基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的吴茱萸化学成分分析

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术分析吴茱萸药材中的化学成分。方法 色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,流动相乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）梯度洗脱（0~3 min,6%A;3~4 min,6%~10%A;4~7 min,10%~12%A;7~8 min,12%~14%A;8~13 min,14%~15%A;13~15 min,15%~20%A;15~18 min,20%~30%A;18~21 min,30%~49%A;21~25 min,49%~51%A;25~27 min,51%~73%A;27~30 min,73%~80%A;30~31 min,80%~100%A;31~32 min,100%A）,流速0.4 mL·min^-1,柱温35 ℃。质谱条件为电喷雾离子源,正、负离子全扫描模式采集数据,检测范围m/z 100~1 200。通过高分辨质谱数据分析、参考文献数据及对照品确认,对吴茱萸药材的化学成分进行快速、全面的定性分析。结果 从吴茱萸70%甲醇提取物中共鉴定出92个化合物,包括生物碱类39个、黄酮类19个、柠檬苦素类12个、酚酸类20个和有机酸类2个;通过与对照品比对,准确归属了26个化合物。结论 吴茱萸药材化学成分类型多样,极性差异大,但不同产地、不同品种的药材样品中化学成分基本一致。该研究建立的方法能快速、准确地对吴茱萸的化学成分进行全面解析,为该药材药效成分和毒性成分的进一步阐明提供了实验依据。     

HPLC同时测定止嗽立效口服液中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱含量

目的:建立止嗽立效口服液(麻黄、甘草、莱菔子,等)中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量同时测定方法;方法:采用高效液相色谱法,色谱柱Sinochrom ODS-BP(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾(pH=2.7),(4:100,含0.1%三乙胺),流速:1.5 mL/min,检测波长:207 nm.结果:盐酸麻黄碱在20.8～208.0μg/mL(r=0.999 7),盐酸伪麻黄碱在15.0～150.0μg/mL(r=0.999 8)的浓度范围内均线性关系良好,回收率均在95%～105%之间,RSD均小于5%;结论:方法准确、稳定、可靠,可列入止嗽立效口服液的质量标准正文.     

比较钴-60辐照灭菌与高温灭菌对四神丸主要成分的影响

目的：研究钴-60辐照灭菌对四神丸主要成分的影响。方法：对中药四神丸平行进行钴-60辐照灭菌和传统高温灭菌对比试验,通过微生物检查对两种灭菌方法的效果进行比较;采用薄层色谱法（TLC）定性研究两种灭菌方法对处方中肉豆蔻、补骨脂、吴茱萸中有效成分的影响;采用高效液相色谱法（HPLC）定量研究两种灭菌方法对四神丸中有效成分补骨脂素和异补骨脂素含量的影响。结果：钴-60辐照灭菌和高温灭菌均达到灭菌要求。四神丸主要成分在钴-60辐照前后没差异。结论：钴-60辐照可用于四神丸的灭菌。     

5-氨基-2-乙酰氧基苯甲酸-4''-乙酰胺基苯酯的合成

目的寻找活性强、副作用小的5-氨基水杨酸衍生物。方法以水杨酸为起始原料,通过硝化、酰化、卤化反应,与对乙酰氨基酚相偶联,合成了新的5-氨基水杨酸衍生物。结果化合物的结构经红外光谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱确证。结论该合成方法成功地合成了5-氨基-2-乙酰氧基苯甲酸-4′-乙酰胺基苯酯。     

5-氨基-2-乙酰氧基苯甲酸-4′-乙酰胺基苯酯的合成

目的寻找活性强、副作用小的5-氨基水杨酸衍生物。方法以水杨酸为起始原料,通过硝化、酰化、卤化反应,与对乙酰氨基酚相偶联,合成了新的5-氨基水杨酸衍生物。结果化合物的结构经红外光谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱确证。结论该合成方法成功地合成了5-氨基-2-乙酰氧基苯甲酸-4′-乙酰胺基苯酯。     

肠必清栓对UC模型大鼠肠黏膜内IL-1β、TNF-α及SOD的影响

目的：通过检测肠必清栓治疗后UC模型大鼠肠组织中IL-1β、TNF-α、SOD表达的变化,研究肠必清栓治疗UC的作用机制。方法：用2,4-二硝基氯苯免疫加醋酸局部灌肠法建立的UC模型大鼠48只随机分为五组,模型对照组（A组,8只）,肠必清栓低、中、高剂量组（B、C、D组,各10只）,柳氮磺吡啶药物对照组（E组,10只）,另设正常对照组（F组,6只）。给药治疗14d后处死,留取结肠检测组织中细胞因子IL-1β、TNF-α、SOD的表达。结果：模型组大鼠肠组织中IL-1β、TNF-α表达显著增多（P〈0.01）,而SOD显著减少（P〈0.01）,给药治疗可下调IL-1β、TNF-α的表达,提高组织中SOD的表达。IL-1β、TNF-α的表达在肠必清栓低、中、高剂量组间呈剂量依赖关系,高剂量组与柳氮磺吡啶药物对照组间差异无统计学意义（P〉0.05）;SOD的表达在肠必清栓中、高剂量组、柳氮磺吡啶药物对照组和正常对照组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：肠必清栓可下调结肠组织中促炎性细胞因子的表达,提高组织SOD活性,这可能为其治疗UC调节免疫抗感染、抗氧化的作用机制。     

4-氨基水杨酸不饱和脂肪酸类衍生物的合成

目的：为了探索更好的且具有较高的活性和对炎症性肠病毒副作用少的4-氨基水杨酸前药。方法：首先以4-ASA为原料依次用氯甲酸苄酯和乙酸酐分别保护氨基和酚羟基,然后再氢化还原脱去氨基上的保护基,合成的新化合物经MS、IR、1H-NMR、13C-NMR确证。结果：本实验合成了3个4-氨基水杨酸与不饱和脂肪酸形成的酰胺类化合物。结论：该合成路线是合理和可行的。     

4-氨基水杨酸对LPS诱导的RAW264.7细胞NO生成的影响

目的：观察4-氨基水杨酸（4-ASA）对脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞一氧化氮（NO）的生成及诱生型一氧化氮合酶（iNOS）基因和蛋白表达的作用。方法采用LPS诱导RAW264.7细胞建立细胞炎症反应模型,加入不同浓度的4-ASA,采用一步法测定细胞上清中NO释放量;采用实时定量PCR法测定iNOSmRNA的表达;采用Western blot法测定目的蛋白iNOS的表达。结果100μg/mL和1000μg/mL4-ASA能明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的分泌及iNOS基因和蛋白的表达（P＜0.05）。结论4-ASA可明显降低LPS 诱导的RAW264.7细胞NO的产生以及iNOS基因和蛋白的表达,从而发挥抗炎作用。     

黄芪地上、地下部分化学成分以及药效学比较

目的对黄芪地上部分与地下部分的药材进行比较,为黄芪地上部分的开发利用提供参考。方法通过化学成分分析和药效学研究相结合的方法,对黄芪地上、地下部分进行全面、系统比较,即采用多指标定量方法对黄芪地上、地下部分10种化学成分进行定性、定量分析;以小鼠血细胞计数为指标,对比观察黄芪地上、地下部分水煎液对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血功能损伤的保护作用。结果在本研究中,黄芪地上、地下部分化学成分相似,其中黄芪皂苷Ⅳ、黄芪皂苷Ⅲ、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、7,2'-二羟基-3',4'-二甲氧基异黄烷地上部分含量均高于地下部分。药效学研究结果表明,黄芪地上、地下部分均能升高受损小鼠白细胞、红细胞、血红蛋白数量,药效没有明显差异,用药期间各组小鼠未见有明显的不良作用。结论黄芪地上部分具有一定的利用价值,可对其进行进一步开发利用。     

Ki—67蛋白在肾癌中的表达及临床意义

为了探讨Ｋｉ－６７抗原的表达与肾癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学ＳＰ法检测了６４例肾癌和１０例正常肾组织Ｋｉ－６７的表达，结果：肾癌组织Ｋｉ－６７增殖指数显著高于正常肾组织（Ｐ〈０．０５）；Ｋｉ－６７平无指数在肿瘤蝗病理分级、床分期中有生差异（Ｐ〈０．００５、Ｐ〈０．０５）随着分期及人分级的升高，Ｋｉ－６７增殖指数了随之增高，其恶性程度及复发率也增高；Ｋｉ－６７增殖指数在３年￣５年存在显著性差