二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫血管生成相关因子表达的影响

目的：探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜形态及血管生成素-1（Ang-1）mRNA、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达和定位的影响。方法：24只ICR雌性小鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组、二补助育汤组，每组6只，用米非司酮建立胚胎着床障碍动物模型，各组给予相应药物灌胃，妊娠第5天处死小鼠后，检测各组妊娠率、平均着床位点数、子宫内膜Ang-1和VEGF mRNA表达量及其蛋白定位。结果：模型组小鼠平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量明显低于空白组（均P<0.05）；与模型组比较，二补助育汤组平均胚胎着床位点数、Ang-1 mRNA、VEGF mRNA表达量显著提高（均P<0.05）。结论：二补助育汤可提高子宫内膜Ang-1和VEGF蛋白表达量，促进子宫内膜血管生成，从而提高子宫内膜容受性。     

自噬在围着床期小鼠子宫内膜中作用初探

目的: 探索围着床期小鼠子宫内膜自噬情况。方法: 选择36只ICR妊娠小鼠随机分为空白组、胚胎着床障碍模型组,每组小鼠18只。模型组采用米非司酮制备,每组每日予以生理盐水灌胃,分别于妊娠第4、5、6天脱颈处死小鼠各6只。观察子宫形态,计算各组平均胚胎着床位点数,检测自噬标志物微管相关轻链蛋白3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）,透射电镜观察子宫内膜细胞中自噬小体的表达。结果: 空白组妊娠第4天（pd4）子宫无明显串珠样改变,妊娠第5天（pd5）、妊娠第6天（pd6）子宫串珠样改变明显且分布均匀。模型组pd4、pd5未见明显串珠样改变,pd6可见少量串珠稀疏分布。空白组pd6的胚胎着床位点数较pd4增多,差异有统计学意义（P<0.05）;而pd5的胚胎着床位点数与pd4比较有增多,但差异无统计学意义（P>0.05）。模型组pd5、pd6平均胚胎着床位点数分别低于空白组pd5、pd6（P<0.05,P<0.01）。2组LC3-Ⅱ蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）。透射电镜下空白组小鼠子宫内膜细胞完整,pd5自噬小体数量较pd4减少,pd6又增多。模型组部分细胞损伤、坏死,pd4自噬小体表达较空白组多,亦较模型组pd5、pd6多。结论: 自噬参与并调控胚胎着床过程,自噬异常可能破坏子宫内膜细胞活性和功能,影响胚胎着床。     

滋水清肝饮临床应用进展

目的通过对现有滋水清肝饮的文献进行收集整理,为临床治疗提供依据。方法检索万方数据库,查阅了近15年的中医药文献。结果各科疾病中以肾虚为主,肝经郁热,皆可用滋水清肝饮化裁治疗。结论滋水清肝饮滋在各科治疗中均有疗效,但在妇科中疗效显著,妇科主要应用于更年期综合征。     

甘草酸对TGF-β1诱导的NRK-49 F细胞活化及分泌细胞外基质的影响

目的 探讨甘草酸对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49 F)中纤维化相关因子表达的影响.方法 体外培养NRK-49 F细胞,不同浓度甘草酸干预细胞48 h后,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,确定对细胞活性无显著影响的作用浓度.以10μg/L TGF-β1刺激NRK-49 F细胞构建肾间质纤维化细胞模型,加入不同浓度甘草酸进行干预,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1)表达情况.实时荧光定量PCR、Western Blot法检测纤维化相关因子α-SMA、COL1、Ⅲ型胶原(COL3)mRNA及蛋白表达情况,以评价甘草酸对成纤维细胞活化及细胞外基质分泌的影响.结果 CCK-8结果显示甘草酸在100～600μmol/L浓度范围内对NRK-49 F细胞活性无影响.免疫荧光结果表明,加入甘草酸后可抑制 α-SMA表达及COL1分泌,随甘草酸浓度增加,抑制作用增强.Western Blot结果显示,与模型组相比,甘草酸干预可下调α-SMA、COL1、COL3的蛋白表达,其中甘草酸150μmol/L组COL1的蛋白表达水平降低(P<0.01),甘草酸200μmol/L组COL1、COL3表达均降低(P<0.01).RT-PCR结果表明,与模型组相比,甘草酸干预可下调α-SMA、COL1、COL3表达,甘草酸150μmol/L组COL1 mRNA的表达水平降低(P<0.01),甘草酸200μmol/L组COL1、COL3 mRNA表达均降低(P<0.01).结论 甘草酸能够有效抑制TGF-β1诱导的NRK-49 F细胞中α-SMA、COL1、COL3的mRNA及蛋白表达,其作用机制有待进一步探讨.     

二补助育汤对反复体外受精-胚胎移植失败患者子宫内膜超声学指标的影响

目的观察二补助育汤对反复体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败患者子宫内膜超声学指标的影响,探讨该方药对子宫内膜容受性的改善作用。方法采用自身前后对照试验,纳入32例优胚移植2次及2次以上均失败、除外胚胎质量因素的反复IVF-ET失败患者,且中医辨证为肾虚血瘀。观察二补助育汤治疗前后患者子宫内膜超声学指标的变化情况,以及再次IVF-ET的妊娠结局。结果 32例患者中1例失访、1例因未坚持治疗剔除,最终30例患者纳入统计分析。患者治疗后子宫内膜厚度较治疗前增加(P<0.001),A型子宫内膜患者数量、子宫内膜下存在血流的患者数量均较治疗前增加(P<0.001),Salle评分较治疗前明显增加(P<0.001),双侧子宫动脉搏动指数(pulse index, PI)、阻力指数(resistance index, RI)和左侧子宫动脉收缩期峰值/舒张期峰值(S/D)较治疗前明显降低(P<0.05,P<0.001)。再次行IVF的胚胎种植率和临床妊娠率分别为40%、33.33%。结论二补助育汤能增加子宫动脉血流,从子宫内膜厚度、分型、血供等方面改善子宫内膜容受性,利于胚胎着床,从而提高再次IVF-ET成功率。     

二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜自噬基因 Beclin-1、LC3 B表达的影响

目的探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠胚胎着床率及子宫内膜自噬基因Beclin-1、微管相关蛋白轻链3(LC3B)mRNA及蛋白表达的影响。方法将50只妊娠ICR雌性小鼠随机分为空白组、模型组、二补助育汤低剂量组、二补助育汤高剂量组、阿司匹林组,每组10只。用米非司酮造成胚胎着床障碍模型,每组每日以相应药物灌胃,于妊娠第5天下午脱颈处死,观察各组子宫形态,计算各组妊娠率、平均着床位点数,检测子宫内膜Beclin-1、LC3B mRNA及蛋白的表达量。结果空白组小鼠子宫色泽红润,胚胎着床部位膨大,分布均匀;模型组小鼠子宫色白、较细;用药各组子宫较细,色泽淡红。模型组平均着床位点数较空白组减少(P0.001);与模型组相比,二补助育汤高剂量组与阿司匹林组平均胚胎着床位点数均增多(P0.05)。模型组小鼠子宫内膜Beclin-1、LC3B mRNA及蛋白表达水平均低于空白组(P0.05);与模型组相比,二补助育汤低、高剂量组与阿司匹林组Beclin-1、LC3B mRNA及蛋白表达水平均增加(P0.05)。结论二补助育汤可增加Beclin-1、LC3B mRNA及蛋白的表达,提高子宫内膜细胞自噬水平,从而改善子宫内膜容受性增加平均着床位点数。     

脾虚复合肺纤维化影响大鼠肺功能的初步研究

目的观察灌胃大黄致脾虚后复合博莱霉素造模对大鼠肺功能的影响,以探讨脾虚与肺纤维化的关系。方法将SD大鼠随机分为正常组、脾虚组、模型组、复合组,采用灌胃大黄加饥饱失常30 d的方法建立脾虚模型,然后采用气管内注射博莱霉素(5 mg/kg)复合肺纤维化造模,模拟脾虚证候下罹患肺纤维化。注射博莱霉素4周后检测动物肺功能,计算脏器系数,HE和Masson染色观察肺组织大体及气道病理变化。结果模型组与正常组比较,肺脏质量、肺系数升高(P0.05),肺动态顺应性(Cydn)、用力肺活量(FVC)、质量FVC下降(P0.05),第0.4秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(0.4秒率,FEV0.4/FVC%)增加(P0.05),用力最大呼气流速(PEF)、最大呼气中期流速(MMF)下降(P0.05),病理显示气管内注射博莱霉素所致肺纤维化为气道中心性分布,小气道内可见上皮细胞脱落及黏液栓。单纯脾虚动物停止脾虚造模后各项肺功能指标正常。脾虚复合组与模型组比较,0.4秒率显著升高(P0.05),病理显示肺组织纤维化区域占比增加。结论灌胃大黄加饥饱失常30 d造成脾虚是复合气管内注射博莱霉素造成的肺纤维化大鼠限制性通气功能障碍加重的潜在不利因素。     

二补助育汤对胚胎着床障碍小鼠子宫内膜的形态学影响

目的从形态学角度探讨二补助育汤对胚胎着床障碍模型小鼠子宫内膜的影响。方法将56只C57小鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、阿司匹林组、二补助育汤低、中、高剂量组,每组8只。用吲哚美辛建立胚胎着床障碍动物模型,小鼠妊娠第5日下午脱颈椎处死,计算各组小鼠妊娠率及胚胎着床位点数;光学显微镜下观察各组小鼠子宫内膜形态结构;透射电子显微镜下观察超微结构、胞饮突表达情况,并计算胞饮突评分。结果 (1)模型组平均着床位点数(1.8±2.1)明显低于空白组(8.1±4.2)(P0.05);中药中、高剂量组平均着床位点数(分别为62.5%,75.0%)明显高于模型组(P0.05);与补佳乐组和阿司匹林组间无统计学差异。(2)光学显微镜下形态学观察:正常组内膜间质疏松、腺体和血管丰富、腺体扩张;模型组内膜变薄或消失、腺体和血管减少;二补助育汤各剂量组、补佳乐组、阿司匹林组内膜均有改善,以二补助育汤中剂量组与正常组最接近。(3)电子显微镜下超微结构观察:空白组子宫内膜上皮细胞及细胞器结构清晰;模型组细胞破坏严重甚至局灶性坏死,线粒体膜不完整、嵴结构消失,胞质中较多空泡样变,核糖体和内质网明显减少;二补助育汤各剂量组、补佳乐组、阿司匹林组细胞及细胞器有不同程度破坏,与模型组相比有明显改善。(4)胞饮突:空白组胞饮突丰富,绒毛较少;模型组绒毛丰富,但胞饮突很少;二补助育汤各剂量组胞饮突较模型组丰富,见少量绒毛;补佳乐组和阿司匹林组可见少量胞饮突,较模型组增加,绒毛表达稀疏。(5)胞饮突评分:模型组胞饮突评分(1.1±0.3)较空白组低(2.5±0.7)(P0.05);中药中剂量组(2.3±0.9)、阿司匹林组(2.0±0.7)评分高于模型组(P0.05),亦高于补佳乐组(1.3±0.5)(P0.05)。结论二补助育汤能够促进子宫内膜发育及胞饮突,从而提高子宫内膜容受性,有利于胚胎着床。     

不同半夏炮制品抗肺纤维化作用的体外筛选及体内评价

目的 探讨不同半夏炮制品体外抗肺纤维化的作用及筛选出的半夏制品对肺纤维化小鼠的干预作用.方法 用10μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞系(MRC-5)建立肺纤维化体外模型,经水提生半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、清半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、法半夏(2....     

肺痿论治干预肺纤维化大鼠肺功能的实验研究

目的:比较麦门冬汤和甘草干姜汤在肺纤维化阶段对大鼠模型肺功能的干预作用。方法:用博莱霉素造模14 d的SD大鼠,灌胃麦门冬汤(7.5 g/kg、15 g/kg、30 g/kg)和甘草干姜汤组(3.75 g/kg、7.5 g/kg、15 g/kg),模型组和正常组大鼠灌胃等体积饮用水。中药灌胃14 d后检测用力肺活量(FVC)、肺动态顺应性(Cdyn)、0.4秒率(FEV0.4/FVC%)、呼气峰值流速(PEF)、最大呼气中期流速(MMF)等指标,检测血气变化,称量脏器质量、计算脏器系数,HE染色观察肺组织病理。结果:麦门冬汤高剂量组能够降低模型动物肺脏质量、肺脏系数(P0.05),提高肺顺应性、FVC和质量FVC(P0.05);甘草干姜汤高剂量能够改善肺顺应性和FVC(P0.05);甘草干姜汤中剂量能够改善质量FVC、降低0.4秒率(P0.05),保护非纤维化区肺泡结构;甘草干姜汤能够提高肺纤维化大鼠的PO2和SO2(P0.05)。结论:麦门冬汤和甘草干姜汤对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺脏功能均具有改善作用,前者主要是改善气道周围纤维化区的间质增生,后者主要是保护非纤维化区的肺泡结构和功能。