烧伤病人耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检测和耐药性分析

目的:评价乳胶结合实验,检测重症监护病房(ICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其肠毒素(SE),并进行耐药性分析。方法:收集260株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过药敏试验将其分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),用反向间接血凝试验(RPHA)检测金黄色葡萄球菌肠毒素。结果:MRSA产肠毒素为134株,MSSA产肠毒素为38株,MRSA产肠毒素率为100％,MSSA产肠毒素率为30％。结论:重症监护病房应重视MRSA的检测和金黄色葡萄球菌肠毒素的检测,合理使用广谱抗菌药物。     

热应激对血管内皮细胞增殖的影响及其机制初探

目的　探讨热应激条件下对血管内皮细胞增殖的影响 ,进一步从DNA损伤后P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变角度探讨增殖调控的机理。方法　以建立的血管内皮细胞热应激 (4 3℃ ,2小时 )为实验模型 ,应用流式细胞仪观察热应激后血管内皮细胞株ECV30 4的细胞周期变化 ,单细胞凝胶电泳方法观察热应激对血管内皮细胞DNA的损伤 ,RT PCR检测P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变情况。结果　热应激可使血管内皮细胞DNA产生显著损伤 (P <0 .0 5 ) ,继而P5 3mRNA表达增高 ,并促进P2 1mRNA的上调表达 ,最终使细胞产生G1期阻滞。结论　热应激可损伤血管内皮细胞DNA ,并通过P5 3、P2 1通路抑制细胞增殖     

烟碱型乙酰胆碱受体在离体海马小胶质细胞上的表达与定位

目的 探讨烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养海马小胶质细胞上的表达和定位.方法 取新生SD大鼠的海马组织,进行胶质细胞的混合培养,然后分离纯化小胶质细胞,采用免疫荧光染色检测CD11b/c进行小胶质细胞的鉴定;采用RT-PCR和免疫荧光双标分别检测α7-nAChR在小胶质细胞中的表达和定位.结果 免疫荧光染色显示分离纯化的细胞表达小胶质细胞特异性抗体CD11b/c;RT-PCR能扩增出长度为450 bp的α7-nAChR目的 条带,免疫荧光双标检测显示小胶质细胞CD11b/c和α7-nAChR染色阳性,分别呈红色和绿色荧光,叠加后呈棕黄色,且细胞膜荧光信号较强.结论 α7-nAChR在体外培养的海马小胶质细胞中能正常表达,定位在细胞膜的功能性α7-nAChR较丰富.     

小儿重症急性坏死性筋膜炎的救治

小儿急性坏死性筋膜炎是一种严重的小儿外科感染性疾病,主要表现为皮肤及皮下组织的进行性坏死,其病程进展迅速、病情险恶,一旦延误诊治,往往造成患儿死亡[1].我院烧伤科自2000年至2009年间共收治8例,现报告如下.     

酵母双杂交中Id1与Fyn的相互作用

目的　筛选成人肺组织文库中与分化抑制因子Id1相互作用的蛋白。方法　构建重组诱饵质粒pHybLex/Zeo -Id1,转化入酵母细胞EGY4 8/pSH18- 34,检测重组质粒有无非特异激活报告基因作用 ;通过筛选成人肺组织文库 ,获取真阳性文库质粒 ,进行测序和同源性比较 ,获得真阳性克隆。结果　经测序证实 ,重组诱饵质粒pHybLex/Zeo-Id1构建成功 ;将重组诱饵质粒转化入酵母细胞EGY4 8/pSH18- 34中 ,经检测无非特异激活报告基因功能。通过对文库进行筛选 ,获得一个真阳性克隆 ,通过测序和同源性比较证实该阳性克隆与酪氨酸蛋白激酶Fyn高度同源 (36 0 / 36 0 )。结论　作者首次发现Id1与Fyn在酵母细胞中存在相互作用。     

分化抑制因子1相互作用蛋白AGGF1的筛选

目的 利用酵母双杂交方法,筛选成人肺组织文库中与分化抑制因子1(Id1)相互作用的蛋白.方法 PCR方法扩增Id1的编码序列并定向克隆入诱饵质粒pHybLex/Zeo,构建重组诱饵质粒pHybLex/Zeo-Id1,酶切鉴定后转化人酵母株EGY48/pSH18-34,检测重组诱饵质粒有无非特异激活报告基因Leu2、LacZ作用;扩增并提取成人肺组织文库质粒,将文库质粒及重组诱饵质粒转化入酵母细胞,依次筛选Leu2 ,Leu2 LacZ 克隆;设置阴性及阳性对照,重复筛选Leu2 LacZ 克隆并排除假阳性克隆,获取真阳性文库质粒,进行测序和同源性比对.结果 酶切证实,重组诱饵质粒构建成功.重组诱饵质粒转化入酵母细胞后.经检测无非特异激活报告基因作用.扩增并筛选成人肺组织文库.获得198个Leu2 及19个Leu2 LacZ 克隆.经排除假阳性克隆,最终获得1个Leu2 LacZ 真阳性克隆,经测序和同源性比较证实该克隆与蛋白AGGF1高度同源(556/559,99.5%),Westem blotting证实其在酵母细胞中有表达.结论 利用酵母双杂交方法,通过筛选成人肺组织文库,发现Id1与AGGF1存在相互作用.     

热应激对血管内皮细胞DNA损伤效应的研究

目的：观察血管内皮细胞株ECV304在不同热应激条件下DNA受损情况。方法：实验采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)检测在不同热应激条件(41℃2h、43℃2h、45℃2h)对ECV304细胞DNA的单链损伤情况。结果：在不同的热应激条件下，固定热应激时间，随着热应激温度的逐步增加，采用SCGE法所观察到的受损细胞数显著增多，P＜0．05，相应的慧尾长度显著增加，P＜0．05。结论：热应激对内皮细胞的DNA致伤肯定，可使ECV304细胞DNA发生不同程度的单链断裂。     

高本底放射性饮水对小鼠生育力及子代生长发育的影响

根据美国毒理研究机构提出的持续繁殖实验的方法，观察高本底放射性饮水对小鼠生育力及仔鼠生长发育的影响。观察指标包括受孕率、每窝生胎鼠数、生育平均间隔天数、死胎畸胎数及仔鼠生长发育各种指标等。结果显示：高本底放射性饮水对实验动物生育力和胎鼠生长发育水平表现出一定的促进作用，其余检测指标均无统计学意义。     

高本底放射性饮水对小鼠血清SOD和MDA水平的影响

昆明种小白鼠３６只随机分成３组，分别饮用自来水、八矿饮用水和康冷矿泉水１００ｄ和１５０ｄ后取股动脉血进行血清ＳＯＤ和ＭＤＡ水平测定。结果：１００ｄ时八矿饮用水组小鼠血清中的ＳＯＤ和ＭＤＡ含量均低于自来水组而高于康冷矿泉水组（８５６０±１５１１＞７２２２±９３０＞５４６６±１５６３Ｕ·ｍｌ－１；９２．６０±３８．０５＞８６．６７±３４．１１＞５１４４±２３．７１μｍｏｌ·ｍｌ－１），１５０ｄ时亦显示同样趋势，但经统计处理，八矿饮用水与自来水间差异无显著性，与康冷矿泉水组相比则差异有显著性（Ｐ＜００５）。提示：一定剂量范围的高放射性饮水对实验动物血清的ＳＯＤ和ＭＤＡ含量无明显影响，但强度较高时则可显著降低动物血清的ＳＯＤ和ＭＤＡ水平