可降解水凝胶栓塞动脉瘤的实验研究

目的 探讨壳聚糖/甘油磷酸钠水凝胶作为动脉瘤栓塞材料的可行性.方法 配制2%壳聚糖与56%甘油磷酸钠溶液,不同比例混合,测定混合液pH、37℃成胶时间及力学强度,选择最佳比例.体外栓塞动脉瘤模型,评价导管内操控性;通过兔耳中动脉栓塞评价组织相容性.最终栓塞兔动脉瘤模型.结果 当壳聚糖/甘油磷酸钠在7∶1时,pH值为7.28,成胶时间为(260±18)s,力学强度可达14 kPa.体外动脉瘤模型栓塞见壳聚糖/甘油磷酸钠水凝胶可通过导管在动脉瘤内成胶.兔耳中动脉栓塞后3 d,血管周围可见少量炎性细胞浸润,1周时达到高峰,2-3周逐渐消退,4-8周形成肉芽组织,并可见壳聚糖凝胶部分降解.兔动脉瘤栓塞术中见动脉瘤不显影,术后3 d病理见动脉瘤被凝胶栓塞,内膜细胞形态正常,动脉壁内未见明显炎性细胞浸润.结论 短期观察,壳聚糖/甘油磷酸钠水凝胶可用于动脉瘤栓塞.     

应用组织工程材料栓塞动脉瘤的初步研究

目的 探讨壳聚糖-甘油磷酸钠-成纤维细胞水凝胶作为颅内动脉瘤栓塞材料的可行性.方法 配制2%(w/v)壳聚糖与56%(w/v)甘油磷酸钠溶液,不同比例混合,测定混合液pH、37℃成胶时间及力学强度,体外观察兔皮肤成纤维细胞在不同配比壳聚糖-甘油磷酸钠水凝胶中生长状态,选择最佳比例.将Brdu标记的成纤维细胞与壳聚糖-甘油磷酸钠水凝胶混合栓塞兔颈动脉,评价组织相容性.最终栓塞兔动脉瘤模型.结果 当壳聚糖/甘油磷酸钠在7:1时,pH值为7.28,成胶时间为(260±18)s,力学强度可达14 kPa,细胞生存率最高,达(89.0±2.7)%.颈动脉栓塞,透视下可见混合物显影良好,局部组织切片显示(HE染色):1周时凝胶中散在较多细胞及钽粉,凝胶与血管壁边界较清,内皮细胞完整.4周时凝胶与血管壁边界不清,可见周边凝胶被细胞成分包绕降解.免疫荧光显示,4周标本中可见较多标记的成纤维细胞.兔动脉瘤栓塞术中见动脉瘤不显影,术后3d病理见动脉瘤被凝胶栓塞,内膜细胞形态正常,动脉壁内未见明显炎性细胞浸润.结论 短期观察,壳聚糖-甘油磷酸钠-成纤维细胞水凝胶可用于动脉瘤栓塞.     

基于塑料薄片建立一步式心血管损伤标志物即时检测免疫分析系统

目的 建立一种简便快速的一步式心血管疾病标志物蛋白质即时检测(POCT)芯片系统。方法 利用光化学反应,在环烯烃共聚物薄片(COC)上合成具有抗非特异性吸附的聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯(PEGMEMA)层,在接枝后的表面进行非接触式的喷墨打印,形成抗体微阵列。使用紫外光进行引发,探索了不同光照时间和不同聚合物单体浓度下改性COC薄片表面的接触角角度以及聚合物接枝密度的变化。利用原子力显微镜和红外光谱仪表征了光化学反应改性后COC薄片表面的微观形貌和化学结构,并对比了光化学反应改性前后薄片表面的非特异性蛋白吸附情况。进一步探索了合适的抗体喷墨打印浓度及辅剂条件,并在接枝后的表面打印了心血管损伤生物标志物生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的固定型捕获抗体和荧光标记的可溶解型抗体。结果 当聚合物单体的质量分数为30%,光照时长为4 min时,接触角降到最低为38.5°,接枝密度达到最大为68.47 μg/cm²。原子力显微镜和红外光谱仪表征均证明了PEGMEMA层的成功引入。表面接枝PEGMEMA层降低了COC薄片的非特异性蛋白吸附量。当固定型捕获抗体为80 mg/L时,固定效率最高。与不同相对分子质量的聚乙二醇(PEG)相比,海藻糖作为辅剂时可溶解型检测抗体与固定型捕获抗体的识别效率更高。当ST2为10 mg/L时,可以观察到溶解后固定斑处有检测抗体结合。结论 通过光化学反应,在COC薄片表面接枝了抗非特异性吸附的PEGMEMA,在接枝后的薄片表面喷墨打印检测所需的抗体试剂,用简易快捷的方法制备形成了一种能够实现一步式检测的蛋白质芯片,可灵活应用于多种场景下心血管疾病标志物蛋白的快速检测,助力心血管精准医学发展。