在治疗CGN的临床总有效率[OR=6.99, 95%CI (4.68, 10.44)],证候改善率[OR=3.16, 95%CI (1.43, 6.98)],降低24小时尿蛋白[SMD=–1.90, 95%CI (–2.54,–1.25)]、血清肌酐[SMD=–0.38,95%CI (–0.57,...     

朱宗元治疗慢性肾炎临证思辨特点探析

本校朱宗元教授从医40余载，在临床工作中积累了丰富的治疗经验，对中医药治疗多种疾病有独特见解；能中西汇通，取长补短，尤其在治疗慢性肾炎方面成效卓著。笔者曾随师侍诊，获益匪浅，现将朱师治疗慢性肾炎临证思辨特点介绍如下。     

荜茇及其有效成分降脂抗动脉粥样硬化研究概况

本文综述了国内外有关荜茇及其有效成分的降脂、抗动脉粥样硬化方面的研究进展,并结合本课题组的研究结果,认为荜茇及其有效成分胡椒碱、荜茇宁等具有显著的降血脂作用,特别是荜茇宁不仅降脂、抗动脉粥样硬化作用显著,而且毒性极低,是极具开发前景的降脂化合物.荜茇宁的作用机制可能是通过提高高脂血症大鼠肝脏LDLR基因表达,降低ApoB基因表达而起到降脂作用;通过调节脂代谢紊乱、增强抗氧化酶类活性、减轻脂质过氧化物对血管内皮的损伤、降低主动脉LOX-1和VCAM-1基因表达起到抗动脉粥样硬化作用.     

从蒿芩清胆汤药效学研究探讨创新性优势作用

按中药药理学、中药新制剂开发与应用的要求,通过"蒿芩清胆汤"的解热、抗菌、抗内毒素、抗炎、抗病毒、免疫调节、抗胆道感染和利尿、对胃肠调节、对湿热模型的影响等药效学及制剂学、质量标准、慢性毒性、对比验证等方面的实验研究及有关理论的有益探索,以揭示蒿芩清胆汤的药效原理、创新特点及相关理论、以及在制剂学、质量标准、毒理学等方面的实际应用价值,为今后治疗外感热病药物的研发、临床的推广运用奠定可靠的、科学的实验研究基础及理论根据,也必定会对某些外感热病的临床治疗产生很好的现实意义。     

额尔敦-乌日勒在家兔动脉粥样硬化斑块消退中的作用及其对炎症因子的影响

目的:观察额尔敦-乌日勒对动脉粥样硬化消退的影响,并检测相关炎症因子,探讨其作用机制.方法:用高胆固醇喂养方法复制家兔动脉粥样硬化模型,并予额尔敦-乌日勒干预治疗12w.于实验结束时检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇( HLD-C)和血清中炎性标志物高敏C...     

中医高校临床课程教学及考试改革思路与设想

<正>据统计我国从业中医人数只有40万人左右,而西医从业人数约550万人,中医高校肩负着中医药人才培养的艰巨任务,人才的培养既要符合中医药学科人才自身发展规律,又要适应飞速发展的社会需求。特别是具有中医思维和临床临证能力及与病人沟通能力较强的毕业生。然而,现行高校的临床课程教学与考试现状并非能适应中医药人才的培养目标,本文针对高校的临床课教学和考试现状提出改革的思路与设想。