SSH技术及其在肿瘤研究中的应用

随着人类基因组计划的完成，人们已经把越来越多的目光投向不同细胞或者不同生理和病理状态下基因的差异性表达（differential display）。这些基因的选择性表达决定了机体的整个生命过程，基因表达的改变正是处于控制生物学调节机制的中心位置。对于肿瘤来说，其发生发展涉及多种基因的相互作用，这些基因的差异性表达也决定了肿瘤的多样性表型。目前分离并且克隆差异性表达基因成为了功能性基因研究的热点。对肿瘤差异基因的分离克隆不但有助于我们理解肿瘤发生发展的分子机制，而且对肿瘤的早期诊断、靶向治疗和有效预防都具有重要的生物学和临床意义。分离差异表达基因的方法有很多，我们比较熟悉的经典方法有：差异显示技术（DD-PCR）、在此基础上发展起来的代表性差异显示技术（RDA—PCR），     

感冒如何正确调护

本文简述了引起感冒的常见病毒，失治或误治会延长感冒病程，护理失宜也不利于感冒的尽快痊愈；重点从适当休息、适当饮水、适量水果、饮食宜清淡而营养、食物选择、正确排出鼻涕、慎用速效胶囊、卧室空气流通、汗后及时换内衣、新愈之体避免再次吹风受寒十个方面详述了感冒的正确调护，给感冒的临床护理增添了一些新内容。     

麻杏二陈止咳颗粒质量标准研究

目的：建立麻杏二陈止咳颗粒（麻黄,陈皮,甘草）的质量标准并进行颗粒剂型的常规检查。方法：对麻杏二陈止咳颗粒进行粒度、水分、干燥失重、溶化性、装量差异、微生物限度检查。薄层色谱法（TLC）对陈皮和甘草进行定性鉴别;高效液相色谱法（HPLC）对马兜铃酸Ⅰ（C17H11NO7）进行限量检查,对盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱进行含量测定。结果：麻杏二陈止咳颗粒的粒度、水分、干燥失重、溶化性、装量差异、微生物限度检查均符合《中华人民共和国药典》2015年版的相关规定;确定每克该颗粒中马兜铃酸Ⅰ（C17H11NO7）不得超过0.66 μg;陈皮和甘草的TLC斑点清晰,阴性无干扰;HPLC色谱中阴性对照无干扰;盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分别在10.04~100.4 μg、5.14~61.68 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均加样回收率分别为101.50%（RSD=1.15%）、100.68%（RSD=1.97%）。结论：该方法准确、稳定、可行,可用于麻杏二陈止咳颗粒的质量控制。     

经常性感冒的治疗与调摄

感冒是多发病,常人每年可数次感冒,但若因生活调摄稍有不慎即易患感冒,也就是经常性感冒,则须中医调治。今将长期以来治疗经常性感冒的临床感悟,以病因病机、兼症、治法、用药、生活调摄等为要点整理如下。     

腧穴定位方法中指寸法与骨度分寸法的差异

[目的]以骨度分寸定位法为金标准,比较指寸定位法量取腧穴的准确性。[方法]选择形体健全的学生或患者63人,以厘米(cm)为单位测量3种手指同身寸的长度与6种骨度分寸的长度;再用每一种指寸的长度(单位:cm)分别测量每一骨度分寸的长度,所得出的寸数再与该骨度规定的寸数比较,即得出差异寸数。[结果]1)绝大多数人手指同身寸与骨度规定的分寸有差异。2)3种指寸测量脐至耻骨联合上缘,所得寸数均多于规定的5寸(同身寸,下同)。3)测量胸剑联合至脐、两乳头间距、肩胛骨内缘至后中线、肘横纹至腕横纹、腘横纹至外踝尖时,所得寸数与规定寸数比较,有多有少,双向波动。[结论]1)指寸法存在取穴误差。2)尽管指寸法存在取穴误差,但绝大多数的差异均数较小,离散度也较小,所以在取靠近骨度两端的腧穴(如靠近肘、腕、膝、踝部位的腧穴:内关、足三里、悬钟、三阴交等)时,仍可使用。3)若用指寸法量取骨度中部腧穴(如上下巨虚、条口、丰隆),须从骨度一端量起,量至中部则误差会积累到明显的程度,所以,此时指寸法要在骨度分寸的矫正下使用。4)取穴应以骨度分寸定位法、体表标志定位法、简便取穴法为主。     

先天性类脂性肾上腺增生2例尸检报道

先天性类脂性肾上腺增生(Congellital Lipoid adrenal hyperplasia),系少见遗传病,国内尚未见报道,国外也仅有10余例报告。作者尸检2例,就其病理观察,作一报道。 1 病例介绍 例1,女,11个月,因反复腹泻,呕吐、发热,于1964年7月13日入院。患儿患麻疹后     

小鼠Ras激酶抑制剂(KSR)基因氨基端和羧基端真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

背量与目的已有的实验证据表明，Ras激酶抑制剂（kinase suppressor of Ras，KSR）的功能主要是作为一个支架蛋白组装MAPK及其上游调控子形成多蛋白的复合体。但KSR是否存在激酶活性，一直是争论的焦点。本研究的目的是构建小鼠KSR基因氨基端（N-KSR）和羧基端（C-KSR）的真核表达载体，并观察其在293T细胞中的表达。方法通过PCR方法扩增N-KSR和C-KSR目的片段，利用基因重组技术构建pCMV-Tag2b-N－KSR和pCMV-Tag2b-C－KSR真核表达载体，并进行酶切和测序鉴定。鉴定正确的克隆瞬时转染293T细胞，通过Western blot方法检测目的蛋白的表达。结果通过酶切和测序鉴定，pCMV-Tag2b-N-KSR和pCMV-Tag2b-C-KSR真核表达载体序列正确，编码框正确。转染后的293T细胞经Western blot检测，能够表达目的蛋白。结论成功构建了pCMV-Tag2b-N-KSR和pCMV-Tag2b-C-KSR真核表达载体并可在293T细胞中表达，为以后的研究奠定了基础。     

抗病毒退热颗粒治疗外感发热的疗效观察

目的观察抗病毒退热颗粒治疗外感发热的疗效。方法将152例外感高热患者随机分为抗病毒退热颗粒组（观察组）78例和对照组74例,分别给予抗病毒颗粒及双黄连口服液治疗,两组均治疗3天,观察治疗后两组患者体温、症状、体征、病毒阴转数和病毒感染细胞数的变化。结果观察组用药后体温正常不再复升所需平均时间（18.32±8.6）h,对照组（29.7±12.6）h,两组比较差异有统计学意义（t=6.53,P〈0.01）;观察组症状、体征速效率为79.49%,对照组为56.76%,两组比较差异有统计学意义（χ2=9.08,P〈0.01）;观察组复检59例,病毒阴转率为81.36%（48/59）;对照组复检57例,病毒阴转率为64.91%（37/57）,两组比较差异有统计学意义（χ2=4.003,P〈0.05）。结论抗病毒退热颗粒治疗外感发热综合疗效较好。     

转移抑制基因nm23-H1参与肺癌Ras信号传导机理研究

背景与目的nm23-H1基因已被证实为一种肿瘤转移抑制基因,但其作用机理尚不明了,本研究探讨nm23-H1参与肺癌Ras信号传导的机理。方法应用脂质体法将pEGFP-nm23-H1野生型和突变型质粒(WT,H118F,S120G,P96S,S44A)转染人大细胞肺癌细胞株L9981,采用免疫共沉淀与Western blot方法检测野生型和突变型nm23-H1蛋白与Ras支架蛋白KSR的关系。结果在转染了野生型和突变型质粒的五个细胞株中,鼠抗nm23-H1免疫沉淀物在86KDa处可检测到KSR的阳性条带,而各组KSR的量应用单因素方差分析比较无显著性差异(F=0.190,P=0.938)。结论本研究结果表明nm23-H1与KSR存在相互作用,但这种相互作用与nm23-H1有无突变及突变位点无关,nm23-H1可能是通过KSR参与肺癌Ras信号传导的。     

蒲黄总黄酮大孔树脂纯化工艺研究

[目的]优选分离蒲黄总黄酮的工艺条件。[方法]以总黄酮的含量为指标,分别考察以D-101大孔吸附树脂和聚酰胺树脂作为吸附剂,30%、50%、70%三种浓度的乙醇作为洗脱剂,正丁醇萃取和未萃取的前处理方法,筛选蒲黄总黄酮的纯化工艺。[结果]蒲黄醇提液经正丁醇萃取后,上大孔树脂柱,用70%乙醇作为洗脱溶剂,分离得到的总黄酮含量高于其他纯化工艺。[结论]该实验筛选的纯化工艺能有效分离蒲黄总黄酮,纯化效率较高,操作简单、重复性好,适用于蒲黄总黄酮纯化。