膀胱移行细胞癌患者外周血循环DNA死亡相关蛋白激酶的甲基化与纯合性缺失的研究

为探讨启动子高甲基化与纯合性缺失对死亡相关蛋白激酶(DAPK)表达的影响及其与膀胱移行细胞癌(TCCB)分期分级的关系,我们对45例TCCB患者外周血循环DNA进行DAPK甲基化程度及纯合性缺失情况分析.     

靶向Notch1基因siRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的：构建并鉴定靶向Notch1基因的siRNA真核表达载体。方法：根据Notch1基因cDNA序列，设计靶向目的基因的3个siRNA靶序列，将其插入U6启动子下游，克隆到真核表达载体pGsensil中，并进行酶切鉴定和DNA测序鉴定。采用脂质体介导法将构建好的3个siRNA表达载体分别转染T24人膀胱癌细胞中，荧光下观测转染效率。RT-PCR检测Notch1基因mRNA在转染前后的表达。结果：转染48h后3个siRNA表达载体均不同程度的抑制了Notch1 mRNA的表达。酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确。结论：成功构建的靶向Notch1的siRNA真核表达载体，具有抑制Notch1基因mRNA表达的功能，可能为膀胱癌基因治疗研究提供一个新的方向。     

膀胱移行细胞癌患者RASSF1A蛋白表达和启动子区甲基化的研究

目的:探讨RASSFlA(RAS association domain family1A)蛋白表达水平与启动子甲基化的关系.方法:应用免疫印迹技术(western-blot)检测10例正常膀胱组织和23例膀胱移行细胞癌(Badder transitional cell carcinoma,BTCC)组织中RASSFlA蛋白表达水平;用甲基化特异性PCR(Methylation-Specific PCR,MSP)方法检测正常膀胱组织,BTCC组织中RASSF1A基因启动子CPG岛甲基化状态.结果:RASSF1A蛋白在正常膀胱组织中全部表达,在BTCC组织中表达率为30.4%(7/23),二组间表达差异有统计学意义(P＜0.05),但各肿瘤分期、病理分级间的表达差异无统计学意义(P＞0.05).在正常膀胱组织中,RASSF1A基因启动子未发生甲基化;在BTCC组织中,RASSF1A基因启动子甲基化频率为60.9%(14/23),二组间表达差异有统计学意义(P＜0.05).在14份启动子异常甲基化的BTCC标本中,13份同时伴有RASSFIA蛋白表达缺失或下调,两者存在明显相关性(P＜0.05).结论:RASSFlA基因启动子在BTCC组织中发生异常甲基化,使RASSF1A蛋白表达缺失,推测RASSFIA基因启动子CPG岛异常甲基化导致RASSF1A基因失活从而引起肿瘤的发生,而与肿瘤的进展可能无关.     

腹腔镜肾盂成形术的多模培训模式

目的：介绍一项腹腔镜肾盂成形术（Laparoscopic Pyeloplasty，LP）的多模培训模式，并评价其安全性、可行性和有效性。方法：该多模培训模式包括模拟器、动物模型和手术室培训三部分，5位具有不同开放肾盂成形术和腹腔镜经验的学员参加了这项培训，我们对5个学员参加培训过程中的相关数据和学员独立完成手术的5组LP患者的围手术期数据进行了评价。结果：5位学员均成功地完成了整个培训，并成功地独立完成了5例LP。所有患者手术均未转开放手术，均未输血，无患者死亡。模拟器培训和动物模型培圳所需的时间，学员1（3周，7天）比学员5（4周，8天）少，学员4（2周，6天）比学员2（3周，8天）和学员5（4周，8天）少。在手术室培训中，各学员训练每个手术步骤所需的手术例数相当。5位学员独立完成手术的5组患者手术时间、估计失血量、术后住院时间和围手术期并发症的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：该项多模培训模式是安全、可行和有效的，并适合于没有开放肾盂成形术和腹腔镜经验的学员进行LP培训。     

后腹腔镜下根治性肾切除术及其应用解剖学研究

目的 总结后腹腔镜下根治性肾切除术,并对镜下肾周区域相关解剖结构进行研究.方法 2006年1月至2008年3月行后腹腔镜下根治性肾切除术85例.肿瘤位于左肾38例,右肾47例;肿瘤直径2.5～10.5 cm,平均(5.5±1.7)cm;T1N0Mo 74例,T2:N0M0 11例.根据肾筋膜外切除原则,在"两个间隙、上下两极间"分离切除患肾,腹侧为肾旁前间隙(后腹膜与肾前筋膜之间),背侧为腰肌前间隙(肾后筋膜与腰肌筋膜之间),上极达膈下,下方到髂窝.术中辨认重要的解剖结构:后腹膜及其返折、肾前筋膜、侧锥筋膜、肾后筋膜、腰大肌及重要血管. 结果 除1例因与周围粘连严重中转开放手术外,其余均获得成功.手术时间50～165 min,中位数65 min.估计失血量25～600ml,中位数58 ml.术中腹膜破裂5例,肾蒂周围小血管损伤出血6例,无重要脏器及大血管损伤.术后平均随访10(2～25)个月,均无瘤生存,无局部复发或发生穿刺通道种植转移. 结论 后腹腔镜下根治性肾切除术时,熟悉重要的镜下解剖结构有利于提高手术安全性、减少副损伤.     

肾上腺转移癌的诊治

目的 总结肾上腺转移癌的临床特点与诊治体会.方法 回顾性分析1996年12月至2010年4月收治47例肾上腺转移癌患者资料.男32例,女15例.平均年龄54(36～70)岁.单侧肾上腺转移42例,其中左侧25例、右侧17例,双侧5例.原发肿瘤包括肺癌24例、肾癌6例、肝癌5例、乳腺癌4例、黑色素瘤2例,其他肿瘤6例.临床表现全身乏力、消瘦、贫血或低热17例,患侧腰背部胀痛9例,高血压6例.均经B超、CT、MRI及正电子发射断层扫描(PET)检查确诊.行手术治疗36例,放弃手术11例.结果 完整切除转移癌者31例获随访,生存2～62(33.8±4.5)个月,最长存活64个月;失访5例.11例放弃手术者6例获随访,生存4～8(6.3±2.7)个月,均死于肿瘤晚期或多发转移.结论 B超及CT检查是诊断肾上腺转移癌的重要方法,PET有较高的临床诊断价值.手术完整切除肾上腺转移灶可延长患者生存期,但需严格控制适应证.     

腹腔镜下膀胱尿道单针连续吻合法动物模型的建立和应用

Objective To develop and evaluate a porcine model for training the single needle running suture method of laparoscopie urethrovesical anastomosis(LUA). Methods Twenty minipigs with mean weight of 30kg were general anaesthetized with Sumianxin solution 0. 1 ml/kg intramuscularly. Pneumoperitoneum was created by insufflation of carbon dioxide by a veress needle inserted through the umbilicus. One 10mm port and two 5mm ports were positioned after the establishment of pneumoperitoneum. The intestine was used as "bladder". The procedures were completed with the single needle running suture method of laparoscopic urethrovesical anastomosis. Six trainees performed the LUA procedure based on the models during a laparoscopic training course, following the technique used in the operation room. The learning curve was analyzed by operative time. Results The porcine model for laparoscopic training was established successfully and 3 LUAs could be performed on each pig. Each trainee performed 10 LUAs based on the models during the training course of laparoscopic urology. The operative time declined from (55.3±10. 4)min initially to (22.4±4.8)min (P＜0. 01) after the training course. At the end of training, all trainees could accomplish a watertight LUR procedure on the model. Conclusions The establishment of the training model is feasible. The trainees could acquire the skills necessary to perform LUA in vivo based on this model. The model provides a platform for training the basic techniques of LUA procedures.     

后腹腔镜下Hellstrom术治疗异位血管导致的肾盂输尿管连接处狭窄

目的总结后腹腔镜下Hellstrom术将肾下极异位血管游离后包埋固定在宽大肾盂表面,治疗因异位血管导致的肾盂输尿管连接处狭窄（UPJO）的方法。方法39例患者术前常规行IVU、逆行造影、B超或磁共振尿路成像（MRU）,确诊为UPJO。术中发现17例异位血管压迫导致原发性UPJO,严格筛选后对其中8例施行Hellstrom术。术后1个月行B超、IVU及肾功能检查,此后每3个月行相同检查。手术成功标准是症状（疼痛、感染等）缓解或消失,B超及IVU检查肾积水缓解或消失,肾功能改善。结果无中转开放手术。平均手术时间45（40～60）min,术中出血少,可忽略不计。8例异位血管中6例为背侧,2例为腹侧。术后平均住院时间5（4～7）d。术后均未使用止痛剂。术后平均随访13．6（12～15）个月,8例均达到手术成功标准,未见漏尿、切口感染等并发症。结论后腹腔镜下可以对异位血管（尤其是背侧血管）和输尿管很好地辨认及操作,而且在Hellstrom术中不破坏肾脏集合系统的完整性,因此在严格筛选病例的情况下,后腹腔镜下Hellstrom术是治疗异位血管导致UPJO的较好方法。     

江苏省某地区人源与猪源戊型肝炎病毒的检测和部分序列分析

目的:调查了解江苏省某农村地区人源与猪源戊型肝炎病毒(HEV)的相关性?方法:应用逆转录-巢式聚合酶链法(RT-PCR)对同一地区内一般人群中HEV IgM阳性者?急性戊型肝炎患者血标本和生猪胆囊标本进行HEV RNA检测,并对HEV RNA 阳性标本进行克隆测序和序列分析?结果: 一般人群中检出的HEV基因1?4型比例相近,临床散发性戊肝病例绝大部分为HEV-4型病毒感染所致(95.24%);生猪胆汁标本PCR阳性率为12.11%,猪源HEV基因分型均为HEV-4型;分离于人和生猪的HEV-4型病毒高度同源,同源性81%~97%?结论:该地区人群HEV基因分型以HEV-4型为优势毒株;猪源HEV均为基因4型;人源和猪源的HEV-4型病毒高度同源,猪是当地HEV主要宿主动物之一?     

等离子电切术治疗尿道狭窄50例

目的评估经尿道等离子电切术治疗创伤性后尿道狭窄的疗效。方法采用经尿道等离子电切治疗创伤性后尿道狭窄、闭锁50例,并进行术后随访。结果 50例手术均获成功,随访6～24个月,42例自行排尿通畅,最大尿流率17～25 ml/s,5例6个月复发行2次等离子电切治疗后痊愈,3例1年内定期尿道扩张。结论经尿道等离子电切治疗创伤后尿道狭窄及闭锁,具有高效、安全、并发症少、狭窄复发率低等优点,可作为治疗尿道狭窄与闭锁的首选手术方法。