结肠癌肝转移细胞增殖能力减弱

目的 通过阶梯转移法在裸鼠中筛选出人结肠癌肝转移细胞,然后对结肠癌肝转移细胞的生长增殖能力进行鉴定.方法 通过SW1116细胞株裸鼠皮下连续5次传代后取皮下种植瘤裸鼠结肠原位种植,分别取肝脏转移灶和皮下5代细胞进行原代培养,获得大肠癌肝转移细胞和皮下5代的原代细胞,分别命名为结直肠癌肝转移细胞1代(CHM-1)和皮下第5代(P5),通过CCK-8测生长曲线、流式检测细胞周期以及细胞周期相关的蛋白的免疫细胞化学来对SW1116、CHM-1和P5增殖能力进行检测.结果 细胞增殖实验显示CHM-1生长速度明显慢于SW1116和P5细胞(P＜0.05);流式细胞周期分析中CHM-1细胞G41期(68.390±2.865)%比例高于SW1116(50.440±1.472)%和P5(53.930±2.651)%(P＜0.05),G2期CHM-19(13.530±4.411)%比例要低于SW1116(32.030±5.645)%和P5(29.720±3.559)%(P＜0.05),S期3种细胞差异无统计学意义(18.250±6.901)%、(19.050±4.162)%、(18.930±0.169)%(P＞0.05);免疫细胞化学分析发现细胞周期蛋白Cyclin DI在CHM-1(23.7±4.7)%中的表达比SW1116(30.2±5.1)%和P5(32.1±4.2)%减少(P＜0.05).结论 发现侵袭能力和生长增殖能力具有反向关联,即结肠癌肝转移细胞具有更强的侵袭能力,但生长增殖速度比其他细胞更慢.

Abstract：

Objective To study the proliferation ability of liver metastatic colorectal cancer cells by establishing stepwise metastatic colorectal carcinoma cell model via in vivo selection.Methods SW1116 cells were transplanted into the subcutis of nude mice and serially passaged for 5 times,and then the subcutaneous tumor was implanted into the cecal wall of new nude mice.The liver metastatic lesions and the subcutaneous carcinoma cells of the fifth generation were picked for primary culture.Two cell lines named CHM-1 and P5 were obtained.Proliferation levels were analyzed by testing of cell growth curve,cell cycle analyses by flow cytometry and Cyclin D1 analysis by immunocytochemistry.Results CHM-1 grew much slower than P5 and SW 1116 although there was no difference between P5 and SW 1116 in cell proliferation assay ( P＜0.05 ).Cell cycle analysis revealed that the percentage of cells in G0/G1 phase was higher (P＜0.05) in CHM-1 (68.390 ±2.865)% than in SW1116 (50.440 ± 1.472)% and P5 (53.930 ± 2.651)%,but that in G2/M phase was lower ( P＜0.05 ) in CHM-1 ( 13.530 ± 4.411 )% than in SW1116 (32.030 ±5.645)% and P5 (29.720 ±3.559)% rough there was no difference in S phase ( 18.250 ± 6.901 )%,( 19.050 ± 4.162 )%,( 18.930 ± 0.169 )% ( P ＞ 0.05 ).The expression of cell cycle proteins Cyclin D1 was decreased ( P＜0.05 ) in CHM-1 ( 23.7 ± 4.7 )% as compared with thoseinP5(32.1±4.2)% and SW1116 (30.2 ±5.1)%.Conclusion In the same cell line,there was a reverse relationship between the ability of invasion and proliferation.     

经脐单孔腹腔镜右半结肠根治手术的临床研究

目的探讨经脐单孔腹腔镜右半结肠根治手术的临床研究。 方法纳入2015年1月至2018年6月于上海交通大学医学院附属瑞金医院北院普外科接受传统5孔腹腔镜右半结肠切除术和纯单孔腹腔镜右半结肠手术的患者共89例,其中单孔腹腔镜手术45例(单孔腹腔镜组)、传统5孔腹腔镜手术44例(传统腹腔镜组),根据患者的年龄、性别、体质量指数、ASA评分(≤ 2分/>2分)、手术时间、并发症、淋巴结获得数目、病理分期等进行分析。 结果在术中出血量、进食流食时间、术后住院时间方面,单孔腹腔镜组和传统腹腔镜组比较,差异无统计学意义。单孔腹腔镜组的手术时间[166 min(42.0 min)比144 min(37.5 min),P＝0.03]更长。单孔腹腔镜组中出现1例(2.27%)术后吻合口瘘,传统腹腔镜组有1例(2.22%)术后吻合口瘘(P＝0.99)。两组的病理结果相似。单孔腹腔镜组中位随访时间22.5个月、传统腹腔镜组中位随访时间21.9个月。单孔腹腔镜组有3例(6.8%)出现复发、传统腹腔镜组也有3例(6.6%)复发,复发率比较,差异无统计学意义(P＝0.88)。 结论单孔腹腔镜右半结肠癌手术需要在临床和肿瘤学疗效方面与传统五孔腹腔镜手术相当,初步证实是一种安全可开展的手术方式。     

尺动脉腕上皮支临床应用

临床上目前采用尺动脉腕上皮支皮瓣对机器绞伤、撕脱伤、热压伤、电烧伤等造成的外源性皮肤神经功能的损害,进行皮肤改良及功能修复已较为普遍,我院急诊自从1996年11月至2010年12月已收治手部外伤毁行和虎口皮肤缺损的病人共计20余例,     

封闭式负压引流技术治疗Morel-Lavallée损伤的疗效分析

目的:目的:探讨封闭式负压引流(vacuum sealing drainage,VSD)在Morel-Lavallée损伤中的应用方法及疗效?方法:2010年7月—2014年12月,收治16例Morel-Lavallée损伤患者?骨盆骨折?髋臼骨折及股骨干骨折均一期行切开复位内固定术,彻底清创后,结合VSD治疗Morel-Lavallée损伤,术后行断层中厚皮片原位回植?结果:Morel-Lavallée损伤均于术后19~45 d愈合,平均创面愈合时间24.7 d?合并骨折患者手术切口均I期愈合,无深部组织感染及骨髓炎发生?10例患者经9 d VSD治疗,经植皮后创面皮肤成活满意;6例VSD治疗9 d后少量皮肤发生坏死,再次彻底清创植皮后行VSD治疗后愈合?16例患者均获随访,随访时间3~18个月,平均12个月?肢体外观满意,无明显瘢痕形成,关节均活动良好?结论:VSD治疗Morel-Lavallée损伤可促进病灶的愈合,保障骨盆骨折?髋臼骨折及股骨干骨折手术安全,减少感染,临床疗效满意?     

腹腔镜手术联合术中放射治疗局部进展期直肠癌的回顾性研究

目的:分析腹腔镜手术联合移动式直线加速器术中放射治疗(intraoperative radiotherapy,IORT)对局部进展期直肠癌(locally advanced rectal cancer,LARC)的疗效。方法:回顾性分析我院2012年1月至2016年1月应用腹腔镜手术联合IORT治疗的22例LARC病人(研究组)。采用配对病例对照设计,在同期开展、同一组医师实施的563例腹腔镜手术治疗的LARC病人中,以年龄、性别、体质量指数、手术方式、肿瘤TNM分期为条件,样本量1∶2进行配对,筛选出44例(对照组),对两组进行对比分析。结果:研究组手术时间长于对照组(P=0.024)。研究组术后排气时间、恢复流质时间、术后住院时间和术后近期并发症发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组与对照组1、3年无局部复发率差异无统计学意义(P=0.742,P=0.533),1、3年总生存率差异无统计学意义(P=0.476,P=0.447)。结论:与单纯腹腔镜手术相比,腹腔镜手术联合IORT增加手术时间,但其他手术指标差异无统计学意义,因此安全可行,可作为LARC的综合治疗手段之一。     

沉默MAD2基因对结肠癌细胞的影响

目的:研究沉默MAD2基因对结肠癌细胞的影响。方法 :采用RT-PCR和Western印迹法筛选MAD2基因在7种结肠癌细胞中的高表达细胞株,并用siRNA瞬时转染以降低MAD2表达,随后采用CCK-8法检测结肠癌细胞增殖能力。流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,transwell实验评估转染后结肠癌细胞迁移能力的改变。结果:SW1116细胞在mRNA和蛋白水平均呈现高表达MAD2,转染靶向MAD2的siRNA可显著降低MAD2在SW1116细胞中的表达。下调MAD2后,SW1116细胞的增殖能力较对照组有明显下降(P<0.05)。干扰siRNA组细胞凋亡比例较对照组增加,而细胞周期未见统计学差异。transwell实验中,siRNA干扰组穿膜细胞数为(45±2)个,显著低于阴性对照组[(185±5)个]和空白对照组[(195±5)个](P<0.01)。结论:SW1116高表达MAD2基因,沉默MAD2基因显著降低肠癌细胞增殖,诱导凋亡,并抑制细胞迁移。MAD2基因很可能成为新的预防结肠癌转移的目的基因。     

Cortactin过表达对结肠癌细胞转移能力的影响

目的:通过诱导皮层肌动蛋白(cortactin)的过表达分析其在结肠癌细胞侵袭迁移以及肝转移过程中的作用。方法:构建含CTTN基因和绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体,转染293T细胞。取含CTTN基因和绿色荧光蛋白的病毒上清液转染结肠癌细胞株SW1116使cortactin稳定表达。蛋白印迹实验检测cortactin的表达,通过Transwell实验评估结肠癌细胞侵袭迁移能力的改变。利用SW1116细胞株使裸鼠皮下成瘤,取肿瘤组织种植新一批裸鼠结肠壁并观察结肠癌肝转移的情况。结果:成功构建cortactin过表达的SW1116细胞。侵袭和迁移实验中,过表达组穿膜细胞数分别为(147±12)个、(286±17)个,而阴性对照组为(83±10)个、(112±11)个,空白对照组为(75±7)个、(103±9)个,后两组与过表达组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调cortactin的表达能显著促进结肠癌细胞的侵袭迁移和肝转移能力,提示cortactin在结肠癌的转移过程中发挥重要作用。