细胞分裂周期素25A影响放射线照射后HEp-2细胞的G_2/M期阻滞及凋亡

目的:研究放射线照射后HEp-2细胞的G2/M期阻滞与细胞分裂周期素(CDC)25A表达的相关性及过表达CDC25A蛋白对细胞周期及凋亡的影响。方法:通过流式细胞仪和Western blot方法检测4Gy X线照射后在不同时间点细胞周期及CDC25A蛋白含量;经脂质体转染pEGFP-N1-CDC25A质粒的HEp-2细胞为CDC25A组,转染pEGFP-N1质粒的为空载对照组,通过实时荧光定量PCR法检测这两组细胞中CDC25A的mRNA含量以鉴定转染效率;通过流式细胞仪检测CDC25A组和空载对照组细胞经4Gy放射线照射后细胞周期和细胞凋亡率;通过MTT法检测两组细胞的存活曲线。结果:放射线照射后G2/M期在细胞周期中的比例与CDC25A蛋白含量成正相关;CDC25A组细胞的CDC25A mRNA含量为空载对照组的15倍;过表达CDC25A联合4Gy放射线照射可废除G1/S关卡阻滞,促进G2/M期聚集和提前进入有丝分裂,可导致细胞凋亡增加和细胞存活率降低。结论:CDC25A的含量与G2/M期的比例正相关,调控CDC25A的表达可影响放射线照射后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡水平。     

氮杂胞苷对射线诱导大鼠Ⅱ型肺上皮细胞系上皮间质转换的影响

目的 探讨氮杂胞苷对射线诱导大鼠Ⅱ型肺上皮细胞系(RLE-6TN)上皮间质转换的影响,并探究其发生机制,为放射性肺纤维化提供潜在的药物治疗实验依据。方法 体外培养RLE-6TN细胞根据实验目的分为对照组(C)、照射组(R)、氮杂胞苷组(A)、照射加氮杂胞苷组(R+A)。细胞超微结构改变采用透视电子显微镜鉴定,细胞形态学改变采用倒置相差显微镜观察。运用实时荧光定量RT-PCR检测E-cadherin和α-SMA在mRNA水平的表达,运用蛋白印迹法检测E-cadherin、GSK3β、p-GSK3β(ser9)在蛋白水平的表达。单因素方差分析组间差异。结果 R组细胞形态趋于纺锤形,而R+A 变化不明显。R组嗜锇性板层小体最终消失。RT-PCR提示在mRNA水平R组相对C组E-cadherin表达减少[(0.23±0.06)∶(1.00±0.00),P=0.002]、α-SMA表达增多[(2.91±0.01)∶(1.00±0.00),P=0.000],而R+A组相对R组E-cadherin表达增加[(0.47±0.05)∶(1.00±0.00),P=0.024]、α-SMA表达减少[(2.50±0.02)∶(1.00±0.00),P=0.037)]。蛋白印迹法结果显示R组相对C组E-cadherin在蛋白水平表达下调[(0.07±0.01):(0.48±0.02),P=0.028]、p-GSK3β表达上调[(0.85±0.04)∶(0.23±0.03),P=0.031],而R+A组相对R组E-cadherin表达下降[(0.25±0.00)∶(0.07±0.01),P=0.024)]、p-GSK3β表达上调程度明显减少[(0.39±0.03)∶(0.85±0.04),P=0.014]。结论 X射线可引起上皮细胞上皮间质转换,而氮杂胞苷通过抑制p-GSK3β活性来抑制放射诱导的RLE-6TN细胞上皮间质转换的发展。     

α7-nAchR激动剂GTS-21对放射性肠炎小鼠的疗效及对其血清炎症因子的影响

目的探讨α7-n AchR激动剂GTS-21对放射性肠炎小鼠的临床疗效,并观察其对血清炎症因子水平的影响。方法选取100只成年雌性BALB/c小鼠,对其腹部进行10 Gy照射建立放射性肠炎模型,并随机分为GTS-21组和对照组,各50只。其中GTS-21组分别在照射前1 d和照射后1 d腹腔注射GTS-21,对照组腹腔注射无菌生理盐水。分别于照射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d抽取小鼠尾静脉血检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平。对比不同时刻两组小鼠体质量、粪便成型量、血清炎症因子水平变化。另在照射5 d后处死并采用HE染色观察肠道隐窝深度。结果对照组小鼠体质量、粪便成型量每2个时刻间对比差异均有统计学意义(P0.05),且治疗后2 d、3 d、4 d和5 d时GTS-21组小鼠体质量、粪便成型量均明显高于对照组(P0.05);两组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均随着时间的延长逐渐显著升高,除1 d后每2个时刻间对比差异均有统计学意义(P0.05),且治疗后2 d、3 d、4 d和5 d时GTS-21组小鼠血清炎性因子水平均明显低于对照组(P0.05);GTS-21组小鼠肠道隐窝深度明显高于对照组。结论α7-n AchR激动剂GTS-21对放射性肠炎小鼠有理想的治疗作用,并且能够降低血清炎症因子水平,增多肠道隐窝结构。     

宫颈癌同步放化疗期间一级预防使用PEG-rhG-CSF改善患者粒细胞减少症和生活质量的队列研究

目的:探讨在宫颈癌同步放化疗期间一级预防使用聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子(PEG-rhG-CSF)是否能改善患者的骨髓造血功能和生活质量。方法:回顾性分析2018年5月至2019年1月经本院病理证实为宫颈癌,有同步放化疗指征患者共58例。按病例处理方式的不同分为两个队列:①PEG-rhG-CSF组(PEG组):在患者同步放化疗期间给予一级预防使用长效粒细胞集落刺激因子——PEG-rhG-CSF进行处理;②rhG-CSF组(G-CSF组):在患者同步放化疗期间出现中性粒细胞下降才给予重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)进行处理。两组队列各29例患者。采用t检验或χ2检验比较患者同步放化疗期间骨髓抑制,同步化疗次数及生活质量的差别。结果:PEG组出现Ⅲ～Ⅳ度粒细胞减少的比率明显低于rhG-CSF组(31. 8%vs 62. 06%,P=0. 007)。PEG组和G-CSF组中出现Ⅲ～Ⅳ度血小板下降的比率无明显统计学差异(20. 68%vs 31. 03%,P=0. 551)。PEG组同步化疗>4周期的患者明显多于G-CSF组(P=0. 008)。生活质量QLQ-C30(V3. 0)评估显示PEG组疲劳乏力症状明显低于G-CSF组(P=0. 018),其他症状无明显差异(P>0. 05)。PEG组功能领域评估和总体健康状况明显高于G-CSF组(P<0. 05)。结论:在宫颈癌同步放化疗期间一级预防使用PEG-rhG-CSF,可明显降低同步放化疗期间重度骨髓抑制的风险,提高患者的生活质量,具有良好的临床应用前景。