酵母双杂交系统检测SK2与RyR2蛋白的相互作用

目的:探讨小电导Ca2+激活K+(SK)通道亚型SK2通道与肌浆网(RyR)2蛋白的相互作用.方法:经PCR扩增及酶切鉴定,构建含有SK2和RyR2目的基因片段的酵母表达载体pGBKT7-SK2和pGADT7-RyR2.pG-BKT7-SK2与pGADT7-RyR2经电转化法转化酵母宿主AH109,X-α-Gal/3A...     

小鼠SK2基因亚克隆的构建和鉴定

背景:小电导Ca2+激活钾(small conductance Ca2+-activated potassium channels,SK channels)通道存在于大多数可兴奋性细胞并存动作电位的复极化中发挥着重要作用.但SK通道与Ca2+及其他分子的偶合及调控途径尚未明确.目的:为观察SK2通道基因区段与Ca2+及其他分子的偶合及调控,构建pGBAT7和SK2基因片段重组子.方法:根据SK2基因的全长序列,设计3个SK2基因片段引物,经PCR扩增,测序鉴别后,分别亚克隆到酵母表达质粒pGBKT7.构建的pGBKT7-SK2亚克隆通过电转染法分别转染到酵母AH109菌中并被激活.pGBKT7-SK2亚克隆从酵母AH109菌中提取,电泳和测序鉴定.结果与结论:SK2目的基因PCR扩增产物分别为411,546,729 bp.成功构建了3个含有411,546,729 bp的pGBKT7-SK2亚克隆,电泳和测序鉴别表明构建的pGBKT7-SK2亚克隆完全符合设计要求.转染到酵母AH109菌中pGBKT7-SK2亚克隆可被激活,为探讨SK2通道与其他分子的功能相关提供了重要的物质基础.     

小鼠SK2基因亚克隆的构建和鉴定

背景：小电导Ca2+激活钾(small conductance Ca2+-activated potassium channels，SK channels)通道存在于大多数可兴奋性细胞并在动作电位的复极化中发挥着重要作用。但SK通道与Ca2+及其他分子的偶合及调控途径尚未明确。 目的：为观察SK2通道基因区段与Ca2+及其他分子的偶合及调控，构建pGBAT7和SK2基因片段重组子。 方法：根据SK2基因的全长序列，设计3个SK2基因片段引物，经PCR扩增，测序 鉴别后，分别亚克隆到酵母表达质粒pGBKT7。构建的pGBKT7-SK2亚克隆通过电转染法分别转染到酵母AH109菌中并被激活。pGBKT7-SK2亚克隆从酵母AH109菌中提取，电泳和测序鉴定。 结果与结论：SK2目的基因PCR扩增产物分别为411，546，729 bp。成功构建了3个含有411，546，729 bp的pGBKT7-SK2亚克隆，电泳和测序鉴别表明构建的pGBKT7-SK2亚克隆完全符合设计要求。转染到酵母AH109菌中pGBKT7-SK2亚克隆可被激活，为探讨SK2通道与其他分子的功能相关提供了重要的物质基础。     

厌食症患儿血清瘦素水平与甲状腺激素相关性研究

目的 探讨厌食症患儿和正常小儿血清瘦素和甲状腺激素水平的关系以及在发病过程中的作用.方法 用放射免疫方法检测厌食症儿童54例和正常小儿46例血清瘦素、甲状腺激素水平,2组均测量身高和体重计算体重指数.结果 厌食症组患儿血清瘦素、甲状腺激素含量显著低于正常小儿组水平(P＜0.05和P＜0.01);血清瘦素水平与甲状腺激素含量呈直线正相关(T3:r=0.49,P＜0.05;T4:r=0.56,P＜0.05),与促甲状腺素(TSH)呈直线负相关(r=-0.47,P＜0.05),与促发指数(BMI)无明显线性关系(男:r=0.12,P＞0.05;女:r=0.26,P＞0.05).结论 瘦素和甲状腺激素在厌食症发病机制中存在着相辅相成的关系,低浓度水平的血清瘦素、甲状腺激素可能是机体产生的一种防御反应.