骨转换生化标志物的临床应用和评估

目的比较妇女绝经前后骨转换生化标志物变化率,研究各指标在各种疾病组的浓度变化,并对临床应用作出初步评价。方法应用酶联免疫测定法或电化学发光免疫法分别测定164名健康成年人和120例患者血清和尿液中10项骨代谢指标。结果绝经后妇女骨代谢指标明显升高;高转换型骨质疏松组与对照组相比骨转换生化标志物的差异有统计学意义;变形性骨炎组和甲状旁腺功能亢进组与对照组比较除Ⅰ型胶原羧基端前肽（PICP）外,骨转换生化标志物的差异有统计学意义;甲状腺功能亢进组和肿瘤骨转移组除PICP和甲状腺激素（PTH）外,与对照组相比差异有统计学意义;风湿性关节炎除吡啶啉（PYD）和脱氧吡啶啉（DPD）与对照组比较差异有统计学意义外,其余差异均无统计学意义。结论各种骨代谢疾病不同程度影响骨转换,PICP应用于临床敏感性较差。     

在软体动物中间宿主中血吸虫基因的差异分布

本文应用DNA探针识别自然感染螺体内单个血吸虫的基因型,从而为估计中间宿主中血吸虫的分布提供较精确的方法,并首次研究了螺体内血吸虫基因型的分布。 从巴西的Cabana和Barreiro de Baixo(螺感染率分别为26.0％和11.4％)采集自然感染曼氏血吸虫的双脐螺,送往Purdue大学进行曼氏血吸虫的遗传学分析。将两小鼠     

611例汉族人维生素D受体基因多态性与骨密度关系研究

采用PCR-RFLP分析了611名上海地区汉族人的维生素D受体(VDR)基因型,并测量其骨密度(BMD),统计分析发现男女性VDR基因分布差异存在统计学意义,Bb基因型在男性中的分布频率(26.9%)高于女性(12.7%,P<0.01)。不同基因型的人群BMD差异无统计学意义。     

新疆维吾尔族人群9p21单核苷酸多态性与冠心病的关联性研究

目的研究染色体9p21上两个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点（rs2383206、rs10757274）在新疆维吾尔族人群中的分布,探讨其与冠心病（coronary heart disease,CHD）的关联性。方法采用病例对照研究,选择172例冠状动脉造影证实的CHD患者和147例患者为对照组作为研究对象,应用LDR—PCR技术对rs2383206、rsl0757274位点进行SNP分型及分析。结果rs2383206GG基因型频率在冠心病组和对照组分别为34．9％和24．4％,G等位基因频率分别为58．1％和49．3％;两组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;rsl0757274GG基因型频率在冠心病组和对照组分别为32．O％和21．8％,G等位基因频率分别为54．9％和46．6％;两组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。调整相关因素后,多因素Logistic回归分析,结果提示两个SNP的GG基因型仍是CHD的危险基因型,rs2383206的OR值为1．91,95％CI（1．03～3．53）,rsl0757274的OR值为2．03,95％CI（1．08～3．80）,P值均〈0．05。结论9p21位点rs2383206、rsl0757274的多态性与维吾尔族族人CHD有关联。     

化疗对于曼氏血吸虫低传播区慢性感染儿童对虫卵抗原免疫应答的影响

本研究有三个目的:1)比较吡喹酮治疗前后曼氏血吸虫感染儿童对SEA中不同的抗原组分的免疫应答状况,对曼氏血吸虫虫卵中与血吸虫活力相关的特异性抗原或表位进行鉴定;2)采用治疗前对SEA蛋白不同识别方式的验证评估对儿童化疗的成败;3)比较两种不同流行区人群治疗反应状况,以估计他们对化疗反应的均一性。 从委内瑞拉Caraballeda镇选16名感染儿童作治疗前后观察。该地区经灭螺和加强     

连接酶反应技术检测冠心病三个相关基因的单核苷酸多态性

目的 利用聚合酶链反应-连接酶反应（polymorphism chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR）技术检测瘦素受体基因Lys109Arg （A/G）、Gln223Arg （A/G）,脂联素基因G276T、T45G,护骨素基因T950C、G1181C六个多态性位点的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）.方法 参照待测多态性位点所在DNA序列设计并合成一对引物及3条探针,先通过PCR反应获得含有待检测突变位点的基因片段,再进行LDR,根据测序电泳结果所显示的含荧光标记的LDR产物的片段长度来判断基因型别.结果 采用PCR技术成功扩增出包含瘦素受体基因（110 bp,130 bp）、脂联素基因（400 bp）、护骨素基因（118 bp,163 bp）多态性位点的基因片段.根据LDR产物片段长度不同进行基因分型,纯合子只有一种片段长度,杂合子包含两种纯合子的片段长度,如瘦素受体基因SNP Lys109Arg （A/G）的PCR产物长度为110 bp,LDR产物片段的长度为110 bp时则判断为AA基因型,112 bp则判断为GG基因型,AG基因型则具有110 bp、112 bp两种片段长度.PCR-LDR基因分型结果与DNA测序技术的检测结果一致（Kappa=1,P=0.00）.结论 PCR-LDR技术简单、快速、准确、成本低,适用于大批量SNP检测.     

上海地区汉族人群护骨素基因G1181C多态性与冠状动脉性心脏病及其严重程度的相关性

目的探讨护骨素基因G1181C位点单核苷酸多态性(SNPs)与冠状动脉性心脏病(CAD)及其严重程度的相关性。方法 368例胸痛患者根据冠状动脉造影检查结果分为非CAD组(146名)和CAD组(222例)。CAD组中单支、双支、三支、四支病变分别为72、59、77、14例。CAD组再根据病史分为急性冠状动脉综合征(ACS)组156例和稳定型CAD组66例。采用介质纯化法提取白细胞DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增包含G1181C位点的DNA片段,连接酶检测反应(LDR)检测PCR产物,识别多态性位点。结果非CAD组与CAD组间,非CAD组与ACS组间,ACS组与稳定型CAD组间,非CAD组与不同病变冠状动脉数量组间,护骨素基因G1181C的各基因型频率和分布的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论研究中未发现护骨素基因G1181C位点SNPs多态性与CAD及其严重程度相关。     

ELIEDA技术用于诊断曼氏血吸虫低度感染的评价

酶联免疫电扩散法(ELIEDA)是由免疫电扩散法(IEDA)发展而成的一种微量法。作者将ELIEDA用于诊断低度感染曼氏血吸虫的病人,并与其它的血清学方法如间接血凝试验(IHAT),免疫荧光技术(IFT),IEDA作比较。 IFT、IHAT及IEDA试验所用抗原分别为曼氏血吸虫成虫冰冻切片、碱性可溶性成虫抗原及新鲜成虫的组织匀浆经11000g离心的上清蛋白。进行IEDA时将10μl抗原和5μl未稀释血清以1.5cm间隔分别点样在乙酸纤维素膜上并电泳(Tris-甘氨酸磷酸电     

用代表性差异分析法从曼氏血吸虫中分离雌虫特异序列

代表性差异分析法(RDA,representa-tional difference analysis)是近年发展的一种经改进的扣除杂交法(subtractive hy-bridization)。 作者用酚/氯仿分别从50条雌或雄成虫中抽提基因组DNA,按Lisitsyn等方法进行代表性差异分析。以HindⅢ消化DNA后与R Hind 24(5′—3′)和R Hind 12(5′—3′)接头连接,用R Hind 24作引物进行PCR。雌虫     

人和牛血吸虫病疫苗的研制策略

血吸虫在终宿主的组织中并不增殖。实验室研究及流行病学研究均表明感染后成虫负荷数的明显减少(约60％)能显著地减轻病理损害及疾病的传播。血吸虫感染的这两个特性是研制血吸虫疫苗策略的基点。血吸虫病的病理损害主要是由活虫卵的沉积所引起,因此疫苗诱导的免疫力主要在于使成虫产卵减少,而不在于是否伴有虫负荷的减少。 近五年来因血吸虫疫苗候选抗原的验证及其分子克隆方面的广泛研究,已有数种编码曼氏血吸虫抗原蛋白的基因克隆,其中