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目的:探讨二型磷脂酰肌醇4磷酸酶(inositol polyphosphate 4-phosphatase type Ⅱ,INPP4B)对人急性髓系白血病THP-1细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:将携带INPP4B的重组质粒载体pEAK-Flag/INPP4B转染人THP-1细胞系(Flag-INPP4B组),同时设立未处理组为对照(Mock组)。采用qRT-PCR和Western blot分别检测实验组和对照组细胞INPP4B mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8实验检测细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2(Bcl-2-associated X/B-cell lymphoma-2,Bax/Bcl-2)以及磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)下游信号分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)和血清糖皮质激素调节激酶-3(serum and glucocorticoid regulated kinase-3,SGK3)蛋白的磷酸化水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内PI(3,4)P2和PI(3)P的水平。结果:INPP4B重组质粒载体转染THP-1细胞后,INPP4B的mRNA和蛋白水平均明显上升(mRNA:t=9.724,P=0.000;蛋白:t=19.520,P=0.000),提示在THP-1细胞中成功过表达INPP4B。与Mock组相比,Flag-INPP4B组细胞体外增殖能力明显增强(F=31.870,P=0.000)。同时,过表达INPP4B可明显降低细胞凋亡率(t=6.999,P=0.002);使促凋亡蛋白Bax的表达水平下降(t=24.710,P=0.000)、抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达水平增加(t=6.398,P=0.003)。此外,过表达INPP4B可增强THP-1细胞SGK3蛋白的磷酸化水平(t=10.470,P=0.000),而对AKT蛋白的磷酸化水平无明显影响(t=0.285,P=0.790)。最后,过表达INPP4B还可明显降低THP-1细胞中PI(3,4)P2的水平(t=4.515,P=0.011),同时明显升高PI(3)P的水平(t=5.681,P=0.005)。结论:本研究结果表明过表达INPP4B可促进人急性髓系白血病THP-1细胞的体外增殖并抵抗凋亡,其机制可能与INPP4B介导激活PI3K/SGK3信号通路有关,这提示INPP4B可作为急性髓系白血病治疗的一个潜在靶点。  相似文献   
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随着中心静脉置管在临床中的大量运用,我们熟练掌握了它的穿刺方法和护理措施。在2005年的Picc置管中,我院对八例不能行上肢静脉(贵要静脉、正中静脉、头静脉)穿刺的病人,大胆地试行了股静脉穿刺,成功率100%无任何并发症的发生。  相似文献   
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目的:探讨血清胱抑素C(Cys C)联合β2微球蛋白(β2-MG)检测在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的价值.方法:以尿微量白蛋白/尿肌酐比值(MAlb/Cr)为依据将73例糖尿病患者分为单纯糖尿病组、DN早期组及DN组,设健康对照组;比较各组血清Cys C、β2-MG、尿素(Urea)及肌酐(Scr)的变化及在各组中阳性率,分析血清Cys C、β2-MG、尿MAlb/Cr三者间的相关性.结果:DN早期组CysC、β2-MG含量较单纯糖尿病组升高,差异有统计学意义(P< 0.05,P<0.01);阳性率仅在DN早期组血清Cys C、β2-MG明显高于Urea、Scr阳性率,差异有统计学意义(P<0.05);血清Cys C与β2-MG、MAlb/Cr间呈正相关(r=0.951、0.804,P<0.05),β2-MG与MAlb/Cr间仍呈正相关(r=0.741,P<0.05).结论:联合检测血清Cys C和β2-MG对DN有较好的早期诊断价值.  相似文献   
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