新生昆明小鼠胰腺干细胞体外分离、培养及自然分化的潜能**

背景：关于胰腺干细胞在胰腺组织中的分布情况,以及如何有效的将其分离、体外优化培养,目前仍有一定的困难。 目的：从新生昆明小鼠胰腺组织中分离出胰腺干细胞,在体外条件下培养观察其形态学和生物学特征,并进行初步鉴定。 方法：取新生SPF级昆明小鼠的胰腺组织,使用Ⅴ型胶原酶消化,采用Percoll不连续密度梯度离心,使胰腺组织内、外分泌部细胞分离,分布在3个不同的密度界面;收集各界面的细胞,以无血清、添加碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的DMEM培养基培养。 结果与结论：通过细胞形态学和细胞生长特性的观察,结合双硫腙染色证实：采用Percoll不连续密度梯度离心,第一、二密度界面的细胞来源于胰腺内分泌部;第三密度界面细胞来源于胰腺外分泌部。分别从胰腺内、外分泌部获取胰腺组织细胞,在体外培养观察发现均存在一类大、圆、单个核的细胞,呈集落样附壁生长,具有较活跃的分裂增殖能力,碱性磷酸酶染色阳性,表达胰腺干细胞的特异性标志巢蛋白,即为胰腺干细胞;随着体外培养时间的延长,分别表达PDX-1和CK-19,呈现向胰腺内分泌部细胞和外分泌部细胞分化的趋势。     

肝纤维化进程中肝星状细胞与胶原代谢关系研究进展

肝纤维化是指由各种致病因子引起肝脏损害与炎症反应,细胞外基质合成增加,降解受到抑制,导致肝内弥漫性细胞外基质(ECM)过度沉淀的病理过程。现代研究已证实,多种途径致肝星状细胞(HSC)激活是导致ECM过度沉淀的中间环节。而胶原是肝细胞外基质的主要成分,截止目前,人体内已     

半枝莲醇提取物对CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型肝星状细胞凋亡的影响

目的观察半枝莲醇提取物对肝纤维化大鼠肝组织中肝星状细胞凋亡的影响,从细胞凋亡的角度探讨本药治疗肝纤维化的作用机理。方法将72只Wistar雄性大鼠随机分为正常组10只、观察组62只,建立大鼠肝纤维化模型,4周后造模成功,分别予生理盐水、半枝莲醇提物溶液大、中、小剂量及秋水仙碱灌胃,每天1次;12周末观察处死大鼠肝组织病变结构,并通过免疫组化TUNEL、а-SMA双标记检测实验大鼠肝星状细胞的凋亡情况。结果半枝莲醇提物能影响活化肝星状细胞的凋亡,改善肝组织的纤维化程度。结论半枝莲醇提物有一定的抗大鼠肝纤维化作用,其作用机制是通过诱导星状细胞凋亡来实现的。     

半枝莲醇提物对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和TNF-α表达的影响

目的观察半枝莲治疗实验性肝纤维化大鼠对转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采用CCl4复合因素制作大鼠肝纤维化模型,通过免疫组化法和ELISA法分别检测TGF-β1、TNF-α在肝组织和血清中的含量;采用酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测单个细胞分泌TNF-α的含量。结果正常对照组动物肝组织无TNF-α和TGF-β1表达,而模型组表达增强(P0.05);高剂量半枝莲处理能降低两细胞因子的表达(P0.05)。结论半枝莲能抑制TGF-β1和TNF-α的分泌,因而有抗肝纤维化作用。     

中医学专业组织学实验课的教学体会

组织学是医学相关专业入门的重要基础课程之一,能否把这门课程学好,将直接影响到后面的生理学、病理学的学习,从而影响对临床疾病机理的理解。中医学专业学生虽然最终考取的是中医执业医师资格,但是在临床实践中,西医的知识也是必须要熟练掌握的。而实验课对于学好组织学有重要辅助作用,本文中笔者归纳了中医学相关专业组织学实验课带教中发现的一些问题,并提出一些解决办法。     

人骨髓间充质干细胞的体外连续传代及鉴定

[目的]将成人骨髓间充质干细胞（hMscs）进行体外连续传代并对其进行干细胞特性的鉴定。[方法]采用不连续密度梯度离心法进行人骨髓间充质干细胞的分离,使用含10％胎牛血清的L-DMEM进行体外培养,经胰蛋白酶和EDTA联合消化法体外连续传代至P5代后,对其进行生长曲线的测定、细胞周期和表面分子标志物的检测以及多向分化潜能的观察。[结果]本实验可将hMSCs体外连续传至P5代,P5代hMSCs在保持良好的分裂增殖能力的同时,表达hMSCs的表面分子标志物及保持多向分化潜能。[结论]本实验成功地将人hMSCs进行体外连续传代并保持其干细胞的特性。     

新生昆明小鼠胰腺干细胞体外分离、培养及自然分化的潜能

背景：关于胰腺干细胞在胰腺组织中的分布情况,以及如何有效的将其分离、体外优化培养,目前仍有一定的困难。目的：从新生昆明小鼠胰腺组织中分离出胰腺干细胞,在体外条件下培养观察其形态学和生物学特征,并进行初步鉴定。方法：取新生SPF级昆明小鼠的胰腺组织,使用Ⅴ型胶原酶消化,采用Percoll不连续密度梯度离心,使胰腺组织内、外分泌部细胞分离,分布在3个不同的密度界面;收集各界面的细胞,以无血清、添加碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的DMEM培养基培养。结果与结论：通过细胞形态学和细胞生长特性的观察,结合双硫腙染色证实：采用Percoll不连续密度梯度离心,第一、二密度界面的细胞来源于胰腺内分泌部;第三密度界面细胞来源于胰腺外分泌部。分别从胰腺内、外分泌部获取胰腺组织细胞,在体外培养观察发现均存在一类大、圆、单个核的细胞,呈集落样附壁生长,具有较活跃的分裂增殖能力,碱性磷酸酶染色阳性,表达胰腺干细胞的特异性标志巢蛋白,即为胰腺干细胞;随着体外培养时间的延长,分别表达PDX-1和CK-19,呈现向胰腺内分泌部细胞和外分泌部细胞分化的趋势。     

半枝莲含药血清对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的影响

目的:探讨半枝莲含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的影响。方法:传代培养大鼠肝星状细胞系HSC-T6与不同剂量半枝莲(高、中、低剂量组)共同孵育48 h后,应用Annexin-V-碘化丙锭染色检测半枝莲对大鼠HSC-T6凋亡的影响;免疫组化检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2表达。结果:半枝莲能使大鼠HSC-T6凋亡明显增多,同时可使凋亡抑制分子Bcl-2表达下调,使凋亡分子Bax表达增强(P<0.01)。结论:半枝莲可下调Bcl-2/Bax比率,促进HSC-T6凋亡。     

《人际沟通》课程设计和教学体会

现今竞争激烈的社会之中，大学生的心理问题日益增多已成为了不可争辩的事实。调查显示，在这些心理问题中，人际关系、学习和情感问题分列前三位。大学生人际关系问题最终导致的结果是造成社会交往障碍，这对医学生走入临床有很不好的影响。对于广大医学生来说，随着现代医学模式的改变，使医护人员与病人及其亲属之间、医护人员之间所产生的人际关系变得更为密切，