青蒿琥酯治疗家犬卫氏并殖吸虫感染的效果观察

目的探讨青蒿琥酯（Art）对双倍体卫氏并殖吸虫病的治疗作用。方法1）卫氏并殖吸虫成虫用含不同浓度Art的RPMI 1640培养基体外培养后作电镜观察;2）实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常规病理检查,取出的虫体作电镜观察。结果1）5 mg/kg组体外培养24 h后,虫体萎缩,扫描电镜观察部分体棘消失、倒伏、絮状物附着;透射电镜显示皮层水肿、细胞器及分泌颗粒减少,卵黄腺萎缩,卵巢卵细胞胞浆空泡变等;2）两治疗犬体内虫体萎缩,厚壁囊肿数分别为28和35个,对照犬为16个,差异有显著性（P〈0.05）;透射电镜显示成虫变化与体外培养试验相似。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫有损伤作用。     

弓形虫三磷酸核苷水解酶基因克隆、表达与鉴定

目的 对刚地弓形虫三磷酸核苷水解酶基因（NTPase）进行克隆、表达和鉴定。 方法 采用PCR扩增刚地弓形虫RH株的NTPase基因，克隆入pGEM?-T Easy载体，经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB，并转入大肠埃希菌(E.coli)BL21（DE3）中进行诱导表达。用镍-次氮基三乙酸亲和层析柱纯化重组质粒pBAD-HisB-NTPase表达产生的含组氨酸的重组蛋白，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析蛋白表达产物。 结果 PCR扩增得到特异的刚地弓形虫NTPase-Ⅱ基因序列，经测序鉴定无基因突变。SDS-PAGE结果表明NTPase-Ⅱ基因在E.coli BL21（DE3）中获得高效表达，其融合蛋白相对分子质量（Mr）约70 000，与理论值相近。Western blotting分析结果显示，纯化的重组蛋白可被弓形虫感染的鼠血清及鼠抗重组蛋白血清识别。 结论 所克隆表达的弓形虫NTPase-Ⅱ重组蛋白具有良好的抗原性。     

弓形虫三磷酸核苷水解酶-II的克隆、表达及初步应用

目的探讨弓形虫RH株速殖子NTPase-II重组蛋白的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法通过PCR获得NTPase-II基因,克隆入pGEM-T Easy载体,经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB,构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌中以包涵体形式获得高效表达。SDS-PAGE和Western-blot分析蛋白表达产物。用纯化的表达产物作为诊断抗原,通过对反应条件的优化,初步建立检测抗NTPase-II抗体的间接ELISA方法。结果PCR扩增得到特异的弓形虫NT-Pase-II基因序列,经测序鉴定无基因突变。重组质粒诱导表达产物相对分子量约70kD,与理论值相符。经Western-blot证实,重组蛋白可刺激机体产生相应的抗体。具有良好的抗原性和免疫原性。用表达的重组NTPase-II蛋白初步建立了用于NTPase-II抗体检测的间接ELISA方法。结论重组NTPase-II蛋白具有较强免疫原性,可作为诊断抗原用于急性弓形虫感染诊断试剂的研发。     

ELISA法诊断实验性大鼠肝毛细线虫病

目的：实验研究肝毛细线虫对大鼠的血清抗体水平的影响，为人体肝毛细线虫病的免疫诊断提供科学依据。方法：捕获阳性鼠分离肝毛细线虫虫卵，将虫卵培养至感染期，感染大白鼠。制作虫卵可溶性抗原，用ELISA法对大鼠体内血清抗体作动态检测，并选用5种对照血清作比较，以观察该法的特异性。结果：大鼠在感染4周后可全部阳性检出，该法对大鼠旋毛虫、日本血吸虫、犬弓蛔虫、广州管圆线虫和肺吸虫抗体阳性血清分别有2／10、2／10、2／10、1／10和0的假阳性。结论：ELISA法具有较高的敏感性和特异性，适用于检测肝毛细线虫感染。     

广州管圆线虫成虫可溶性抗原诱导小鼠保护性免疫的研究

目的 探讨广州管圆线虫成虫可溶性抗原诱导小鼠的保护性免疫,为广州管圆线虫病的免疫预防研究提供科学依据。方法 以广州管圆线虫成虫可溶性抗原隔周腹腔注射免疫小鼠1次,共3次,末次免疫1w后,用300条广州管圆线虫第三期幼虫感染每鼠,攻击感染4w后解剖每鼠检获虫体,计算减虫率,并观察、测量检获虫体形态、大小。此外,还检测了小鼠体内血清特异性抗体IgG和血液嗜酸性粒细胞含量。结果 免疫组小鼠与对照组比较,有极显著的减虫效果（P＜0．01）,800μg、400μg和200μg免疫原组小鼠的减虫率分别是44．0％、42．6％和18．7％。免疫组小鼠体内检获的虫体比对照组要少。免疫组小鼠血清抗体水平及血液嗜酸性粒细胞绝对值均高于对照组（P＜0．01）。结论 广州管圆线虫成虫可溶性抗原可诱导小鼠产生保护性免疫。     

温州地区人群猪带绦虫/囊虫病流行病学调查

目的:了解温州地区猪带绦虫/囊虫病流行情况,为本地区猪带绦虫/囊虫病的防治工作提供参考依据.方法:运用流行病学方法、血清学和粪便检查对本地区猪带绦虫/囊虫病进行调查.结果:温州地区人群血清囊虫抗体阳性率为0.61%,猪带绦虫病现患率为0.02%,囊虫病现患率为0.09%.结论:温州地区囊虫病呈零星散发状态,且较多为输入性感染,但仍须重视猪带绦虫病和囊虫病的防治工作.     

三种蠕虫病患者的弓形虫检测

笔者对 1994～ 2 0 0 0年在我室查诊为囊虫病、血吸虫病和肺吸虫病的患者做了弓形虫感染的血清学检测 ,以期阐明这些蠕虫病与弓形虫感染的关系 ,报告如下。1　材料、方法和结果1.1　研究对象　脑囊虫病患者 (临床、实验室诊断及ＣＴ检查均提示脑囊虫感染 ) 78例。经我室作皮试和血清抗体试验皆为阳性 ,并予吡喹酮治疗后转归良好。其中男 5 7例 ,女 2 1例 ,年龄 6～ 72岁 ,平均 (34 .2± 18.6 )岁。肺吸虫病患者 2 6例 ,在流行区有食生或未煮熟的溪蟹史 ,临床ＣＴ或Ｘ线检查提示有肺吸虫感染 ,肺吸虫皮试和血清抗体检测阳性 ,经吡喹酮治疗后…     

温州地区广州管圆线虫病的研究

目的：阐明温州地区1997年10－11月暴发流行“酸脑”的病因，并为该病的防治提供科学依据。方法：分析患发病过程及临床症状，针对性开展温州地区广州管圆线虫病流行学调查，同时用免疫学试验作临床辅助诊断。结果：温州存在广州管圆线虫的自然疫源地，主要中间宿主（福寿螺）及终末宿主的感染率分别为69．4％和19．5％，患皮内试验及间接荧光抗体试验阳性率分别为100％和90．6％，ELISA法用于检测广州管圆线虫血清具有较高的敏感性和特异性。结论：确定温州地区此次爆发流行的“酸脑”为广州管圆线虫病，温州地区为广州管圆线虫病流行区。     

苦参对阴道毛滴虫蛋白质差异表达的影响

目的寻找阴道毛滴虫的特异蛋白质并探讨苦参对其差异蛋白质表达的影响。方法用固相pH梯度双向凝胶电泳分离阴道毛滴虫总蛋白质,凝胶用银染显色,PDQuest7.4.0软件分析。结果同组实验重复3次以上,其中正常对照组找到蛋白质点平均（435±17）个,匹配率为92.5%;苦参组找到蛋白质点平均（336±26）个,匹配率为85.6%。正常组和苦参组共有96个表达差异点,其中苦参组和正常组比较,只在正常组中表达的点有46个,只在苦参组中表达的点有27个,表达增加〉2倍的点有9个,表达降低〉0.5倍的点有14个。结论建立了阴道毛滴虫正常组和苦参组的双向凝胶电泳图谱,识别了96个差异表达的蛋白质。苦参杀灭阴道毛滴虫的作用可能与上述蛋白质的改变有关。