芦笋及其不同萃取物对CCl4致急性肝损伤的保护作用的比较

目的 探讨瓯峰芦笋95％乙醇提取物(ETOH)及其不同组分对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的预防功效差异.方法 以CCl4致急性肝损伤小鼠模型评价芦笋ETOH及各萃取物[石油醚萃取物(PE),乙酸乙酯萃取物(EE),正丁醇萃取物(BE)]药效,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆汁酸(TBA)及肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,观察各组小鼠肝脏病理变化,确证药效部位,进一步分离并评价药效及分析相关成分.结果 芦笋ETOH及BE能改善模型小鼠的血清AST、ALT、TBA及肝组织MDA和SOD水平(P<0.05);减轻肝脏病理损伤,且BE效果优于ETOH.BE进一步纯化得梯度乙醇洗脱物[30％乙醇洗脱物(BEA),50％乙醇洗脱物(BEB)、70％乙醇洗脱物(BEC)、90％乙醇洗脱物BED)],药效学评价结果 表明BEA显著改善模型小鼠的血清AST、ALT、TBA及肝组织MDA和SOD水平(P<0.05),且BEA中酚酸和黄酮类物质含量较高.结论 瓯峰芦笋ETOH、BE、BEA具有预防CCl4所致急性肝损伤作用,且以BEA效果最好,这可能与BEA中黄酮及酚酸类物质的富集有关.     

Psalmotoxin⁃1抑制活化的肝星状细胞过程中microRNA差异表达谱的变化分析

目的：探讨酸敏感离子通道1a（acid?sensing ion channel 1a,ASIC1a）特异性阻断剂狼蛛毒素（psalmotoxin?1,PcTx?1）抑制血小板衍生生长因子BB（platelet derived growth factor?BB,PDGF?BB）活化的肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）过程中微小RNA（microRNA,miRNA）差异表达谱及生物信息学分析。方法：取对数生长期的HSC细胞,分为对照组、模型组和PcTx组。对照组不做处理,模型组加入PDGF?BB（10 ng/mL）培养24 h,PcTx组给予PcTx?1刺激1 h后,再加入PDGF?BB（10 ng/mL）培养24 h。采用RT?PCR和Western blot检测α?平滑肌肌动蛋白（α?smooth muscle actin,α?SMA）、Ⅰ型胶原（collagen?Ⅰ）和ASIC1a的表达,MTT法检测细胞增殖情况,验证HSC细胞是否活化以及PcTx?1是否阻断ASIC1a的表达。提取的总RNA质检合格后进行高通量测序,筛选差异表达的miRNA。通过miRanda算法对差异miRNA进行靶基因预测,并对miRNA靶基因进行功能和代谢通路分析。结果：PcTx?1阻断ASIC1a后,ASIC1a的表达降低,HSC细胞活化的标志性基因α?SMA和collagen?Ⅰ的表达明显减少,提示PcTx?1可阻断PDGF诱导的HSC活化。与对照组比较,模型组miRNA表达谱中差异表达miRNA共有38个,其中上调6个,下调32个（P < 0.05）。与模型组比较,PcTx组miRNA表达谱中差异表达miRNA共有17个,其中上调1个,下调16个（P < 0.05）。结论：高通量筛选得到的PcTx?1抑制PDGF?BB活化HSC过程中miRNA差异表达谱,为肝纤维化的发病机制研究提供了新的靶点和思路。