构建新型生物化学实验教学体系的研究与实践

本文介绍了构建新型生物化学实验教学体系的研究与实践.新型生物化学实验教学体系具有如下特点:以创新性科研成果转变为实验教学内容;多形式教学方法与多元化教学手段相结合;课内实验与课外科研相结合;"第二课堂"教学等.经过历时7年多的实验教学的实践证明,新型实验教学体系对培养学生的创新素质、拓宽学生的知识视野和提高学生的基本技能等具有明显成效,为培养满足社会需求的医学人才迈出了成功的一步.     

CAD基因原核表达载体的构建及表达产物的活性鉴定

目的构建pCool—GST—ICAD／CAD的表达载体，并存大肠杆菌BL21（DE3）中表达具有生物学活性的CAD核酸酶？方法用PCR扩增CAD基因，将扩增产物克隆入pCool—GST—ICAD载体中构建出pCool—GST—ICAD／CAD表达载体。经酶切和电泳鉴定正确后，在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达，表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化。最后用SDS—PAGE和DNA降解实验进行鉴定。结果构建了pCool—GST—ICAD／CAD原核表达载体，重组载体转化后表达出毫克级水平的GST—ICAD／CAD蛋白复合体。经分离纯化后得到纯度很好的CAD—ICAD篮白复合体，在SDS—PAGE电泳上旱现清晰的两条蛋白带。经DNA降解实验证明纯化所得的CAD蛋白具有非特异性降解DNA的核酸酶作用。结论成功制备了具有生物学活性的CAD核酸酶，为进一步研究细胞凋亡的作用机制提供了有效的制剂。     

SeO2诱导白血病细胞凋亡过程中对细胞内活性氧和Ca2+水平影响

目的：研究SeO2对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4、红白血病细胞K562、急性粒细胞白血病细胞株HL-60的增生、凋亡、活性氧(ROS)及Ca2+水平等的影响。 方法： 采用不同浓度SeO2（3-30 μmol/L）分别处理3种白血病细胞，用流式细胞术测定细胞凋亡率、细胞中ROS和Ca2+的水平。 结果： 10和30 μmol/L SeO2能抑制3种细胞增生，30 μmol/L SeO2作用48 h能使54.0%的NB4细胞、46.5%的K562细胞和49.6%的HL-60细胞发生凋亡。同时下调细胞内ROS和Ca2+水平。NB4和HL-60细胞中ROS阳性细胞比例随SeO2浓度增加而减少，K562中只有30 μmol/L SeO2才能使ROS出现明显下降。10、30 μmol/L SeO2能使NB4和HL-60细胞内Ca2+水平逐步下降。K562中只有30 μmol/L SeO2才能使细胞内Ca2+水平出现明显下降。 结论： SeO2对3种白血病细胞均有诱导凋亡作用，在凋亡过程中涉及细胞内ROS及Ca2+水平下降。     

基于雨课堂的混合式教学在生理学教学中的应用

为在课前高效督促学生预习,课中实施互动教学,课后精确分析教学效果,在生理学教学中,运用雨课堂构建了“课前-课堂-课后”高效、精准、互动、混合式教学和智慧课堂。问卷调查结果表明大部分学生喜欢或非常喜欢雨课堂支持的教学形式;有效促进了学生的平时学习,师生互动,精准掌握了学情,科学精准教学,提高了教学效率,改善了教学效果。     

联合检测血清中CYFRA21-1、NSE对肺癌诊断的价值

目的探讨联合检测血清中肿瘤标记物CYFRA21-1、NSE对肺癌早期诊断、病情监测及疗效判定的价值。方法将肺癌患者分为非小细胞肺癌组(NSCLC)和小细胞肺癌组(SCLC),以健康人及肺部良性病变患者(BLD)为对照组。静脉取血,采用免疫放射法(IRMA)、放射免疫法(RIA)分别检测血清CYFRA21-1和NSE。结果血清CYFRA21-1水平在NSCLC组明显高于SCLC和BLD组(P<0.01),其对NSCLC诊断的阳性率显著高于SCLC组(58.1%vs16.7%,P<0.01)。NSE则在SCLC组明显高于NSCLC和BLD组(P<0.01),其对SCLC诊断的阳性率为66.7%,显著高于NSCLC组24.3%(P<0.01)。血清CYFRA21-1、NSE联合检测与各单项指标相比,可将肺癌诊断的敏感度、特异度和阳性率分别提高到79.1%、91.7%和85.0%(P<0.01)。此外,在NSCLC组,血清CYFRA21-1含量变化与肿瘤分期呈正相关,且与患者病情的变化有相关性。结论联合检测血清中CYFRA21-1、NSE水平可明显提高肺癌早期诊断的阳性率,从而提高肺癌的早期诊断。临床上动态监测血清CYFRA21-1水平对NSCLC的进程及疗效判断有一定的价值。     

桂皮酸诱导人早幼粒白血病细胞分化的实验研究

 目的　探讨桂皮酸对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的 分化诱导作用。方法　用桂皮酸处理HL-60细胞,进行细胞增殖速度、硝 基蓝四氮唑(NBT)还原反应和过氧化酶测定并观察细胞形态的改变。结果 　显示1mmol/L和2.5mmol/L桂皮酸均使HL-60细胞增殖受到明显抑制,细胞形态向成熟粒 细胞转变,NBT还原反应显著增强(P<0.01或<0.05),过氧化酶染色则明显减弱。结论　桂皮酸对HL-60细胞具有诱导分化作用。     

基于雨课堂的高效精准互动混合式生理学教学

在师生比和教学工作量日益增加的情况下,教师如何在课前高效督促学生预习,精准掌握预习情况和指导学生预习？在课中如何高效精确掌握学生的学习情况,实施高效精准互动教学？在课后如何高效精确分析教学效果,为下一步教学设计提供客观依据？在生理学教学中,运用雨课堂构建了“课前-课堂-课后”高效、精准、互动、混合式教学模式和智慧课堂。对学生进行了问卷调查,结果表明大部分学生喜欢或非常喜欢雨课堂支持的教学模式。这种教学模式有效促进了学生的平时学习,师生互动,精准掌握了学情,科学精准教学,提高了教学效率,改善了教学效果。     

构建pCool-GST-ICAD/CAD并在大肠杆菌中表达CAD核酸酶及活性研究

目的：构建pCool-GST-ICAD/CAD的表达载体，并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达具有生物学活性的CAD核酸酶。方法：用PCR扩增CAD核酸酶基因,将扩增产物克隆入pCool-GST-ICAD载体中构建出pCool-GST-ICAD/CAD表达质粒。经酶切和电泳鉴定正确后，在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达，表达产物经亲和层析、离子交换层析及凝胶过滤等方法分离纯化，最后用SDS-PAGE和DNA降解实验进行鉴定。结果：构建了pCool-GST-ICAD/CAD原核表达质粒，重组载体转化后表达出毫克级水平的GST-ICAD/CAD蛋白复合体，经分离纯化后得到纯度很好的CAD/ICAD蛋白复合体，在SDS-PAGE电泳上呈现清晰的两条蛋白带，经DNA降解实验证明纯化所得的CAD蛋白具有非特异性降解DNA的核酸酶活性。结论：成功构建具有生物学活性的CAD核酸酶，有助于进一步研究细胞凋亡的作用机制。     

生物化学实验课改革探讨

生物化学是高等医李院校重要的医学基础课。实验课占总教学时数的1／3。我们根据多年的教学实践经验,对生物化学实验课进行改革尝试,取得预期效果,为机能学科实验教学改革积累了宝贵的经验。     

基础医学第二课堂教学中培养学生创新素质的尝试

第二课堂作为第一课堂教学的延伸和补充,以其灵活的教学方式,新颖的内容,实践证明对培养学生的思维能力、实践能力和创新意识以及发展学生个性、开发学生智能等方面是有成效的。近三年多来,基础学院有目的地组织和引导学生开展有益的第二课堂教学活动即参加课外科研活动、开展知识竞赛有奖活动和科普讲座以及基础与临床相结合的病例讨论课等,尝试培养学生创新素质和开发智能的有效途径,并取得一定的成效。