姜黄素影响Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对Aβ25—35诱导体外去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的可能影响机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，每次实验分对照组（0）、诱导组和保护组；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系；通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测cyclin D1、cdk4、pRb、E2F1、bax等基因表达水平的变化。结果：（1）去血清培养24h．PC12细胞大约90％同步于G0／G1期；（2）25μmoL／L Aβ25-35处理8、16h。     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25-35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与细胞凋亡的影响。方法：种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带（DNA—Ladder）；结果（1）用终浓度分别为0～20μmol／L的姜黄素（Cur）处理去血清培养PC12细胞24h，     

阿尔茨海默病的发病机制及药物治疗进展

综述了阿尔茨海默病(AD)发病的分子机制、诱发AD的相关基因及关于AD发病机制的几个学说,报道了AD最新的药物治疗进展.     

过氧化氢对PC12细胞plk1基因表达的影响

目的 观察过氧化氢对体外培养的PC12细胞plk1基因表达的影响.方法 采用MTT法观察不同浓度过氧化氢对体外培养的PC12细胞作用6h后,对PC12细胞存活率的影响;Western-blot检测不同浓度过氧化氢作用后,PC12细胞plk1基因蛋白表达水平的变化.结果 与对照组比较,过氧化氢剂量依赖性降低PC12细胞的存活率,增强PC12细胞plk1基因蛋白的表达水平.结论 过氧化氢降低PC12细胞的增殖活力,其机制可能是通过增强Plk1蛋白表达水平来实现.     

Aβ25-35诱导PC12细胞周期紊乱及对P53和Cyclin D1基因表达的影响

目的:探讨Aβ25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化及对P53和Cyclin D1基因表达的影响。方法:PC12细胞同步于G0期,采用终浓度为0-45μmol/L或浓度为25μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞,用MTT比色法分析细胞存活率;流式细胞仪检测分析细胞周期的改变;RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测P53和Cyclin D1基因的变化。结果:随着Aβ25-35剂量的增加,PC12细胞存活率降低(P<0.01);流式细胞仪分析表明去血清培养24 h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25μmol/L Aβ25-35诱导组8,16,24 h与对照组比较,S期百分率明显增加(P<0.01),16 h后细胞凋亡率明显增加(P<0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰);P53 mR-NA表达和P53蛋白表达降低、Cyclin D1 mRNA表达和Cyclin D1蛋白表达增高。结论:Aβ25-35降低去血清培养的PC12细胞存活率,诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期,并阻滞于S期,同时出现凋亡,可能与下调P53的表达,上调Cyclin D1的表达有关。     

H2O2对PC12细胞par-4和NF-κBP65基因表达的影响

目的 探讨H2O2对PC12细胞前列腺细胞应答凋亡蛋白-4(prostate apoptosis response-4，par-4)和陔转录因子-κBP65(NF-κBP65)基因表达的影响。方法 用不同终浓度H2O2(0～400nmol／L)处理PC12细胞8h．或终浓度200nmol／l H2O2处理PC12细胞不同时间(0～8h)，采用RT-PCR检测par-4、NF-κBP65 mRNA表达变化．Western blot检测Par-4和NF-κBP65蛋白表达的变化。结果 随H2O2浓度从100～400nmol／L增加，par-4、NF-κBP65 mRNA表达和Par-4、NF-κBP65蛋白表达水平逐渐增加；200nmol／L H2O2作用PC12细胞0～8h，par-4 mRNA表达和Par-4蛋白表达，在2～8h随时间延长表达增加；在0～8h NF-κBP65 mRNA表达和NF-κBP65蛋白表达无明显变化。结论 H2O2可时间、剂量依赖性的增加par-4 mRNA表达和Par-4蛋白表达；H2O2可剂量依赖性的增加NF-κBP65 mRNA表达和NF-κBP65蛋白表达；NF-κBP65 mRNA表达和NF-κBP65蛋白表达无时间依赖性。     

贝类GI型扎幌样病毒荧光定量PCR检测

目的 建立贝类中GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 .方法 通过用聚乙二醇6000(PEG6000)对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GI型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GI型扎幌样病毒荧光定量PeR检测方法 .结果 浓度为106～104,103,102～101拷贝/μL的GI扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应(RT-PCR)最低检出限为103拷贝/μL.此荧光定量PCR方法 对贝类中GI型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达102拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为102～106拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8.结论 本研究建立了GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 ,可用于贝类中GI型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测.     

家蝇天蚕素对人肝癌BEL-7402细胞的作用靶点

将家蝇天蚕素(终浓度50μmol/L)加入对数生长期的人肝癌BEL-7402细胞中作用12h,扫描电镜观察天蚕素对人肝癌细胞细胞膜的影响。在此基础上,采用绿色荧光素异硫氰酸(FITC)标记天蚕素,运用激光共聚焦显微镜观察FITC标记的天蚕素与人肝癌细胞细胞膜的作用。肿瘤细胞经天蚕素作用12h后,扫描电镜显示细胞膜表面微绒毛大部分消失;激光共聚焦显微镜显示大部分天蚕素与细胞膜结合,细胞内也发现部分天蚕素进入。     

Par-4与阿尔茨海默病神经元凋亡

前列腺凋亡反应蛋白 4 (prostateapoptosisresponse 4 ,Par 4 )是一种小分子蛋白质 ,其生理功能尚不清楚 ,但能够促进多种细胞包括神经元的凋亡已得到证实。Par 4参与阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease,AD)神经元凋亡过程复杂 ,且有望成为筛选治疗AD药物的作用靶点     

2002/原花青素对β-淀粉样肽（25-35）诱导去血清培养PC12细胞细胞周期分布的影响

目的 探讨原花青素 (Procyanidins,PC) 对β-淀粉样肽（25-35）[βamyloid peptide -(25-35),Aβ25-35] 诱导去血清培养PC12细胞的凋亡及细胞周期分布的影响。方法 流式细胞仪检测细胞周期分布情况及细胞凋亡率;RT-PCR 检测 p53基因 mRNA 表达;Western blot检测 P53蛋白表达。 结果 30mg/L PC预处理 PC12 细胞 1 h ,可降低Aβ25-35引起的去血清培养PC12细胞凋亡率,逆转Aβ25-35引起的去血清培养PC12细胞的细胞周期S期阻滞,降低 p53 mRNA及P53蛋白表达。 结论 PC可对抗Aβ25-35 诱导的去血清培养 PC12 细胞的凋亡及细胞周期S期阻滞,其机制可能与下调p53基因表达有关。