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目的 :构建Parkin基因 3’端的表达质粒 ,在大肠杆菌中表达并制备多克隆抗体。方法 :构建Parkin基因3’端 (937～ 195 9bp)的谷氨酰胺硫转移酶 (glutathion sulfate transferase ,GST)融合表达质粒 ,在JM 10 5中获得表达。用Triton 10 0 (1% )和Tween 2 0 (1% )处理 ,并用亲和层析纯化表达产物 ,将其免疫新西兰兔 ,用免疫印迹分析收获的兔抗血清。结果 :构建的ParkinC表达质粒在JM 10 5中获得表达 ,以分子量为 4 2kD的包涵体存在 ;目的蛋白纯度为 95 % ;得到效价为 1∶6 4的抗血清 ;免疫印迹分析表明 ,制备的抗血清可与鼠脑细胞抽提物中 5 1 6kD的蛋白产生特异的免疫反应。结论 :Parkin蛋白C端在 JM 10 5 中获得高效表达并得到特异性多克隆抗体 相似文献
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目的：构建Parkin基因3‘端的表达质粒，在大肠杆菌中表达并制备多克隆抗体。方法：构建Parkin基因3‘端（937－1959bp）的谷氨酰胺硫转移酶（glutathion-sulfate-transferase,GST)融合表达质粒，在JM105中获得表达。用Triton-100(1%）和Tween-20(1%）处理，并用亲和层析纯化表达产物。将其免疫新西兰兔，用免疫印迹分析收获的兔抗血清。结果：构建的ParkinC表达质粒在JM105中获得表达，以分子量为42kD的包涵体存在；目的蛋白纯度为95％；得到效价为1：64的抗血清；免疫印迹分析表明，制备的抗血清可与鼠脑细胞抽提物中51.6kD的蛋白产生特异的免疫反应。结论；Parkin蛋白C端在JM105中获得高铲表达并得到特异性多克隆抗体。 相似文献
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代谢组学是对某一生物或细胞所有低分子量代谢产物进行定性和定量分析的一门新学科.本文对代谢组学的概念、代谢组学研究的目的和领域以及代谢组学在恶性肿瘤研究中的应用方面进行了综述. 相似文献
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