辅助生殖技术治疗后发生妊娠丢失的相关因素分析

目的探讨辅助生殖技术治疗后妊娠丢失发生的相关因素。方法回顾性分析2014年1月—2017年12月在安徽省妇幼保健院生殖中心获得妊娠的1 169个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期资料。按照不同妊娠结局分为妊娠丢失组和分娩组,比较两组之间体重指数(BMI)、垂体泌乳素(PRL)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平;按照夫妻双方年龄、不孕类型、不同受精方式(IVF/ICSI)、不同周期类型(鲜胚周期/冻胚周期)、移植胚胎发育天数(Day3/Day5)、有无自然流产史分组,比较各组间的妊娠丢失率。结果女方年龄≥35岁组的妊娠丢失率显著高于年龄35岁组;在女方年龄35岁组中,男方年龄 40岁组较年龄≤40岁组妊娠丢失率高,差异均有统计学意义(P 0. 05);妊娠丢失组的PRL高于分娩组,差异有统计学意义(P 0. 05);继发不孕组妊娠丢失率高于原发不孕组,差异有统计学意义(P 0. 05);既往有自然流产史组妊娠丢失率高于无流产史组,差异有统计学意义(P 0. 05);患者BMI、AMH水平以及不同受精方式和周期类型对妊娠丢失率的影响无统计学差异。结论高龄患者ART治疗后妊娠丢失率高,此外妊娠丢失还与患者基础PRL、不孕类型、既往流产史有关。     

无创胚胎染色体筛查在染色体非整倍体检测中的应用效果

目的 探讨无创胚胎染色体筛查技术（NICS）在染色体非整倍体检测中的应用效果。方法 收集2017年5月至2019年5月在安徽省妇幼保健院生殖中心拟行体外受精-胚胎移植的364例患者的囊胚培养液,并行NICS筛查。对单囊胚移植且临床确认妊娠的46例患者,根据其妊娠结局不同行不同染色体检查方法：对12例流产的患者行流产组织染色体检查,并以该检查结果<为金标准,计算NICS的灵敏度和特异度;对继续妊娠的34例患者行外周血无创产前遗传学筛查（NIPS）,比较NICS结果与NIPS筛查结果的差异。结果 12例流产的患者样本中,流产组织染色体检查与NICS检查为染色体非整倍体者均为3例,NICS筛查的灵敏度为100%;在流产组织染色体检查为整倍体的9例样本中,对应的NICS检出2例为非整倍体,其特异度为77.78%,两种筛查方法的一致性分析Kappa值为0.64。继续妊娠的34例患者样本中,NIPS筛查均未检出13、18、21号染色体为非整倍体胚胎,NICS对这3条染色体的筛查结果与NIPS一致。结论 NICS筛查染色体非整倍体有较好的灵敏度,但假阳性率偏高,需进一步技术优化以提高特异性。     

新生儿游泳临床应用的研究

目的　促进新生儿健康成长。方法　随机抽取 1 40名新生儿 ,分为观察组和对照组 ;观察组出生 2 4h后 ,每日让其游泳 1次 ,每次 1 0～ 2 0 min。对照组不游泳 ,按自然情况观察其成长。结果　两组新生儿在摄入奶量、体重及睡眠方面均有明显差异 (P<0 .0 1 )。结论　新生儿游泳能增加新生儿摄入奶量、加深新生儿睡眠、促进其健康成长。     

NGS技术检测自然流产胚胎或绒毛染色体非整倍体及拷贝数变异的研究

目的探索新一代测序技术(NGS)在检测自然流产胚胎或绒毛组织染色体非整倍体和拷贝数变异(CNV)应用中的价值。方法选择20例自然流产患者的绒毛进行染色体核型分析,同时应用NGS技术进行染色体非整倍体和拷贝数变异的检测,并以染色体核型分析结果为"金标准"进行NGS方法的评估。后于2013年共收集1074例自然流产胚胎或绒毛组织,应用NGS技术完成染色体非整倍体和CNV的检测,并对检测结果进行分析。结果 20例自然流产样本的NGS结果与核型分析结果对比,检测灵敏度和特异性均为100%。临床检测的1074例流产组织样本中,42例样本DNA不符合质控标准,实际完成检测1032例。1032例组织样本中阳性445例(43.12%),其中非整倍体369例(82.92%),以16、X、22、21、15、18号染色体高发;CNV共76例(17.08%),阳性样本集中发生在8-12w。阴性587例(56.88%)。根据孕妇年龄将样本分为三组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 NGS技术用于检测流产组织的非整倍体和拷贝数变异具有较高的灵敏度和特异性,是适用于临床的有效检测方法。     

人视黄醇结合蛋白4 cDNA全长的克隆、表达和纯化

目的 构建人视黄醇结合蛋白4(RBP4)cDNA全长的原核表达质粒(pET-28a(+)-hRBP4)并在大肠杆菌中高效表达.方法 取成人正常肝脏组织提取总RNA,RT-PCR后的扩增产物回收,构建克隆载体pMD-RBP4,设计带酶切位点BamHⅠ和HindⅢ的引物,PCR后酶切插入pET-28a(+)中,转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,Western blot检测其特异表达,并对rhRBP4诱导表达时IPTG的浓度、时间和温度等条件进行了优化;用镍亲和层析柱进行纯化,SDS-PAGE鉴定其纯度.结果 测序证实所得的hRBP4 cDNA序列与其在GenBank中的序列基本一致,重组质粒pET-28a(+)-RBP4的双酶切结果与预期大小完全一致,IPTG诱导后高效表达的蛋白质以不溶性包涵体形式存在;Western blot结果证实表达产物为RBP4.IPTG诱导的最佳浓度是0.04 mmol/L,时间为6 h,温度为37℃,镍亲和层析后经电泳证实其纯度可达96%.结论 经诱导表达和纯化的rhRBP4可用于制备抗体和进一步研究.     

内质网应激和各型糖尿病关系的研究进展

糖尿病是一组以慢性血糖水平增高为特征的异质性代谢性疾病,主要包括1型、2型、妊娠糖尿病和其他类型糖尿病,伴随多种组织的并发症发生,其患病率在逐年升高。近年来内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在各型糖尿病发病中的作用正日益受到重视。本文重点阐述ERS在各型糖尿病中的地位。     

不同辅助生殖技术助孕后新生儿性别比例分析

目的:分析辅助生殖技术对新生儿性别比例的影响。方法:回顾性分析2014年1月至2016年1月在我院生殖医学中心经辅助生殖技术助孕新生儿总数495人,根据周期类型和移植胚胎发育阶段分别两两比较新生儿性别比例。结果:所有新生儿中男性253人,女性242人,新生儿中男性比例复苏周期高于新鲜周期(52.45%vs.48.52%,P=0.406),囊胚高于卵裂期胚胎(56.69%vs.48.52%,P=0.091),但均无统计学差异。结论:不同辅助生殖技术方法不影响新生儿性别比例。     

重组人 PTP1B 的原核高效表达及TFLC的体外抑制剂实验

 目的 高效诱导表达并纯化具有活性的重组 PTP1B 融合蛋白（rhPTP1B）,进行酶活性及抑制剂的实验。方法 重组体 pGEX-hPTP1B 转化 E.coliDH5α,诱导表达 rhPTP1B 并优化条件后,超声取细胞裂解上清液经 GST 亲和层析柱纯化后,利用 rhPTP1B 水解特异性底物 4-硝基苯基磷酸二钠盐（pNPP-Na2）的磷酸基团而产生颜色反应来测定 rhPTP1B 活性,并分析其与 rhPTP1B 浓度、底物浓度及反应温度的关系,钒酸钠（Na3VO4）抑制类型的研究,老鹰茶总黄酮（TFLC）对 rhPTP1B 的抑制性作用和浓度依赖关系。 结果 rhPTP1B 表达的最适条件是在 34 ℃ 和 2.0 mmol/L IPTG 下诱导表达 10 h,可被 GST 亲和层析法分离纯化;其活性随酶浓度及底物浓度的增加而增加,35 ℃ 时 rhPTP1B 的活性最大;钒酸钠的作用机制可能为非竞争性抑制作用;TFLC 对 rhPTP1B 有明显的抑制作用。结论 诱导表达纯化的 rhPTP1B 融合蛋白可用于抑制剂的研究,TFLC 对 rhPTP1B 的强抑制作用可能是其降低糖尿病大鼠血糖浓度的机制之一。     

布洛芬高分子前体药物及纳米微球的合成和表征

将非甾体消炎药布洛芬以共价键连接到舍双键的甲基丙烯酸-2-羟基乙酯(HEMA)上，制成含布洛芬药物的单体，进而通过自聚或共聚，合成了含布洛芬的高分子药物；采用乳液聚合方法制备了高分子药物蚋米微球。研究了影响聚合反应的有关因素，并对所合成的产物用^1H-NMR，GPC和TEM等检测手段进行了表征。