姜黄素与LY294002联合应用对前列腺癌PC-3细胞体外生长的影响

【摘要】 目的〓探讨姜黄素与PI3K/Akt抑制剂LY294002联合应用对前列腺癌PC-3细胞体外生长的影响。方法〓根据给药不同将实验分为对照组、姜黄素组、LY294002组和姜黄素组+LY294002联合组,分别加入等量的培养基、25 μmoL/L姜黄素、25 μmoL/L的LY294002和两种混合液。采用MTS法检测各组细胞的增殖情况、流式细胞仪术检测各组细胞凋亡情况、q-PCR测定各组细胞中NF-κB、P53及caspase-9的表达情况。结果〓姜黄素组、LY组和联合组的细胞增值率均较对照组明显降低,且联合组明显低于两个单独用药组(P<0.05)。姜黄素与LY294002联合作用前列腺癌PC-3细胞后,细胞总凋亡率较姜黄素及LY294002单独使用后明显增加(P值均<0.05)。联合用药组的NF-κB表达量明显低于两单独用药组(P<0.05),而P53和caspase-9的表达量均明显高于两单独用药组(P<0.05)。结论〓姜黄素与LY294002联合使用较两种药物单独使用更能有效抑制前列腺癌PC-3细胞的体外生长,作用机制可能是通过抑制NF-κB的表达从而抑制细胞增殖,并增加P53和caspase-9的表达从而促进细胞凋亡来实现的。     

输尿管软镜碎石术后配合尿石通治疗肾下盏结石的疗效观察

目的 观察输尿管软镜碎石(FURL)术后配合口服尿石通治疗肾下盏残留结石的临床疗效.方法 将63例单发肾下盏结石＜ 20 mm的患者随机分成两组,所有患者均行FURL术,且术后均大量饮水(2 500 ml/天),实验组术后口服尿石通(4 g,2次/天)治疗,对照组术后不给予药物治疗,比较两组患者术后3个月结石排净率及结石排净时间.结果 尿石通组患者术后0.5月、1月、1.5月、2月结石排净率(分别为45.16％、74.19％、87.10％、96.77％)与对照组患者(分别为12.50％、28.12％、46.87％、68.75％)比较,差异有显著统计学意义(P＜0.01),而两组患者术后2.5月和3月结石排净率比较,差异无统计学意义(P＞0.05),尿石通组患者术后结石排净时间为(0.98±0.56)月,明显短于对照组的(1.73±0.72)月,(P＜0.01).结论 尿石通对FURL术后残留于肾下盏的碎石排出有促进作用.     

芹菜素诱导膀胱癌细胞株BIU-87凋亡及机制的研究

目的:探讨芹菜素(Apigenin)在体外诱导膀胱癌细胞株BIU-87凋亡的作用及其机制.方法:MTT法测定不同浓度芹菜素作用后BIU-87细胞的生长情况;流式细胞术检测细胞周期情况;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术观察芹菜素作用后细胞的凋亡情况;RT-PCR法检测Survivin mRNA表达的变化;免疫细胞化学SP法检测Survivin和Caspase-3蛋白表达的变化.结果:①MTT法证实芹菜素能明显抑制膀胱癌细胞株BIU-87的生长.②22.03 μmol/L芹菜素作用72 h后,流式细胞仪检测发现芹菜素可使BIU87细胞阻滞在G2/M期;流式细胞术双染法检测细胞凋亡显示:芹菜素可使BIU-87细胞发生凋亡.③RT-PCR检测发现芹菜素可使BIU-87细胞Survin mRNA表达显著减少(P<0.05),免疫细胞化学SP法检测显示Survivin蛋白表达亦显著减少(P<0.05),Caspase-3蛋白表达则明显增加(P<0.01).结论:芹菜素在体外可抑制BIU-87细胞增殖,诱导其发生凋亡.芹菜素诱导BIU-87细胞发生凋亡的生物学效应可能与Survivin的表达下降,Saspase-3的表达上升有关.     

模拟二氧化碳气腹对人肾癌786-O细胞体外增殖的影响

目的:通过建立体外模拟CO2:气腹环境,研究CO2气腹对人肾癌786-O细胞增殖的影响.方法:建立体外模拟CO2气腹环境.以14mmHg气压对人肾癌786-O细胞作用不同时间(2、4 h),以培养于常规条件下肾癌细胞为对照,用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和Survivin蛋白表达水平.结果:与对照组比较,CO2气腹处理后的两组人肾癌786-0细胞增殖速度明显加快(P<0.05).且48 h后细胞增殖速度的加快与气腹作用时间呈直线相关(R2=1,P<0.01);细胞周期中处于增殖期的细胞比例显著增高(P<0.01);PCNA表达明显增强(P<0.01);细胞凋亡率亦显著减少(P<0.05),且凋亡率的减少与气腹作用时间呈直线相关(R2=1,P<0.01);Survivin表达显著增强(P<0.01)结论:体外模拟CO2气腹环境,可促进人肾癌786-O细胞增殖,且随着接触CO2时间的延长,肾癌786-O细胞增殖速度加快.     

氟伐他汀对环孢素A致大鼠肾毒性的保护作用

目的：观察羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂氟伐他汀（fluvastatin,Flu）对环孢素A（cyclosporine A,CsA）致大鼠肾毒性的保护作用。方法：选择30只健康、雄性SD大鼠,随机分为3组：①对照组：给予蒸馏水和橄榄油灌胃;②肾毒性组：给予CsA 30 mg/（kg·d）;③治疗组：给予CsA 30 mg/（kg·d）和Flu 7 mg/（kg·d）。在灌药后的第14天,每组随机处死5只大鼠,实验的第28天,处死其余的大鼠,观察各组肾脏组织学变化,用免疫组织化学技术检测肾组织中Smad2/3、Smad7蛋白及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）的表达情况。各组大鼠在每周抽血检测肾功能和脂类水平。结果：在第1周,Flu治疗组的血肌酐（serum creatinine,SCr）与对照组差异无统计学意义（P=0.564）。肾毒性组从第1周开始SCr增高（P=0.000）。肾毒性组在第14天和第28天肾脏的纤维化评分、Smad2/3蛋白及TGF-β1的表达与对照组比较增加（P=0.000）,而Smad7蛋白表达明显下调（P=0.000）,Flu在这2个时间点能够不同程度地改善这些指标。3组的胆固醇水平在第0、1、2、3和4周之间的差异无统计学意义（P=0.865、0.997、0.505、0.871及0.540）,同时各组的甘油三酯水平在相同时间点比较差异无统计学意义（P=0.894、0.663、0.826、0.635及0.928）。治疗组与肾毒性组在第2周和第4周CsA的谷值浓度比较均无统计学差异（P=0.183和P=0.123）。结论：Flu对环孢素A致大鼠肾毒性有保护作用。     

不可控型心脏死亡大鼠供肾移植中的安全热缺血时限

目的：探讨不可控心脏死亡（cardiac death,ＣＤ）后的大鼠供肾耐受热缺血的安全时限。方法：140只SD大鼠随机按热缺血时间长短分成7组,每组20只,供、受者各10只,分别于供鼠心跳停止0、10、20、30、40、50、60 min后进行原位肾移植术,并结扎受鼠的右肾血管,术后观察各组受鼠的生存情况、移植肾功能恢复情况及其纤维化程度。结果：各组冷缺血时间相同（P >0.05）,当供肾热缺血时间在30 min以内时,血肌酐均于术后1～2周恢复正常,各组受鼠存活率及移植肾纤维化程度与0 min组比较无显著差异（P >0.05）;当热缺血时间延长至40 min时,受鼠存活率和移植肾纤维化程度与0 min组比较亦均无显著差异（P >0.05）,血肌酐于2周后稳定,但明显高于0 min组（P<0.05）;当热缺血时间超过40 min时,受鼠均于1周内死亡。结论：不可控型CD大鼠供肾移植中,供肾热缺血时间应限制在40 min以内,但热缺血时间介于30～40 min的供肾需谨慎使用。     

TCP1-β在雄激素非依赖性前列腺癌细胞增殖中的作用

目的:探讨TCP1-β在雄激素非依赖性前列腺癌细胞(AIPC)增殖中的作用?方法:选择雄激素依赖性的前列腺癌细胞系LnCap和雄激素非依赖性的前列腺癌细胞系PC3作为模型,用不含酚红的培养基和活性炭吸附过的血清培养LnCap和PC3细胞,检测其对雄激素的依赖性;采用RNA干扰(RNAi)技术抑制PC3-Ad和LnCap细胞的TCP1-β表达,Q-PCR?Western blot方法检测TCP1-β的表达变化;MTT方法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;并用生物信息学方法探讨可能参与TCP1-β调控AIPC增殖的信号通路?结果:① 撤除雄激素后,LnCap细胞增殖受到显著抑制,而PC3细胞增殖未受明显影响;② 转染TCP1-β的siRNA后,PC3-Ad和LnCap细胞的TCP1-β表达受到显著抑制(P = 0.002,P = 0.006);③ PC3-Ad的TCP1-β表达受到显著抑制后,细胞的增殖受到抑制(P = 0.015),但是细胞没有出现明显凋亡;TCP1-β表达抑制对LnCap 细胞的增殖和凋亡都没有产生显著影响;④TCP1-β可能参与了PI3K/Akt信号通路对AIPC增殖的调控作用?结论:TCP1-β过表达可能参与了AIPC细胞的增殖调控?     

经尿道等离子前列腺分区剜除术治疗高危前列腺增生症的临床分析

【摘要】〓目的〓探讨经尿道前列腺分区剜除术治疗高危前列腺增生患者的临床疗效。方法〓经尿道等离子前列腺分区剜除术治疗高危前列腺增生患者89例,对其手术前后前列腺体积、残余尿量、国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QoL)和最大尿流率(Qmax)等指标进行统计学分析。结果〓89例患者均顺利完成手术,术中、术后均无严重并反症发生,手术时间30~110 min,平均45±12.6 min;术中切除前列腺组织净重20~60 g,平均30.6±13.2 g;出血量50~300 mL,平均110±27 mL。平均随访3个月,患者国际前列腺症状评分(IPSS)由21.6±3.9分降至11.8±5.1分,残余尿量由120.2±27.6 mL降至20.2±12.3 mL,最大尿流率由7.1±4.4 mL/s升至14.6±5.2 mL/s,与术前比较有显著性差异(P<0.05)。结论〓经尿道等离子前列腺分区剜除术治疗高危前列腺增生安全、有效。充分的术前准备,以及个体化的手术方案是手术成功的关键。     

肾移植受者不同免疫状态外周血Treg/Th17平衡的变化

目的探讨肾移植受者处于不同免疫状态时外周血Treg/Th17的变化及意义。方法选取52例肾移植术后患者,根据其免疫状态不同分为急性排斥反应组、感染组和正常组。采集3组人群的外周血,运用流式细胞染色技术检测外周血中的Treg细胞和Th17细胞,分别计算出两者占CD3+CD8-T淋巴细胞(相当于CD4+T细胞)的比例,并计算出Treg/Th17比值。结果 Treg在感染组中比例明显高于正常组(P<0.05)和急性排斥反应组(P<0.05),且正常组亦高于急性排斥反应组(P<0.05)。Th17在急性排斥反应组中比例高于正常组(P<0.01)和感染组(P<0.001),且正常组亦高于感染组(P<0.001)。Treg/Th17在感染组中比值高于正常组(P<0.001)和急性排斥反应组(P<0.001),且正常组亦高于急性排斥反应组(P<0.001)。结论 Treg/Th17平衡在肾移植受者处于不同免疫状态时表现不同,这种变化可以用于评估患者术后的免疫状态,指导临床免疫抑制剂的使用。