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目的 探讨南珠水解液对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化应激损伤的保护作用。方法 培养HLEC细胞株HLEB3,在培养液中加入不同浓度南珠水解液,培养24 h和48 h分别检测细胞增殖水平,并据此选择后续实验中南珠水解液浓度。培养HLE-B3细胞,分成3组:正常对照组;氧化损伤组,加入H2O2至终浓度为300 μmol·L-1;南珠水解液处理组,加入H2O2至终浓度为300 μmol·L-1,加入南珠水解液至终浓度为200 mg·L-1。3组细胞使用流式细胞术检测细胞凋亡率,利用电镜观察细胞形态差异;利用生化检测试剂盒检测3组细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物岐化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果 3组细胞增殖法检测结果显示,南珠水解液处理HLE-B3细胞24 h后,对其活性无抑制作用;50 mg·L-1、100 mg·L-1、200 mg·L-1南珠水解液处理后细胞存活率分别为(128.68±12.35)%、(158.43±11.71)%和(164.16±24.46)%,48 h后能显著提高其增殖水平,与正常对照组[(100.00±9.78)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组细胞凋亡率为(4.527±0.321)%;氧化损伤组为(11.460±0.633)%;南珠水解液处理组细胞凋亡率降至(8.877±0.193)%,与氧化损伤组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。电镜下观察结果显示,H2O2氧化损伤可以诱导HLE-B3细胞形态改变,损伤程度最高;南珠水解液处理后,细胞形态轻微改变。氧化损伤组细胞内GSH-Px、SOD含量均降低,MDA含量升高,与正常对照组相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05);南珠水解液处理组GSH-Px、SOD含量均升高,MDA含量下降,与氧化损伤组相比差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。结论 南珠水解液能够促进HLEC生长,抑制细胞凋亡,能够提升HLEC中GSH-Px、SOD活性,降低MDA含量,对H2O2诱导的HLEC氧化损伤具有保护作用。 相似文献
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文题释义:
诱捕受体3:1998年Pitti在搜索表达序列标签数据库时发现一组与肿瘤坏死因子受体超家族成员同源的表达序列标签,诱捕受体3基因位于人染色体20q 13.3,已知此区域在人类肿瘤发生过程中与基因的扩增和重组有关。
肿瘤干细胞:与正常组织一样,肿瘤组织由处于各种不同分化程度的细胞组成,其中存在一部分独特的具有自我更新和分化功能的干细胞样亚群并将之称为肿瘤干细胞,又称肿瘤起始细胞或成瘤性癌细胞。
背景:目前尚未见有关以肝癌干细胞为靶向的中草药抗肝癌机制的报道,因此有必要展开相关研究。
目的:探讨黄芩素对肝癌干细胞诱捕受体3表达的影响,以及下调诱捕受体3表达对肝癌干细胞生物学行为的影响。
方法:按照课题组之前建立的技术方法,从肝癌细胞株(购自中国科学院上海细胞库)中获得肝癌干细胞。将肝癌干细胞分为黄芩素高、中、低剂量组以及对照组,黄芩素高、中、低剂量组分别用含200,100,50 μmol/L黄芩素的L-DMEM培养基培养,对照组仅用L-DMEM培养基培养。采用RT-PCR、Western blot检测黄芩素处理后诱捕受体3 mRNA和蛋白表达变化,采用CCK8法、流式细胞术、Transwell法检测肝癌干细胞增殖、细胞周期分布、凋亡和迁移情况。
结果与结论:①与对照组相比,高剂量黄芩素能显著下调肝癌干细胞诱捕受体3的mRNA和蛋白表达,因此确认高剂量黄芩素为最佳作用浓度;②与对照组相比,高剂量黄芩素组肝癌干细胞的增殖能力明显下降,S期和G2期细胞比例增加,而G1期的细胞比例则减少(P < 0.05);③与对照组相比,高剂量黄芩素组肝癌干细胞的凋亡率明显增加,迁移能力明显下降;④结果表明,高剂量黄芩素能通过下调肝癌干细胞的诱捕受体3表达而抑制细胞的一系列生物学行为,为临床上以诱捕受体3为靶点,以肝癌干细胞为对象进行肝癌治疗提供了实验依据。
ORCID: 0000-0002-6020-0616(岑妍慧)
中国组织工程研究杂志出版内容重点:干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程 相似文献
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目的运用血清药理学方法观察班氏促卵助孕煎剂对人卵巢颗粒细胞增殖的影响。方法向预培养24 h的人卵巢颗粒细胞中分别加入10%空白血清(对照组)、班氏促卵助孕煎剂含药血清(高、中、低剂量组),应用噻唑蓝(MTT)法分别检测0,12,24,36,48,60,72 h的颗粒细胞增殖情况。结果 24 h前班氏促卵助孕煎剂对细胞增殖的作用不大(P>0.05);36,48,60和72 h显示低、中、高三组班氏促卵助孕煎剂含药血清吸光度均明显高于空白血清组,差异有统计学意义(P<0.01),与低浓度组相比,高、中浓度组均差异有统计学意义(P<0.01),但高浓度组和中浓度组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论班氏促卵助孕煎剂含药血清能明显促进体外培养人卵巢颗粒细胞的增殖,且呈剂量相关性。 相似文献
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背景:关于胰腺干细胞在胰腺组织中的分布情况,以及如何有效的将其分离、体外优化培养,目前仍有一定的困难。
目的:从新生昆明小鼠胰腺组织中分离出胰腺干细胞,在体外条件下培养观察其形态学和生物学特征,并进行初步鉴定。
方法:取新生SPF级昆明小鼠的胰腺组织,使用Ⅴ型胶原酶消化,采用Percoll不连续密度梯度离心,使胰腺组织内、外分泌部细胞分离,分布在3个不同的密度界面;收集各界面的细胞,以无血清、添加碱性成纤维细胞生长因子和表皮细胞生长因子的DMEM培养基培养。
结果与结论:通过细胞形态学和细胞生长特性的观察,结合双硫腙染色证实:采用Percoll不连续密度梯度离心,第一、二密度界面的细胞来源于胰腺内分泌部;第三密度界面细胞来源于胰腺外分泌部。分别从胰腺内、外分泌部获取胰腺组织细胞,在体外培养观察发现均存在一类大、圆、单个核的细胞,呈集落样附壁生长,具有较活跃的分裂增殖能力,碱性磷酸酶染色阳性,表达胰腺干细胞的特异性标志巢蛋白,即为胰腺干细胞;随着体外培养时间的延长,分别表达PDX-1和CK-19,呈现向胰腺内分泌部细胞和外分泌部细胞分化的趋势。 相似文献
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胰腺干细胞的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
胰腺干细胞存在于胰腺组织中,目前认为它是一类多能干细胞,具有自我更新能力,在适宜的条件下能分化为胰腺内的内、外分泌腺细胞.现结合文献对国内外胰腺干细胞的研究进展综述如下. 相似文献