赋予检验“危急值”专科特性的护理安全管理应用

目的:探讨心内科采取赋予检验"危急值"专科特性的护理安全管理的应用价值。方法:2019年7~12月在医院心内科启动赋予检验"危急值"专科特性护理安全管理,共上报160例患者的168次危急值报告,设为实施后。2019年1~6月心内科收治的住院患者给予多科联合"危急值"安全管理,共上报211例患者的227次危急值报告,设为实施前。统计实施前后检验项目及上下限、构成比,比较实施前后管理偏差发生情况。结果:实施后肌钙蛋白异常危急值报告数占比居首位,与其他危急值类型相比差异显著(P<0.05),凝血功能异常、CK-MB异常分别占第2位、第3位。实施前血钾危急值报告数占比居首位,血糖异常、血钠分居第2位、第3位。实施后危急值报告处理时间超过5min、检验有误、患者有效投诉率、总体偏差率,均显著低于实施前(P<0.05)。结论:肌钙蛋白、心肌酶危急值是心内科患者出现危重症的重要预测信息,敏感性优于神经内科、肾内科、心内科联合的危急值标准,采取专科特性的护理安全管理形式,有助于提高救治效率、减少护理偏差,具有显著的应用价值。     

一种制备抗复合抗原单克隆抗体的方法

目的 建立通过单次细胞融合制备抗复合抗原(多种抗原)单克隆抗体的方法。方法 用复合抗原(甲胎蛋白、癌胚抗原、乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎核心抗原、乙型肝炎e抗原)免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。通过Protein-G亲和层析纯化阳性杂交瘤细胞株腹水,并通过亚类试剂盒法和非竞争ELISA法分别测定抗体亚类和亲和常数,同时应用免疫印迹分析其特异性。结果 通过单次细胞融合共获得20株抗上述复合抗原的单克隆抗体,其中针对甲胎蛋白的单克隆抗体5株、针对癌胚抗原的单克隆抗体6株、针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体3株;针对乙型肝炎核心抗原的单克隆抗体4株、针对乙型肝炎e抗原的单克隆抗体3株。已鉴定的部分阳性杂交瘤细胞株亚类均为IgG1,抗体亲和常数介于1×10⁹M^-1~2.8×10¹¹M^-1,免疫印迹分析显示,所获得的单抗都与其抗原发生特异性结合。结论 建立了通过单次细胞融合制备针对复合抗原的单克隆抗体制备技术,使单克隆抗体的产出率显著提高,制备周期明显缩短,为建立规模化单克隆抗体制备平台奠定基础。     

大鼠周围神经43kDa蛋白的生化初步分析

目的：提取大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的43kDa蛋白(PNP-43)，并对PNP-43进行生化初步分析。方法：纯化抗PNP-43单克隆抗体，将纯化的抗PNP-43单克隆抗体与CNBr-activated Sepharose 4B交联，用亲和层析的方法，提取PNP-43，并将提取的PNP-43进行十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PACE)和等电聚焦凝胶电泳(IEF)分析，考马斯亮蓝染色，取SDS-PAGE后染色的43kDa蛋白区带胶条，进行基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱检测(MALDI-TOF-MS)，测定肽质量指纹图谱，在相应的蛋白质谱数据库(MS-Fit)中检索。结果：(1)、经层析系统紫外检测，亲和层析后洗脱，在280nm波长处显示一个的紫外吸收峰。(2)、亲和层析获得的蛋白，经SDS-PAGE分析，在43．0kDa标准蛋白位置出现单一蛋白条带。(3)、经IEF。分析，PNP-43的等电点(pI)为5．8。(4)、经MALDI-TOF-MS检测，测定肽质量指纹图谱，通过MS-Fit检索未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据。结论：用亲和层析的方法，获得了大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的PNP-43，通过质谱分析和MS-Fit检索提示未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据。为进一步深入研究PNP-43的结构与功能提供了科学依据。     

亚健康肾阴虚证的血浆蛋白质组学初步研究

目的:初步观察亚健康肾阴虚证患者血浆蛋白质组的变化与表达差异,为进一步探讨亚健康的发生机制奠定基础.方法:采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离亚健康肾阴虚证患者与正常人血浆总蛋白,银染显色;PDQuest 软件对凝胶图象进行定性定量差异表达分析;从中选取差异表达蛋白质斑点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF);通过Mseot-Wizard软件进行数据库搜索,鉴定蛋白质.结果:获得了重复性和分辨性较好的血浆双向凝胶电泳图谱;在亚健康肾阴虚证血浆较正常人血浆表达量升高的蛋白质斑点11个,表达量降低的蛋白质斑点6个;选取其中表达量升高相差10倍以上的3个蛋白质斑点进行PMF鉴定,得到1个匹配精确的蛋白质(热休克蛋白27).结论:亚健康肾阴虚证血浆与正常人血浆中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学技术有望对亚健康的发生机制进行阐释,并将促进中医证候研究的拓展和深入.     

黄立中教授运用温阳散寒法治疗骨转移瘤2例体会

黄立中教授,主任医师,临床主攻中西医结合内科、肝病及恶性肿瘤的研究.黄师从事中西医结合内科临床及实验研究30余年,学验俱丰,笔者有幸随师坐诊,收益颇多,兹将其采用温阳散寒法治疗骨转移瘤经验介绍如下.     

hs-CRP、NLR、PLR与维持性血液透析患者心脏瓣膜钙化的相关性

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者超敏C-反应蛋白(high sensitivity C-creative protein,hs-CRP)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil/lymphocyte ratio,NLR)、血小板淋巴细胞比值(platelet lymphocyte ratio,PLR)水平,分析其与心脏瓣膜钙化相关性,为进一步提高心脏瓣膜钙化临床预测和诊断提供有价值信息。方法选择2016年2月至2019年2月于上海市静安区市北医院肾内科行MHD患者80例,根据是否发生心脏瓣膜钙化分为两组,研究组(n=51)为发生心脏瓣膜钙化患者,对照组(n=29)为未发生心脏瓣膜钙化患者。比较两组一般资料、一般生化指标及hs-CRP、NLR、PLR水平;将研究组患者根据钙化程度分为重度钙化组(n=18)和中度钙化组(n=20)、轻度钙化组(n=13),比较两组hs-CRP、NLR、PLR水平,并分析hs-CRP、NLR、PLR与钙化严重程度相关性;多因素分析心脏瓣膜钙化发病危险因素。结果研究组hs-CRP、NLR、PLR高于对照组(P0.05);重度钙化组hs-CRP、NLR、PLR高于中度钙化组高于轻度钙化组(P0.05),且hs-CRP、NLR、PLR与钙化程度呈显著正相关关系(P0.05);hs-CRP、NLR、PLR是心脏瓣膜钙化发病危险因素(P0.05)。结论 hs-CRP、NLR、PLR值与心脏瓣膜钙化严重程度密切相关,早期关注其变化可降低钙化发生率,提高患者生存质量。     

非小细胞肺癌术后Ⅲ、Ⅳ期患者的中医证候分布规律初探

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后发展到Ⅲ、Ⅳ期患者中医证候的分布规律.方法 采用流行病学调查方法进行临床观察,根据预先设计的观察表和临床证候诊断标准,按纳入标准严格选择病例,以先辨单证,再辨复证的方法进行辨证分型.结果 共收集到117例非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后Ⅲ、Ⅳ期患者,不同中医证候之间差异有统计学意义(P<0.01),单证中气虚证占总病例数的67.52%,其次分别为血瘀证占47.86%,痰湿证占35.90%;复证中,气虚血瘀证占41.88%、气虚痰湿证占19.66%;3个或以上的单证相兼以气虚痰湿血瘀证(占23.77%)、气虚血瘀气滞证(占17.95%)常见.结论 非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后发展到Ⅲ、Ⅳ期证候分布复杂,单证少,复证多,且多虚实互见,最常见的虚证为气虚证、阴虚证,在虚证的基础上容易合并血瘀证、痰湿或痰热证、气滞证等兼夹证,总以气虚、血瘀、痰湿相兼多见.     

芪苓温肾消囊方化学成分及其治疗多囊卵巢综合征的作用机制分析

目的 系统分析芪苓温肾消囊方（QLWS）方的化学成分,探讨该方治疗多囊卵巢综合征（PCOS）的关键活性成分及作用机制。方法 结合对照品比对和文献及数据库,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF/MS^E）对QLWS方化学成分进行系统分析与鉴定。采用中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）及SwissADME平台筛选活性成分并进行网络药理学分析。通过SwissTargetPrediction、GeneCards、疾病相关基因与突变位点数据库（DisGeNET）、DrugBank等数据库获取该方治疗PCOS的潜在成分及靶点。借助STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络筛选核心靶点。利用DAVID数据库对核心靶点进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。运用MOE 2019进行分子对接。结果 从QLWS方中鉴定成分90个,经筛选得到32个活性成分和45个核心靶点。GO功能富集分析共得到429个条目,KEGG通路富集分析共得到110个条目,主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、雌激素信号通路、缺氧诱导因子-1（HIF-1）信号通路等。分子对接结果显示QLWS方中的关键活性成分淫羊藿苷、丹酚酸A/B/C、汉黄芩素、木兰花碱等可能通过调节促分裂原活化的蛋白激酶1（MAPK1）、表皮生长因子受体（EGFR）、促分裂原活化的蛋白激酶3（MAPK3）等靶点发挥治疗PCOS的作用。结论 该研究基于液质联用技术及网络药理学技术初步预测了QLWS方中多个活性成分通过作用于多靶点、多通路治疗PCOS,为阐明全方的药效物质基础及作用机制研究提供思路与参考。     

大鼠损伤神经组织中Tropic 1808基因相关蛋白的亲和层析法纯化

目的：纯化大鼠损伤坐骨神经组织中Tropic 1808基因特异表达的蛋白。方法：将Tropic1808基因重组蛋白的单克隆抗体与CNBr-activated Sepharose 4B交联，用亲和层析的方法，提取在大鼠损伤坐骨神经组织中Tropic1808基因特异表达的蛋白，并将纯化的蛋白进行SDS-PAGE分析。结果：(1)经层析系统紫外检测，新生层析后洗脱，在280nm波长处获得两个不同的紫外吸收峰。（2）亲和层析的洗脱液，经冷冻浓缩，SDS-PAGE分析，出现43.0kDa.320kDa,31.0kDa和14.4kDa蛋白条带，其中在32.0kDa的蛋白条带与预期的Tropic1808基因在组织中的编码蛋白基本相符，而43.0kDa.31.0kDa,14.4kDa蛋白，预测为Tropic1808基因在大鼠损伤坐骨神经组织中表达的相关蛋白。结论：用亲和层析的方法，获得了大鼠损伤坐骨神经组织中Tropic1808基因特异表达的相关蛋白，为进一步研究其结构和功能提供了实验依据。