体内细胞示踪技术及其应用

随着科学技术的发展,越来越多的体内细胞示踪技术被运用于医学研究中。目前常用的体内示踪技术包括核素成像、磁共振成像、光学成像等技术,这些成像的方式在特异性、敏感性、操作方式等方面都各有特点。在运用这些技术的时候,研究者需要根据成像的要求、实验对象、成像目的等综合因素,并结合各种成像的特点来考虑。本文就现有的体内细胞示踪技术作一综述。     

山莨菪碱对严重烫伤大鼠脑组织热休克蛋白70表达的影响

目的探讨山莨菪碱对烫伤后脑组织保护作用及其可能机制。方法 25只雄性SD大鼠随机分为假烫组(n=5)、烫伤组(n=10)和实验组(n=10)。实验组于建模成功后5 min给予山莨菪碱3 mg/kg,而烫伤组则于伤后5 min给予等体积的生理盐水,给药方式均腹腔内注射。其中烫伤组和实验组分别于伤后6、12 h后处死大鼠,采集脑组织。应用Western blot检测脑组织P-HSF-1和热休克蛋白70(HSP70)的表达,利用TUNNEL法检测细胞凋亡。结果烫伤组和实验组的凋亡细胞数在6、12 h较假烫组明显增高,实验组凋亡细胞数在6、12 h明显低于烫伤组(P<0.05);与烫伤组比较,6、12 h实验组脑组织P-HSF-1和HSP70的表达明显增强。结论山莨菪碱可能通过增强严重烫伤大鼠脑组织HSP70的表达来减轻烫伤后脑细胞凋亡。山莨菪碱能够促进脑组织HSF-1的磷酸化可能是其诱导HSP70表达的机制之一。     

不同预冻温度与胶原真皮支架孔径大小关系的研究

目的:观察胶原在不同的预冻温度下其内部孔径大小的情况。方法:将牛I型胶原粉末在0.5M的醋酸溶液中溶解后离心,把加入胶原的6孔板分别放入-20℃、-70℃冰箱过夜(约12h),预冻后胶原置于-70℃冻干机内冻干48h,扫描电镜(SEM)测量胶原支架内部孔径。结果:胶原溶液经冷冻干燥后呈膜状结构,经SEM测量-20℃预冻温度所得胶原侧面孔径大小在107.21~215.49μm之间,-70℃预冻温度所得胶原侧面孔径大小在62.18~133.58μm之间。结论:不同的预冻温度所形成的胶原海绵内部孔径大小不同,胶原支架在-70℃的预冻温度下获得了理想的孔径大小。     

人工皮肤的临床应用进展

探讨人工皮肤(artificialskin)目前在临床上的应用。查阅相关文献表明人工皮肤已被广泛用于皮肤病、皮肤溃疡、烧伤、外伤及手术后皮肤缺损及其他方面,并且取得了良好的治疗效果。人工皮肤在临床的治疗中显示了越来越重要的作用。本文就此综述如下。     

C57BL/6小鼠在烧伤及药理学实验中的Meeh常数取值

目的研究在烧伤及药理学实验中计算C57BL/6小鼠全身体表面积(BSA)时Meeh常数(k)的取值。方法测量20只C57BL/6小鼠的体重和BSA,并计算出小鼠的实际k值,比较其与5个正常小鼠常用k值(6.0、9.1、9.5、10.0和11.4)间的差异。结果小鼠BSA计算所得的k值为9.715±0.142,与正常小鼠常用k值比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论应用Meeh公式计算C57BL/6小鼠的BSA时,k值宜选用9.715。     

制作C57小鼠烧伤模型时Meeh常数的取值研究

目的:研究制作C57BL/6小鼠烧伤模型时适于计算全身体表面积(BSA)的Meeh常数(k)值。方法:24只6～12周正常C57BL/6小鼠,雌雄各半,将其随机分为8AM组、4PM组和0AM组,每组8只。实验前3d在8AM、12N、4PM、8PM、0AM和4AM称小鼠体质量。测定每只小鼠的BSA实际值,并据此计算其k值。分别应用4个常用k值(9.1、9.5、10和11.4)计算出每只小鼠的BSA计算值。结果:24h内小鼠的体质量差别有统计学意义,4PM时最低,0AM时最高;4PM组小鼠k值大于8AM组和0AM组,差别有统计学意义(P<0.05);将小鼠常用k值与本实验所得3个时点的k值分别进行比较,除常用k值9.5与0AM组k值之间差别无统计学意义外,其余比较差别均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。使用小鼠常用k值计算出的BSA计算值和C57BL/6小鼠的BSA实测值之间的差值最大达到了BSA实测值的23.02%。结论:制作C57BL/6小鼠烧伤模型时可按实验时间选用不同的k值,8AM时k值宜为9.617,4PM时为9.802。     

富氢林格液减轻严重烧伤大鼠延迟复苏引起的肠损伤

目的 观察富氢林格氏液（富氢液）对延迟复苏严重烧伤大鼠肠组织的保护作用。方法 制备富氢液,采用随机数字表法将36只SD大鼠随机分为3组（每组12只）即假烫组、烫伤+普通林格氏液组和烫伤+富氢液组,在普通林格氏液组和富氢液组大鼠背部造成占体表面积（TBSA） 30% 的 Ⅲ度烫伤,普通林格氏液组和富氢液组大鼠于烫伤后7h、9h、17h,分别经腹腔补给相当于总补液体积1/2、1/4、1/4的普通林格氏液或者富氢液,假烫组不补液。24h后取小肠做HE染色,检测氧化指标MDA值、MPO和SOD活性,以及促炎细胞因子IL-1β 和 TNF-α的含量。结果 相对于普通林格氏液组,富氢液组MDA值低（P<0.05）,MPO和SOD活性均低（P<0.01）;促炎细胞因子IL-1β 和 TNF-α含量在富氢液组低于普通林格氏液组（P<0.01）。结论 富氢液对烧伤延迟复苏后肠组织的保护作用主要从两方面来体现,一是降低大面积烧伤及延迟复苏所带来的氧化损伤。二是抑制延迟复苏大鼠肠组织中所产生的促炎因子IL-1β和TNF-α从而减轻肠损伤。     

泛发性疣状痣1例

患者女,19岁.因面颈部、躯干及四肢出现丘疹、疣状斑块,偶尔瘙痒19年,于2006年11月23日至我科就诊.患者出生后,其父母即发现其左面颈、双手掌、足跖皮肤出现褐色及黄色扁平丘疹,大小不一,部分融合成斑块.随着年龄增长,斑块呈条状蔓延,右面颊、躯干及四肢皮肤也相继出现淡红色丘疹及斑块,皮损接触水后偶尔有轻度瘙痒.既往史无特殊.体格检查:一般情况好,系统检查未见异常.     

以牛Ⅰ型胶原作为细胞外基质的全层人工皮肤的构建

目的:构建以牛Ⅰ型胶原为细胞外基质的具有表皮层及真皮层的人工全层皮肤.方法: 常规的细胞培养方法培养人角质形成细胞和成纤维细胞.采用-70℃预冻后,真空干燥的方法获得胶原海绵支架,并使用紫外线和戊二醛双重交联胶原支架.分别在支架两侧接种人角质形成细胞和成纤维细胞培养出全层人工皮肤.结果: 在试验中所构建的真皮,成纤维细胞生长其中,电镜下可见成纤维细胞分泌出丝状物.所得到的具有表皮层和真皮层的全层皮肤,厚约2～3 mm.在表皮层有部分角质形成细胞形成了复层,但有部分仍为单层,在真皮层均质的胶原中可见均匀分布的成纤维细胞.结论: 我们构建出的人工皮肤具有类似于人类皮肤的表皮层和真皮层,其韧性较好,不易破裂,可以用于后续动物实验.     

富氢盐水对延迟复苏烫伤大鼠血压及肺组织抗氧化能力的影响

目的 观察富氢盐水对延迟复苏烫伤大鼠血压和肺组织抗氧化能力的影响.方法 制备富氢盐水(即氢气溶解度达到饱和的生理盐水,氢浓度为0.6 mmol/L).采用随机数字表法将20只SD大鼠分为富氢盐水组和生理盐水组,每组10只.2组大鼠背部致30%TBSAⅢ度烫伤,伤后7、9、17 h,分别经腹腔给予相当于总补液量体积1/2、1/4、1/4的富氢盐水或者生理盐水,补液总量按照4 mL·kg-1·%TBSA-1(Parkland公式)计算.观察实验过程中大鼠总体情况;伤后6、24 h测收缩压;伤后24 h取大鼠肺组织,检测S0D抑制率和丙二醛含量.对实验结果进行t检验.结果 2组大鼠实验过程中无一只死亡.富氢盐水组和生理盐水组伤后6 h的收缩压分别为(87±4)、(86±5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),2组水平接近(t=0.213,P=0.834);伤后24 h,富氢盐水组收缩压[(124±7)mm Hg]高于生理盐水组[(115±6)mm Hg,t=2.958,P=0.008].富氢盐水组肺组织SOD抑制率为(0.465±0.014)%,高于生理盐水组[(0.358±0.021)%,t=11.767,P=0.000].富氢盐水组的肺组织丙二醛含量[(922±196)pmol/mg]低于生理盐水组[(1118±212)pmol/mg,t=-2.142,P=0.046].结论 用富氢盐水对烫伤大鼠行延迟复苏,更有助于其血压恢复,并通过增强抗氧化酶的作用,减轻再灌注引起的肺组织细胞损伤.