Smad3 siRNA对树突状细胞疫苗抗乳腺癌作用的影响

目的:研究在通过siRNA(small interference,RNA)干扰技术沉默外周单核细胞来源的树突细胞(dentritic cells,DC)的Smad3,阻断TGF-β1/Smad3传导通路,并在外源性TGF-β1(transforming growth factorbeta-1,TGF-β1)的作用下对树突状细胞疫苗的影响。方法:针对设计Smad3特异性siRNA利用RNAIMAX转入DC细胞并用Westen-blot法检测Smad3的沉默效果。应用重组人粒细胞-单核细胞集落刺激因子(hmGM-CSF)和重组人白介素-4(hmIL-4),刺激DC成熟。利用反复冻融的方法提取乳腺癌细胞MCF-7的全抗原。实验分组:Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组和TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组。流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清IL-12的水平,CCK-8法检测DC诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀瘤活性。结果:TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR(P<0.05)及IL-12分泌水平(P<0.05)明显高于TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组和TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-冻融抗原(Ag)-DC组。且TGF-βI-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀瘤活性较TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组明显增强。结论:通过沉默DC的Smad3的方法,阻断TGF-β1/Smad3传导通路,能逆转TGF-β1对DC分化发育和递呈乳腺癌相关抗原的作用。     

生血片联合重组人促红细胞生成素治疗胃癌术后化疗相关性贫血的疗效分析

目的:探讨生血片联合重组人促红细胞生成素治疗胃癌患者术后化疗相关性贫血的临床疗效。方法:选取2016年05月至2017年05月在我院肿瘤科收治的经病理确诊的68例胃癌术后化疗期间发生贫血的患者,将所有患者随机分成两组:观察组34例,对照组34例。对照组采用重组人促红细胞生成素治疗,观察组在对照组治疗基础上再给予患者口服生血片治疗,两组均同期补充多糖铁复合物治疗。观察比较两组患者的临床症状及外周血红细胞水平变化及不良反应发生情况。结果:观察组患者的总有效率（91.18%）明显优于对照组（70.59%）（P<0.05）。观察组乏力、头晕及活动后心悸的改善均优于对照组（P<0.05）。两组的血红蛋白(hemoglobin,Hb)、红细胞压积(hematocrit,HCT)、红细胞(red blood cell,RBC)计数、血小板（platelet,PLT）均较治疗前改善(P<0.05),与对照组比较,观察组改善的幅度更为明显(P<0.05)。两组服药后产生的不良反应发生率相当,无显著性差异(P>0.05);观察组的Karnofsky评分显著优于对照组(P<0.05)。结论:生血片联合重组人促红细胞生成素治疗胃癌患者术后化疗相关性贫血的临床疗效显著,值得进一步临床推广。     

PRR11在肝癌中的表达及其与预后的关系

摘 要：［目的］ 研究肝癌组织中富含脯氨酸蛋白11(PRR11)表达与肝癌临床病理参数之间的关系,以及PRR11表达对肝癌患者预后的影响。［方法］ 通过构建含243例肝癌的组织芯片,用免疫组化方法检测PRR11蛋白在肝癌组织中的表达。［结果］ 243例肝癌组织标本中,PRR11高表达与性别、AFP水平、HBSAg、HBeAg水平有关。Kaplan-Meier 生存分析显示：PRR11高表达患者总生存期短于低表达患者(36.5个月vs 46.3个月,P=0.007) ,且病理分期(Ⅰ～Ⅱ vs Ⅲ～Ⅳ：60.7个月vs 19.5个月,P=0.001)、主瘤直径(≤5cm vs ＞5cm：55.9个月vs 19.5个月,P<0.001)、有无癌栓(无 vs 有：49.3个月 vs 22.7个月,P<0.001)、子灶数目(≤1个 vs ＞1个：50.0个月vs 22.5个月,P<0.001)与总生存期均显著相关。Cox风险回归模型分析显示PRR11表达是肝癌患者的独立预后因素（P=0.007)。［结论］ PRR11在部分肝癌组织中高表达,是肝癌患者独立的不良预后因素。     

槐耳颗粒对老年乳腺癌TC方案辅助化疗安全性及免疫功能的影响

目的探究槐耳颗粒联合TC方案辅助化疗治疗老年乳腺癌术后的安全性和对免疫功能的影响。方法将65例老年乳腺癌术后的患者随机分为治疗组35例及对照组30例,治疗组采用槐耳颗粒联合TC方案化疗,对照组只采用TC方案化疗。评估并比较2组患者在治疗前后生活质量改变,以及术后3个月、1年血清T细胞亚群的构成比变化。结果治疗组在与对照组比较,治疗组KPS提高率明显增加(P<0.05);CD^4+细胞百分率,CD^4+/CD^8+比值,NK细胞百分率在术后各时间点均明显高于对照组(均P<0.05)。结论槐耳颗粒联合辅助化疗治疗老年乳腺癌术后患者安全性高,可提高老年患者的生活质量,增强老年患者的免疫力。     

GPC3基因重组慢病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达

目的 构建含有GPC3的shRNA序列慢病毒表达载体并转染肝癌细胞,观察其转染效率及在肝癌细胞中的表达.方法 应用重组DNA技术,将设计好的GPC3基因特异性siRNA序列构建至慢病毒表达载体pGLV3-GFP上,并应用脂质体法转染293T细胞,进行病毒包装及滴度测定.采用RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染HepG2细胞后GPC3基因的表达情况.结果 慢病毒载体构建成功,并测定滴度为1×108TU/mL,转染后,GPC3基因表达明显降低.结论 成功构建GPC3基因的shRNA慢病毒载体,所介导的RNAi能有效抑制靶细胞中GPC3基因的表达.     

Smad3小干扰RNA在转化生长因子β1作用下对树突状细胞成熟及功能的影响

目的 研究通过RNA干扰技术阻断外周单核细胞来源的树突细胞(DC)内的Smad3,并在转化生长因子β1(TGF-β1)作用下对DC的成熟和免疫抑制作用的影响.方法 设计针对Smad3特异性小干扰RNA(siRNA),利用RNAiMAX转入DC,并用RT-PCR检测转染效果.实验分Control-DC组、TGF-β1-Control-DC组、TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组和TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组.流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清白细胞介素12(IL-12)的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果 TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR及IL-12分泌水平明显高于TGF-β1-Control-DC组和TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组(P＜0.05),且TGF-βNegative siRNA-Smad3 DC组刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强.结论 通过阻断DC的Smad3表达,可以逆转TGF-β1对DC成熟和免疫功能的抑制.