“建构主义”在医学检验技术临床实习中的探索

医学检验专业是一门具有很强现实使用价值的学科,而临床实习是医学检验技术专业学生培养过程中重要的一部分。但是目前临床实习普遍存在理论与实践脱节、学生与带教老师不能同步以及各实习医院不能同质化教学等问题,从而最终影响学生的岗位胜任力。因此笔者将“建构主义”教学理念融入实践教学中,以检验报告单为引入,以临床具体案例为内容,打破原有的理论与实践脱节、带教老师和实习学生知识储备的差距。在教学实践中笔者综合运用了自主学习、团队学习和情境学习的教学方法,以践行建构主义学习理论,提高教学实效,使学生掌握相关的技能,更好地提高本专业学生的岗位胜任力。同时也为医学检验技术专业的临床实习/实践教学提供一种可推广的模式。     

Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶抑制VEGFR2介导的人胃癌HGC-27细胞增殖

［摘要］目的: 探讨Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶（type ⅡcGMP-dependent protein kinase,PKGⅡ）对血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2）介导的人胃癌HGC-27细胞增殖的影响及其作用机制。方法: 应用编码PKGⅡcDNA的腺病毒（Ad PKGⅡ）感染HGC 27细胞,使其高表达PKGⅡ,并以特异性激动剂8-pCPT-cGMP激活PKGⅡ。应用血管内皮生长因子-A（vascular endothelial growth factor A,VEGF A）激活VEGFR2。MTT法检测细胞增殖;蛋白质印迹法检测p-VEGFR2、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated-protein kinase B, p-PKB/p Akt）和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（phosphorylated extracellular signal-regulated kinase, p-ERK1/2）表达;免疫共沉淀法检测PKGⅡ与VEGFR2的结合;免疫沉淀法联合蛋白质印迹法检测PKGⅡ对VEGFR2丝氨酸/苏氨酸（Serine/Threonine,Ser/Thr）的磷酸化作用。结果： VEGF-A可促进HGC-27细胞增殖,并诱导胞内p VEGFR2、p-Akt和p-ERK1/2表达水平明显升高;以Ad-PKGⅡ感染HGC-27细胞使其高表达PKGⅡ并激活后,VEGF-A引起的细胞增殖受到明显抑制,p VEGFR2、p Akt和p-ERK1/2表达水平显著降低;PKGⅡ可与VEGFR2相互作用,使后者丝氨酸/苏氨酸磷酸化。结论： 激活的PKGⅡ可通过使VEGFR2发生丝氨酸/苏氨酸磷酸化抑制人胃癌HGC-27细胞的VEGFR2酪氨酸磷酸化,进而抑制其下游的增殖相关信号转导,最终抑制该细胞的增殖。     

siRNA沉默FANCD2基因增加肺癌A549/DDP细胞对顺铂化疗的敏感性

目的: 研究siRNA沉默FANCD2基因后人肺腺癌A549/DDP耐药细胞株对顺铂(DDP)耐药性的变化。方法:合成针对FANCD2基因的siRNA(FANCD2 siRNA),采用脂质体将其分别转染肺癌A549细胞株和A549/DDP耐药细胞株。CCK-8法测定经DDP处理的A549和A549/DDP细胞株转染siRNA前后的细胞增殖率变化;免疫印迹法测定2种细胞株转染siRNA前后FANCD2蛋白单泛素化水平;免疫荧光测定胞核中FANCD2蛋白核聚小体的形成。结果：经DDP处理的A549/DDP细胞增殖率,FANCD2蛋白单泛素化水平及核聚小体形成程度明显高于A549细胞。转染FANCD2-siRNA后,A549和A549/DDP细胞的FANCD2蛋白单泛素化水平和核聚小体形成明显降低,细胞增殖率显著下降。结论： 应用siRNA转染技术沉默FANCD2基因可抑制FA/BRCA途径的DNA修复功能,从而增加肺癌细胞对DDP的敏感性,部分逆转耐药肺癌细胞株对DDP的耐药性。     

m6A甲基化修饰蛋白在卵巢癌中的研究进展

N6-甲基腺苷（m6A）是一种广泛存在于肿瘤细胞中的表观遗传学修饰,为动态、可逆性修饰mRNA。卵巢癌是妇科癌症中病死率最高的恶性肿瘤。m6A甲基化修饰蛋白的高表达或低表达会促进或抑制卵巢癌,但其具体机制尚未完全明确。因此,探究m6A修饰蛋白对卵巢癌进展的影响将为卵巢癌的早期诊断及治疗提供帮助。该文就近年来m6A修饰蛋白对卵巢癌的增殖、转移的影响及其机制研究作一综述。     

Y-Z型磁力肝门阻断带的设计及性能测试

为便于实现腹腔镜下第一肝门血流阻断,本研究设计了Y-Z型磁力肝门阻断带,并对其性能进行了测试.根据磁压榨技术原理,该阻断带由头端母磁体和体段数个球形子磁体单元按相同的N、S极方向依次间断排列,并嵌入且固定于12 Fr的T型医用橡胶管内.通过体外实验对其力学性能和阻断效果进行了测试和模拟.磁力学测试结果显示,头端母磁体与...     

前列腺癌相关基因PAX5启动子甲基化的临床意义

目的：探讨PAX5基因启动子甲基化作为前列腺癌生物标志物的临床价值。 方法：采用Real time RT-PCR检测前列腺细胞系（RWPE-1、LNCaP、PC-3、DU145）中PAX5 mRNA的表达,甲基化特异性PCR(MSP)法分析4株前列腺细胞的甲基化状态;去甲基化药物处理后,Real time RT-PCR法检测肿瘤细胞PAX5基因mRNA表达; Real time MSP法检测64例前列腺癌患者、22例前列腺增生患者与47例健康体检者血清中PAX5基因启动子甲基化水平,并统计分析血清PAX5基因启动子甲基化水平与临床病理参数的相关性;运用ROC曲线分析PAX5基因启动子甲基化在前列腺癌诊断中的价值。结果：Real time RT-PCR结果显示,与正常前列腺上皮细胞RWPE-1相比,PAX5 mRNA在3株前列腺癌细胞中均表达下调;LNCaP、PC-3、DU145前列腺癌细胞均可检测到PAX5基因启动子甲基化,而正常前列腺上皮细胞RWPE-1不存在PAX5基因启动子甲基化;去甲基化药物可恢复PAX5基因mRNA表达;Real time MSP结果显示,前列腺癌患者的血清PAX5基因启动子甲基化水平显著高于前列腺增生患者和健康体检者;前列腺癌患者的血清PAX5基因启动子甲基化率与Gleason评分和TNM分期有关;ROC结果显示PAX5基因的诊断价值优于PSA。结论：本研究结果提示启动子甲基化是前列腺癌细胞中PAX5基因表达下调的主要原因,血清PAX5启动子甲基化是一种潜在的前列腺癌诊断标志物。     

微柱凝胶联合高效液相色谱法同时测定双载药脂质体中阿霉素与他莫昔芬的包封率

目的：建立双载药脂质体中阿霉素（DOX）与他莫昔芬（TAM）包封率的测定方法。方法：采用Sephadex LH-20分离载药脂质体与游离药物。采用HPLC法梯度洗脱,测定脂质体中装载药物的含量及脂质体制备时加入的药物总量,计算脂质体中DOX与TAM的包封率。结果：在所选择的色谱条件下,DOX与TAM的专属性良好。DOX与TAM分别在4.68~37.44,4.80~38.40 μg·mL^-1范围内线性关系良好。流出曲线研究结果表明,Sephadex LH-20微柱法能有效分离载药脂质体与未包载的游离药物,游离药物DOX与TAM的柱回收率分别为98%~102%、99%~101%。微柱凝胶分离-HPLC法测定得,双载药脂质体中DOX与TAM的含量均约为1 mg·mL^-1,包封率均>90%。结论：该方法简便快速、精密可靠,可应用于双载药脂质体中DOX与TAM含量与包封率的测定。     

中电导钙激活钾通道在细胞迁移中的作用及研究进展

细胞迁移参与个体发育、伤口愈合、免疫反应、癌症发展等多种生理或病理过程。钙激活钾（Calcium-activated potassium,KCa）通道作为钾通道家族中的重要成员,具有维持膜电位、胞内钙稳态和信号传递等作用。KCa通道参与多种细胞迁移过程,在细胞迁移中的调控机制具有重要临床价值。KCa通道依其单通道电导大小,分为大电导（BKCa）、中电导（IKCa）和小电导（SKCa）三类通道亚型。在细胞迁移相关研究中IKCa通道的报道较多,本文重点综述IKCa通道在细胞迁移中的作用及相关研究进展。