丹酚酸B对大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中Desmin、α-actin mRNA表达的影响

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B（SalB）在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为心肌样细胞的情况及Desmin和d—actinmRNA的表达，确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点。[方法]选用成年近交系Wistar大鼠，利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs，并进行培养扩增。免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定。分别应用10μmol／L5-氮胞苷（5-azacytidine，5-aza）及250μg，LSalB联合5-aza（5-aza＋SalB）对第9代的MSCs进行联合诱导24h，于诱导后第4周，用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测Desmin、α-actinmRNA的表达。[结果]1）第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达，CD34呈阴性表达。2）诱导4周后，细胞体积变小，可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。5-aza组、5-aza＋SalB组均出现明确的心肌早期分化基因与5-aza组相比，5-aza＋SalB组的Desmin和α—actinm RNA表达明显增强。[结论]SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用。     

不同磁感强度磁场对人脑微血管内皮细胞生物学效应的影响

目的 观察不同磁感强度磁场对人脑微血管内皮细胞（HBMEC）生物学效应的影响。 方法 提取传代后处于对数生长期的HBMEC并将其分为对照组、不同强度（其极面中心磁感强度分别为26mT、62.5mT、110.7mT、215.6mT)磁场组。经体外培养72h后,分别采用乳酸脱氢酶（LDH）法检测各组细胞细胞膜改变,采用超氧化物歧化酶（SOD）法、丙二醛（MDA）法检测磁场对细胞氧化损伤的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪观察细胞凋亡情况。 结果 与对照组比较,磁感强度为215.6mT的磁场组细胞LDH值明显升高,组间差异具有统计学意义（P<0.05）,其细胞氧化损伤、凋亡情况与对照组间差异无统计学意义（P>0.05）,细胞形态也无明显改变;与对照组比较,磁感强度26mT、62.5mT、110.7mT的磁场组细胞LDH值、细胞氧化损伤及凋亡均无明显差异（P>0.05）,细胞形态无明显改变。 结论 不同磁感强度磁场对HBMEC生物学效应的影响不同,其中磁感强度215.6mT的磁场对HBMEC细胞膜具有一定影响作用,但对细胞氧化损伤、凋亡及形态尚无明显影响,其作用效果及相关机制还有待进一步探讨。     

丹酚酸B对大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中Desmin、α-actinmRNA表达的影响

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B(SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Desmin和α-actin mRNA的表达,确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点。[方法]选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs,并进行培养扩增。免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定。分别应用10μmol/L5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)及250μg/LSalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24h,于诱导后第4周,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Desmin、α-actin mRNA的表达。[结果]1)第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达。2)诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Desmin和α-actin mRNA表达明显增强。[结论]SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用。     

银杏内酯A、B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇代谢的影响

[目的] 基于体外血脑屏障(BBB)环境, 观察高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇的代谢情况及银杏内酯A、B对其的影响。[方法] 利用Transwell装置共培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞建立体外BBB, 并与PC12细胞共培养。在Transwell 内皮细胞侧添加40 μmol/L胆固醇, 并分别给予30 μmol/L 银杏内酯A和25 μmol/L 银杏内酯B进行干预。干预结束后, 采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术, 检测胆固醇代谢关键酶低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)、胆固醇酰基转移酶(ACAT)、ATP结合盒转运子A1(ABCA1)及胆固醇24S-羟化酶基因(CYP46)在mRNA水平的表达。[结果] 高胆固醇环境下, LRP-1表达下调(P<0.01), ACAT 及ABCA1表达上调(P<0.05), CYP46的表达有上调趋势;药物干预后, 除LRP-1有不同程度的升高(P<0.05), 其余各指标均无明显变化。[结论] GKA、B对高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇代谢关键酶LRP-1的表达有一定影响。     

银杏内酯B对动脉粥样硬化家兔模型血清CRP和主动脉VCAM-1 mRNA的影响*

[目的]探讨银杏内酯B(EGB)对动脉粥样硬化家兔模型血清反应蛋白(CRP)含量和主动脉血管细胞黏附分子-1(VCAM-1mRNA)表达的影响.[方法]通过高脂饲料喂养8周复制动脉粥样硬化家兔模型,将35只家兔随机分为对照组、模型组和银杏内酯B组,8周后,银杏内酯B组加喂EGB 5 mg/(kg·d),继续喂养8周.处死前耳缘静脉取血,采用ELISA法检测血清CRP含量;处死后取主动脉,采用实时定量PCR法检测VCAM-1 mRNA表达.[结果]模型组血清CRP含量比对照组升高,银杏内酯B组血清CRP含量降低,与模型组相比两组差异均有显著性,P<0.01.模型组VCAM-1 mRNA表达比对照组升高,银杏内酯B组VCAM-1 mRNA表达降低,与模型组相比两组差异均有显著性,P<0.01.[结论]银杏内酯B能够降低动脉粥样硬化家兔模型血清CRP含量,有效抑制动脉粥样硬化家兔模型主动脉VCAM-1 mRNA表达,从而起到防治动脉粥样硬化的目的.     

子宫内膜癌961例临床病理分析

目的探讨子宫内膜癌的发病趋势和临床病理特点。方法回顾性分析天津市滨海新区塘沽妇幼保健院和天津医科大学总医院1984年至2010年收治的961例子宫内膜癌患者的临床病理资料,并分为1984-1992年、1993-2001年、2002-2010年3个时段进行对比分析。结果 1子宫内膜癌呈逐年上升趋势,3个时段发病例数也逐年增多,≤45岁患者例数逐年增多,但3个时段所占比例呈下降趋势（P〉0.05）。2发病年龄24～89岁,平均（55.8±12.8）岁,高发年龄51～60岁,占37.98%。3病理组织类型以子宫内膜样腺癌为主,占86.58%,非子宫内膜样癌逐年显著增加,占13.42%,其组织学分级、肌层浸润的深度及手术病理分期Ⅲ、Ⅳ期的比例均高于子宫内膜样腺癌,以浆液性乳头状腺癌多见,占52.71%。结论子宫内膜癌呈上升趋势,≤45岁患者例数逐年增多;非子宫内膜样癌有所增加,其分化低、侵袭性强、预后差,应高度重视。     

丹酚酸B对大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中Desmin、α-actinmRNA表达的影响

[目的]探讨丹参单体丹酚酸B(SalB)在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的情况及Desmin和α-actin mRNA的表达,确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点.[方法]选用成年近交系Wistar大鼠,利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs,并进行培养扩增.免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定.分别应用10μmol/L5-氮胞苷(5-azaeytidine,5-aza)及250μg/L SalB联合5-aza(5-aza+SalB)对第9代的MSCs进行联合诱导24 h,于诱导后第4周,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PcR)法检测Desmin、α-actin mRNA的表达.[结果] 1)第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达.2)诱导4周后,细胞体积变小,可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构.5-aza组、5-aza+SalB组均出现明确的心肌早期分化基因与5-aza组相比,5-aza+SalB组的Desmin和α-actin mRNA表达明显增强.[结论] SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用.     

银杏内酯B对胆固醇和apoE4共处理海马神经元APP的影响

目的探讨银杏内酯B对高胆固醇和apoE4共损伤海马神经元APP基因和蛋白水平的影响。方法应用高胆固醇和apoE4共处理海马神经元,形成高胆固醇细胞损伤模型。采用实时定量RTPCR的方法检测APP mRNA的表达,采用Western-blot测定APP蛋白水平。结果高胆固醇可以上调APP mRNA的表达,提高APP蛋白水平;银杏内酯B下调APP mRNA和蛋白水平的基因表达。结论高胆固醇可以通过促进β-淀粉样蛋白形成,参与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)发生、发展,银杏内酯B可以有效抑制β-淀粉样蛋白形成,为AD的治疗提供了一个可行途径。     

银杏内酯B对胆固醇和载脂蛋白E4损伤海马神经元胆固醇代谢的影响

目的 探讨银杏内酯B对高胆固醇和载脂蛋白E4(ApoE4)损伤海马神经元胆固醇代谢的影响.方法 应用40 μg/ml胆固醇和30 μg/ml ApoE4联合处理海马神经元,模拟高胆固醇细胞损伤模型.银杏内酯B对此模型进行干预后,经实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别测定低密度脂蛋白受体蛋白(LRP)1 mRNA、三磷酸腺苷结合盒转子A(ABCA) mRNA和内质网乙酰胆固醇酰基转移酶(ACAT) mRNA的表达,采用蛋白印迹法分别检测LRP1、ABCA1和ACAT1蛋白的表达.结果 模型组上调LRP1 mRNA 表达,对ABCA1和ACAT1 mRNA的表达有上调趋势,但是与对照组相比无显著差异.银杏内酯B可以有效上调ACAT1 mRNA 的表达,与模型组相比差异显著.上述因子蛋白的表达与mRNA表达趋势相一致,而且模型组与各组相比均有显著差异.结论 胆固醇和ApoE4联合作用影响神经元胆固醇的摄入、细胞内胆固醇转化和胆固醇的排出.银杏内酯B对高胆固醇环境下神经元胆固醇代谢有一定的调节作用.     

银杏内酯A／B对高胆固醇诱导的PC12细胞胆固醇代谢的影响

[目的]基于体外血脑屏障（BBB）环境,观察高胆固醇环境下PC12细胞胆固醇的代谢情况及银杏内酯A、B对其的影响。[方法]利用Transwell装置共培养星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞建立体外BBB,并与PCI2细胞共培养。在Transwell内皮细胞侧添加40μmol／L胆固醇,并分别给予30μmol／L银杏内酯A和25μmol／L银杏内酯B进行干预。干预结束后,采用反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）技术,检测胆固醇代谢关键酶低密度脂蛋白受体相关蛋白-1（LRP-1）、胆固醇酰基转移酶（ACAT）、ATP结合盒转运子A1（ABCA1）及胆固醇24S-羟化酶基因（CYP46）在mRNA水平的表达。[结果]高胆固醇环境下,LRP-1表达下调（P〈0．01）,ACAT及ABCA1表达上调（P〈0．05）,CYP46的表达有上调趋势;药物干预后,除LRP-1有不同程度的升高（P〈0．05）,其余各指标均无明显变化。[结论]GKA、B对高胆固醇环境下PCI2细胞胆固醇代谢关键酶LRP-1的表达有一定影响。