宽叶缬草SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选

目的 建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性（SRAP）-聚合酶链式反应（PCR）反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法 采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg²⁺浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响,以此为基础进行正交试验,优化宽叶缬草SRAP-PCR反应体系,并在最优反应体系条件下筛选可用于宽叶缬草遗传多样性研究的有效引物。结果 单因素实验结果表明Taq Mix用量为8~11 μL时扩增效果较佳;加入低浓度Mg²⁺可获得较佳扩增效果;中低浓度模板DNA用量可提高扩增效果;加入少量Taq DNA聚合酶可增加扩增结果丰富度。正交实验结果表明各因素对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响程度大小依次为Taq Mix用量>Taq DNA聚合酶加入量>Mg²⁺加入量>模板DNA用量。适于宽叶缬草的最优反应体系为Taq Mix 11 μL,模板DNA 30 ng,Mg²⁺ 0.025 mmol·L^-1,Taq DNA 1.5 U,正向引物与反向引物各5 μmol·L^-1,用双蒸水补足体系至 20 μL。最优退火温度为36.8 ℃。应用最优体系从88对引物中筛选出17对适用于宽叶缬草SRAP-PCR的条带清晰、多态性较高的有效引物。结论 建立的宽叶缬草SRAP-PCR反应体系稳定性良好,可用于宽叶缬草遗传多样性研究。     

海拔高度对黔产宽叶缬草中挥发油及乙酸龙脑酯含量的影响

目的:分析不同海拔高度黔产宽叶缬草中挥发油及乙酸龙脑酯含量的变化情况,为该药材的栽培区域的选择提供参考。方法:采用水蒸气蒸馏法提取宽叶缬草挥发油,利用GC测定宽叶缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量,通过SPSS 17.0统计软件分析挥发油含量、乙酸龙脑酯含量与海拔高度的相关性。结果:不同海拔高度黔产宽叶缬草中挥发油及乙酸龙脑酯含量均具有显著差异。挥发油平均质量分数2.20%,变幅1.34%~3.60%,挥发油含量总体随海拔的增高而呈降低趋势,存在显著负相关;挥发油中乙酸龙脑酯平均质量分数50.29%,变幅29.64%~64.87%,乙酸龙脑酯含量基本上随海拔的增高而呈降低趋势,但无显著相关性。结论:黔产宽叶缬草中挥发油含量与海拔高度密切相关,建议该药材栽培宜选海拔较低区域。     

中药学专业方剂学麻黄汤案例教学设计

方剂学是联系中医药基础和临床不可或缺的桥梁学科,中药学专业学生中医基础理论等相关知识学习深度不足,因而学习难度较大。麻黄汤是方剂学教材的第一方,本文以麻黄汤为例,探讨其主治证及病机、用药要点,分析精选经典案例,探究中药学专业方剂学的课程教学设计,以提升教学效果,达到中药学专业学生医药兼通的教学目的。     

蝇蛆甲壳素的制备技术研究

目的 研究蝇蛆甲壳素的制备技术,优选出适宜制备工艺.方法 蝇蛆甲壳素的制备采用酸碱法,产物含氮量测定采用凯氏定氮法,灰分含量测定采用550℃灼烧法.结果 脱蛋白最佳工艺为以4%NaOH室温浸泡两天,并更换NaOH 1次;脱色工艺使用1% KMnO4;最佳脱钙工艺为2 mol·L-1盐酸在25℃下反应6 h.结论 使用酸碱法制备的蝇蛆甲壳素质量指标可达食品级甲壳素标准.     

九头狮子草对小鼠免疫功能的影响

目的：研究九头狮子草对小鼠免疫功能的影响。方法：采用小鼠碳廓清实验和血清溶血素测定法，观察九头狮子草对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、溶血素抗体生成的影响。结果：九头狮子草可激活小鼠网状内皮系统，增加小鼠血清溶血素含量。结论：九头狮子草具有一定增强机体免疫力的作用。     

主成分和聚类分析法对不同产地半枝莲的综合质量评价

目的:综合比较并评价不同产地半枝莲的质量。方法:采用RP-HPLC法,紫外分光光度法,测定不同产地半枝莲中野黄芩苷、大波斯菊苷、总黄酮和多糖的含量;并以这4个成分为指标,运用主成分分析和聚类分析对13个产地的半枝莲进行综合质量评价。结果:不同产地半枝莲中野黄芩苷、大波斯菊苷、总黄酮和多糖含量有明显差异,其中总黄酮和多糖含量丰富,分别在18.56~74.67,19.67~47.3 mg·g-1,所有样品均达到药用要求。主成分分析发现,选择2个因子(F1,F2)即可对半枝莲药材进行综合评价,其综合评价函数为F=0.581 28F1+0.278 82F2,其综合评价得分在-0.66~1.68。以贵州锦屏、云南、贵州镇远半枝莲药材样品的质量综合评价较好。结论:不同产地及生长环境对半枝莲质量有影响,该研究可为半枝莲质量评价及种质资源筛选提供一定的参考依据。     

黔产宽叶缬草根挥发油提取工艺优选及其化学成分GC-MS分析

目的:确定黔产宽叶缬草根挥发油的最佳提取工艺,分析其化学成分.方法:用水蒸气蒸馏法提取缬草根挥发油,以挥发油提取率为指标,考察蒸馏时间、液料比、浸泡时间及粉碎度等影响因素,采用单因素试验和正交试验法优选宽叶缬草根挥发油提取工艺.采用GC-MS分析挥发油中化学成分.结果:宽叶缬草根挥发油最佳提取工艺为粉碎度为10 ～ 20目,料液比1∶10,蒸馏时间5h,浸泡时间4h;此工艺条件下,挥发油提取率达5.74％.缬草油中共鉴定出25种化学成分,以萜烯类化合物为主,分别含有烯、醇、酮、酯、醚类化合物,其中乙酸冰片酯、香树烯和坎烯占主导地位,其相对质量分数分别为37.94％,18.52％,10.26％.结论:该优选工艺稳定可行,可为缬草根挥发油工业化提取提供实验依据.     

蝇蛆蛋白粉对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨蝇蛆蛋白粉对正常小鼠及免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:利用正常及环磷酰胺(Cy)所致免疫低下模型小鼠,通过血清溶血素含量检测及碳粒廓清指数测定考察蝇蛆蛋白粉对巨噬细胞巨噬功能及体液免疫功能的影响。结果:蝇蛆蛋白粉可显著提高正常小鼠半数溶血值(HC50),对吞噬指数(α)无影响;对免疫功能低下小鼠HC50无影响,但可显著提高其α值。结论:蝇蛆蛋白粉可有效地增强正常小鼠体液免疫功能;对Cy造成的免疫功能低下有一定的预防和治疗作用。     

消淤降脂胶囊中丹参水溶性总酚酸溶出度的测定研究

目的对消瘀降脂胶囊中丹参水溶性总酚酸的溶出度进行测定，以控制其内在质量。方法应用转篮法，以紫外分光光度法坝4定丹参水溶性总酚酸的含量为指标，对消瘀降脂胶囊中丹参水溶性总酚酸溶出度进行测定。结果以0．5％聚山梨脂80磷酸盐缓冲溶液为溶出介质，转速150r／min，经120min，平均回收率100．10％（RSD 0．39％），溶出度为标示量的70．0％以上。结论紫外分光光度法测定消淤降脂胶囊中丹参水溶性总酚酸的含量是控制该制剂内在质量的一种可行的方法。     

半枝莲水提液体外抑菌及抑菌稳定性研究

目的 探究半枝莲水提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、耻垢分枝杆菌的体外抑菌活性及抑菌稳定性,为临床应用及开发植源性抑菌药物提供研究基础。方法 采用纸片扩散法测定半枝莲水提液对供试菌的抑菌活性,琼脂稀释法测定其最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）;同时以抑菌圈直径为指标,探究盐浓度、紫外光照射和不同pH对半枝莲水提液抑菌稳定性的影响。结果 半枝莲水提液对4种供试菌有抑菌活性,抑菌圈直径分别为（18.27±0.25）、（18.0±0.50）、（17.7±0.26）、（18.0±0.00）mm,为高度敏感,MICs分别为5.41、6.08、6.08、5.41mg/ml。抑菌稳定性实验结果表明,盐浓度、紫外光照射、pH对半枝莲水提液体外抑菌活性均无显著影响（P>0.05）,抑菌活性保留率均>95.0%。结论 半枝莲水提液对4种供试菌有良好的体外抑菌活性和抑菌稳定性。