黄芪多糖抑制小鼠EAE 及调控BV-2 神经小胶质细胞活化的实验研究

目的:研究黄芪多糖(APS)对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的治疗作用以及对参与EAE 发病机制的神经小胶质细胞活化的调控作用及其可能的作用机制。方法:动物实验:MOG35-55 诱导C57BL/6 小鼠建立EAE 模型,予APS 给药干预,通过5 级临床症状评分观察APS 对小鼠EAE 的治疗作用。细胞实验:MTT 法检测脂多糖(LPS)对于BV-2 神经小胶质细胞的增殖抑制作用,筛选合适的LPS 刺激浓度活化神经小胶质细胞,构建BV-2 神经小胶质细胞活化的模型;倒置显微镜观察BV-2 神经小胶质细胞形态学的改变;ELISA 法检测BV-2 神经小胶质细胞IFN-酌、TNF-α的分泌水平变化;观察不同浓度的APS 对BV-2 神经小胶质细胞活化的调控作用;APS 干预后,Western blot、Real-time PCR 方法分别检测BV-2 神经小胶质细胞PD-L1 蛋白和mRNA 表达水平的变化。结果:APS 能够有效治疗小鼠EAE 的临床症状,成功建立了体外BV-2 神经小胶质细胞活化模型,一定浓度的APS 能够抑制BV-2 神经小胶质细胞的活化,提高活化的BV-2 细胞的生存活性,降低IFN-酌、TNF-α的分泌水平,促进活化的BV-2 神经小胶质细胞PD-L1 基因及蛋白表达上调。结论:APS 对小鼠EAE 具有明显的治疗作用,其发挥作用的机制可能是APS 能够有效抑制神经小胶质细胞的活化,降低炎性细胞因子IFN-酌、TNF-α的分泌,对神经小胶质细胞有抗炎保护作用,PD-1/ PD-L1 通路可能是APS 发挥抗炎作用的重要途径。     

血清细胞因子IL-17 与脱髓鞘性神经病多发性硬化相关性的研究: Meta分析

目的:系统评价血清细胞因子白细胞介素17(Interluekin-17,IL-17)与脱髓鞘性神经病多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)的相关性。方法:全面检索PubMed、SpringerLink、Embases、OVID、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)、中国生物医学文献服务系统(SinoMed)、万方医药期刊数据库(WAN FANG)等。中文检索词以“多发性硬化冶和“白细胞介素17 或Interleukin-17 或IL-17冶为并列检索词,英文检索词为“multiple sclerosis or MS冶and“Interleukin-17 orIL-17”。软件版本为Review Manager 5.3,检索年限限定2000 年1 月1 日到2017 年3 月10 日,检索语言不限。结果:最终纳入8 个病例对照研究,发表年份在2008 ~2016 年间,共纳入544 例研究对象,其中MS 组299 例,对照组245 例,合并分析结果显示:合并效应加权均差WMD=38.65,95% 可信区间:(18.66,58.63),表明总体合并结果有显著性差异,即MS 组血清IL-17水平明显高于对照组。结论:MS 患者血清IL-17 水平明显高于健康人群,IL-17 水平可能作为诊断MS 的一个新的生物标志物和有效防治MS 的一个新靶点。     

黄芪多糖对C17.2神经干细胞定向分化的调控作用

目的:观察黄芪多糖(APS)对C17.2神经干细胞体外定向分化的调控作用。方法:建立C17.2神经干细胞的体外培养体系及分化模型,设置APS干预组及PBS对照组。诱导分化4 d后通过细胞免疫荧光染色的方法检测2组细胞中神经干细胞的标志性蛋白巢蛋白(Nestin)、星形胶质细胞的标志性蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞的标志性蛋白髓鞘碱性蛋白(MBP)及神经元的标志性蛋白神经元特异性核心抗原(NeuN)的表达水平。结果:与PBS对照组比较,APS干预组细胞的Nestin及GFAP蛋白表达水平明显下调,MBP及NeuN蛋白表达水平明显上调差异有统计学意义(P 0.05)。APS下调了分化模型中的细胞Nestin蛋白的表达水平;APS下调了GFAP蛋白的表达水平,上调了MBP及NeuN蛋白的表达水平。结论:APS可抑制C17.2神经干细胞向星形胶质细胞的定向分化,促进向少突胶质细胞及神经元的定向分化,APS可抑制C17.2神经干细胞的干性维持,促进其进入分化状态,有可能成为治疗神经退行性疾病的潜在药物。     

多发性硬化中医辨证论治的临床随机对照研究:Meta分析

目的:系统评价中医辨证论治多发性硬化(MS)的临床疗效。方法:全面检索中国期刊全文数据库、维普中文科技期刊全文数据库、中国生物医学文献服务系统、万方医药期刊数据库、Pub Med、Cochrane图书馆等数据库。中文检索词以"多发性硬化"和"中药或针灸或中西医结合"为并列检索词,英文检索词为"multiple sclerosis or MS"AND"traditional Chinese medicine or herb or herbal or acupuncture or combined traditional Chinese and western medicine"检索中医辨证治疗MS的随机对照临床试验文献,时间区间设定为2000年1月1日—2016年10月30日。按照Cochrane系统评价手册推荐的简单评价法,评价纳入研究的方法学质量。软件版本为Review Manger 5.3,结局效应指标分别为EDSS评分(EDSS)、有效率、复发次数、临床症状评分、神经功能体征评分。结果:最终纳入16个随机对照临床试验,共906例研究对象。所纳入的研究中有13项研究报道了EDSS评分,纳入统计的为11项,试验组与对照组比较,MD及95%CI为-0.96(-1.50,-0.41),P0.05,有统计学差异;有12项研究观察了有效率,11项研究可提取有效数据,OR值为4.93,95%CI为(3.05,7.96),P0.001,统计学有显著差异;有3项研究对患者进行了复发次数评价,MD及95%CI为-0.43(-0.67,-0.19),P0.05,有统计学差异;有8项研究观察了临床症状评分,7项可提取有效数据,MD及95%CI为-1.09(-3.41,1.23),P0.05,统计学无差异;有4项研究观察了神经功能体征评分,试验组与对照组比较,MD及95%CI为-1.86(-4.70,0.97),P0.05,统计学无差异。结论:中医辨证论治结合西药治疗MS相对于单纯西药治疗,提高了其有效率,减少MS的复发次数,改善神经功能缺损。     

Toll样受体与肿瘤预后相关性的Meta分析

目的:系统评价Toll样受体（Toll-like receptors,TLRs)在肿瘤组织中的表达水平及与肿瘤患者预后的相关性。方法:计算机检索中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库（WF）、中文科技期刊数据库（VIP）、中国生物医学文献服务系统（Sinomed）、PubMed、The Cochrane Library、EMbase数据库,收集TLRs与肿瘤预后相关性的病例对照研究,检索时间为自建库起截止至2020年09月04日。根据纳入排除标准对文献进行筛选,经质量评价、数据提取后使用Stata 15.0软件对总生存期（overall survival,OS）、无进展生存期（disease-free survial,DFS）进行Meta分析。结果:最终纳入35篇文献,共4 472例患者,其中24篇涉及TLR4,7篇涉及TLR3,7篇涉及TLR9。结果表明,与对照组相比,TLR4阳性或高表达组肿瘤患者OS及 DFS较短（HR＝0.342,95％CI:0.098~0.586,P＝0.006;HR＝0.543,95％CI:0.278~0.809,P＝0.000）。TLR3阳性/高表达与晚期患者较好预后相关（HR＝-1.086,95％CI:-1.716~-0.455,P＝0.001）。TLR9阳性/高表达与早期患者的不良预后相关（HR＝0.656,95％CI:0.250~1.063,P＝0.002）。结论:不同亚型TLRs在肿瘤中发挥的作用不同,TLR4和TLR9阳性/高表达与肿瘤不良预后相关,TLR3阳性/高表达与晚期肿瘤患者较好预后相关,TLR3、TLR4、TLR9有望成为预测肿瘤预后的新型标志物。     

神经系统自身免疫病中西医结合疗法Meta分析

目的:系统评价中西医结合疗法治疗神经系统自身免疫病的临床疗效。方法:全面检索中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献服务系统、万方医药期刊数据库、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)、Pubmed、Cochrane图书馆等数据库,收集中西医结合治疗神经系统自身免疫病的随机对照试验,时间区间为2000年1月1日至2017年12月31日。神经系统自身免疫病主要发生在中枢神经以及周围神经,故本研究对中枢神经系统的多发性硬化,以及周围神经系统的格林-巴利综合征进行Meta分析。对纳入的文献进行偏倚风险和质量评估,并对中西医结合疗法治疗多发性硬化的Kurtzke扩展残疾状态量表(Kurtzke Extended Disability Status Scale,EDSS)、有效率、临床症状评分、神经功能体征评分、复发次数、不良反应发生率以及中西医结合疗法治疗格林-巴利综合征的有效率、Hughes评分进行Meta分析。结果:多发性硬化最终纳入16个随机对照试验,共800例。Meta分析结果显示,10项研究观察EDSS评分,9项研究可提取有效数据,MD值为-1. 07,95%CI为-1. 79,-0. 36,差异有统计学意义(P 0. 05); 10项研究观察有效率,OR为5. 91,95%CI为3. 51,9. 94,差异有统计学意义(P 0. 05); 4项研究进行临床症状评分,MD值为0. 30,95%CI为-3. 71,4. 31,差异无统计学意义(P=0. 88 0. 05); 3项研究进行神经功能体征评分,MD值为-2. 11,95%CI为-6. 86,2. 64,差异无统计学意义(P=0. 38 0. 05); 3项研究观察复发次数,MD值为-0. 41,95%CI为-0. 56,-0. 26,差异有统计学意义(P 0. 05); 4项研究观察不良反应的发生率,3项研究可提取有效数据,OR值为0. 20,95%CI为0. 03,1. 42,差异无统计学意义(P0. 05)。格林-巴利综合征最终纳入9个随机对照临床试验,共599例研究对象。纳入的9篇文献中,有9项观察了有效率,观察组与对照组比较,OR值为3. 38,95%CI为1. 87,6. 14,差异有统计学意义(P 0. 05); 3项研究观察了Hughes评分,MD值为-0. 41,95%CI为-0. 75,-0. 07,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:中西医结合疗法治疗多发性硬化相较于单纯西药治疗,提高了其有效率,减少了复发次数以及改善了神经功能缺损;于格林-巴利综合征而言,同样在有效率方面具有明显的优势,同时也改善了其肢体功能情况,进而说明中西医结合治疗神经系统自身免疫病有显著的临床疗效。     

复发性口腔溃疡症状积分与炎性细胞因子的相关性及加味黄连甘草汤的治疗作用

目的:探讨复发性口腔溃疡(ROU)患者症状积分与血清炎性细胞因子的相关性,并评价加味黄连甘草汤对炎性细胞因子的影响。方法:招募符合纳入标准的心脾积热型ROU患者,观察中医症候评分,检测治疗前后患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素(IL-2R、IL-6、IL-10)水平,并用统计软件SPSS分析中医症状积分与TNF-α、IL-2R、IL-6、IL-10的相关性。通过随机、双盲双模拟、平行对照的方法,治疗组采用加味黄连甘草汤颗粒+极低剂量维生素B2片(维生素B210%的药量);对照组维生素B2片+极低剂量加味黄连甘草汤颗粒(含加味黄连甘草汤10%的药量),疗程为2周。评价患者的证候疗效及对细胞炎症因子的影响与不良反应。结果:治疗前患者TNF-α、IL-6较正常值明显升高,IL-2R明显降低(均P0.05);而IL-10无明显差异。经相关性分析,溃疡症状积分与TNF-α、IL-6具有明显的正相关性,而与IL-2R、IL-10无明显相关性。经治疗,治疗组总有效率明显高于对照组(P0.01),证候总积分明显低于对照组(P0.05)。治疗组TNF-α、IL-6值的下降幅度大于对照组,但无显著性差异(P0.05);治疗组IL-2R较前增加而对照组较前降低,但都在正常范围内变动;IL-10两组均无明显变化。两组患者治疗期间均未发生严重不良反应。结论:炎性细胞因子TNF-α、IL-6与ROU溃疡的严重程度有相关性;加味黄连甘草汤颗粒对心脾积热型ROU有明显的治疗作用。