大黄酸PEG-PCL-PEI纳米粒的制备及体外评价

合成聚乙二醇-聚己内酯-聚乙烯亚胺(PEG-PCL-PEI)三嵌段聚合物载体材料,制备包载大黄酸(RH)的PEGPCL-PEI纳米粒(PPP-RH-NPS),并评价其理化性质和体外生物学特性。通过开环聚合和麦克尔加成反应合成得到PEG-PCL-PEI聚合物,相对分子质量为9.5×10~3,临界胶束浓度为0.723 nmol·L~(-1)。包载RH制备得到PPP-RH-NPS,外观浅黄、乳光明显,透射电镜观察纳米粒分散均匀圆整无团聚,粒径为(118.3±3.6)nm,PDI为(0.19±0.08),Zeta电位为(6.3±1.5)mV,包封率为(93.64±5.28)%,载药量为(8.57±0.53)%。透析法考察PPP-RH-NPS体外释药特征,48 h内累积释放率为75.92%,释药曲线符合Higuchi模型方程:Q=0.121 6t~(1/2)+0.069 5(R~2=0.887 4),呈缓释特性。选用兔红细胞考察其溶血率,MTT法评价其对HK-2细胞的生物安全性,在0~0.05 mmol·L~(-1)不会引起红细胞溶血和细胞毒性。流式细胞仪考察其摄取效率,PPP-RH-NPS可被细胞迅速内吞,摄取效率高,30 min内摄取完全,经激光共聚焦显微镜观察,PPP-RH-NPS能够从溶酶体进入细胞质,具有溶酶体逃逸特性。因此,该研究成功合成PEG-PCLPEI聚合物和制备得到PPP-RH-NPS,粒径分布均匀,包封率及载药量较高,摄取迅速,具有缓释特征、溶酶体逃逸特性、优良的生物安全性,是一种良好研究前景的新型纳米制剂。     

葛根素纳米脂质体的制备及体外释放特性研究

目的优化筛选葛根素纳米脂质体（puerarin nano-liposomes carriers,Pue-NLC）的制备工艺,并考察其体外释放特性。方法采用高压均质法制备Pue-NLC,正交设计优化筛选处方,HPLC法测定含量,超高速离心法结合甲醇提取法测定包封率和载药量,透射电镜观察外观,激光粒度测定仪测定其平均粒径和Zeta电位,透析袋法考察体外释放特性。结果最优工艺处方为葛根素（Pue）50 mg,2.0%单硬脂酸甘油酯（GP）∶辛酸葵酸三甘油酯（LLW）为200∶160（W/W）,0.5%泊洛沙姆（F68）水溶液,制备的Pue-NLC外观呈圆形或椭圆形,平均粒径为（102.4±5.6）nm,多分散系数为0.214±0.027,Zeta电位为（-18.8±2.7）mV,包封率为（45.9±1.43）%,载药量为（0.81±0.05）%,在生理盐水中的体外释药行为符合Weibull方程：In[In（1/1-Q）]=1.143 3 Int-0.547 0,r=0.986 0,24 h释放率为88.15%。结论高压均质法成功制备了Pue-NLC,粒径小,载药量和包封率高,具有缓释特性,具有一定的开发前景,为葛根素新型给药系统的研究提供理论基础和实践指导。     

冠心病患者外周血细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达量与斑块特征相关性分析

目的分析冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者外周血细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达量与斑块特征的相关性。方法选取2017年6月至2019年6月于山东第一医科大学附属济南人民医院心内科就诊的急性冠脉综合征患者(ACS组)82例和稳定型心绞痛患者(SAP组)57例作为研究对象,另选取同期于体检的健康体检者60例作为对照组(CON组)。比较3组外周血EMMPRIN表达水平的差异,使用冠状动脉(冠脉)CT成像和光学相关断层扫描(OCT)评估斑块特性,分析EMMPRIN水平与斑块特征的相关性。结果ACS组和SAP组患者外周血EMMPRIN表达水平明显高于CON组,且ACS组明显高于SAP组(P均<0.05)。冠脉CT成像显示,ACS组患者病变血管处软斑块最多(56.10%),纤维斑块(25.61%)和硬化斑块(18.29%)较少;SAP组患者病变血管处钙化斑块最多(52.63%),软斑块(17.54%)和纤维斑块(29.82%)较少。OCT结果显示,ACS组斑块破裂、血栓及脂质弧明显高于SAP组,而斑块纤维帽厚度明显低于SAP组(P均<0.05)。软斑块患者外周血EMMPRIN表达水平明显高于纤维斑块和钙化斑块患者,且纤维斑块患者高于钙化斑块患者(P均<0.05)。相关性分析显示,患者外周血EMMPRIN表达水平与斑块稳定程度及斑块纤维帽厚度呈明显的负相关,与斑块脂质弧呈明显的正相关(P均<0.05)。结论冠心病患者外周血EMMPRIN表达水平明显升高,且与斑块稳定性下降密切相关,其可对冠心病的早期诊断及预防提供帮助。     

pH值响应释药As_2O_3聚乙二醇-聚己内酯-聚乙烯亚胺纳米粒的制备及体外评价

目的制备包载As_2O_3的聚乙二醇-聚己内酯-聚乙烯亚胺(PEG-PCL-PEI,PPP)纳米粒(As_2O_3-PPP-NPs),并进行体外评价。方法以PPP三嵌段聚合物为载体材料,通过静电载药原理一步制备As_2O_3-PPP-NPs;电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)测定纳米药物的载药量与包封率,透析袋法考察其体外释药特性;紫外分光光度法测定As_2O_3-PPP-NPs的溶血毒性;噻唑蓝(MTT)法考察As_2O_3-PPP-NPs对人宫颈癌细胞HeLa和人肝癌细胞HepG2的细胞毒性;采用ICP-OES以及共聚焦显微镜考察HepG2细胞对As_2O_3-PPP-NPs的摄取效率以及摄取机制。结果所制备的As_2O_3-PPP-NPs呈类球形,分散良好,粒径约为88.7 nm,包封率和载药量分别为(92.75±3.83)%和(4.39±0.26)%。体外释放研究表明,As_2O_3-PPP-NPs具有缓释以及低pH响应释药的特征,能够实现肿瘤环境的特异性释药。溶血实验表明,As_2O_3的负载中和了PPP材料的正电性,从而降低了溶血毒性。细胞毒性试验表明As_2O_3-PPP-NPs对HeLa细胞和HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50值)分别为6.24、5.85μmol/L,具有较理想的抑制肿瘤细胞生长的作用。细胞摄取研究表明,As_2O_3-PPP-NPs因表面荷正电,容易被细胞摄取迅速,并具备溶酶体逃逸的特性,能实现As_2O_3在细胞浆中释放从而发挥药效。结论 As_2O_3-PPP-NPs展现出显著的缓释以及低pH响应释药的特性,并具有溶酶体逃逸的特征,是一种有潜在价值的抗实体瘤纳米递药体系。     

基于“肾藏志”理论对补肾法调控儿童注意缺陷多动障碍下丘脑-垂体-肾上腺轴的探究

基于“肾藏志”理论阐释儿童注意缺陷多动障碍(ADHD)的发生发展，认为肾精亏虚，脑失所养为其关键病机，从传统医学、现代医学角度阐述ADHD患儿下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能低下与肾虚为本的关联性，并在结构与功能上探讨“肾-髓-脑-志”通路与HPA轴的共通点，阐述HPA轴功能紊乱作为中医学肾虚本质的科学依据，结合各家经验以期为探索ADHD中医理论补充现代医学内涵。“肾藏志”理论指导下应用补肾法可调整ADHD患儿HPA轴紊乱，减轻疾病严重程度，以期为补肾法贯穿治疗ADHD提供新的思路。