晚期糖基化终末产物受体基因Gly82Ser多态性与结肠癌相关性的研究

目的 探讨结肠癌患者晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation endproducts,RAGE) Gly82Ser基因多态性与结肠癌发生发展的关系.方法 选取90例结肠癌患者为实验组和78例年龄、性别相匹配的结肠良性息肉患者为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测RAGE Gly82Ser基因多态性的分布频率.结果 RAGE Gly82Ser基因型GG(野生型纯合子)、GS(杂合子)和SS(突变型纯合子)在肿瘤组的分布频率分别为53.3％、36.7％、10.0％,在对照组的分布频率分别为76.9％、19.2％、3.8％,各基因型在肿瘤组和对照组的分布频率符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05).与GG基因型相比,杂合子GS基因型和S等位基因携带者(GS+ SS)的OR值分别为2.037(95％ CI:1.207～3.438)和2.022(95％CI:1.275 ～3.208),这种差异在TNM分期Ⅲ期+Ⅳ期和低分化的结肠癌患者中尤为显著,OR值分别为3.575 (95％CI:1.495 ～8.550)和3.580(95％ CI:1.390 ～9.217).结论 RAGE Gly82Ser基因多态性不仅能增加罹患结肠癌的风险,并且与结肠癌的恶性程度密切相关.     

小切口置管真空高负压引流与切开引流治疗乳腺脓肿的临床研究

目的：评估小切口置管真空高负压引流治疗乳腺脓肿的临床效果。方法：回顾性分析南通大学附属医院院收治的43例乳腺脓肿患者的临床资料,其中小切口真空置管高负压引流术治疗20例(置管组),传统脓肿切开引流术治疗23例(切开组),比较两组患者脓肿大小、切口长度、手术时间、换药疼痛程度等。结果：两组患者脓肿大小、年龄及手术时间差异均无统计学意义(均P＞0.05),置管组患者在住院时间、美观性及疼痛程度上明显优于切开组(均P＜0.05)。结论：小切口真空高负压引流术治疗乳腺脓肿具有美观、安全有效、疼痛程度明显减轻的优点,值得临床推广。     

p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及其相互关系

目的探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术检测不同生长状态的HuH7细胞中p27kip1和Spy1的表达及亚细胞定位情况;采用免疫沉淀方法检测HuH7细胞中p27kip1与Spy1的结合情况。结果血清饥饿造成HuH7细胞生长周期停滞,Spy1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,差异有统计学意义（P〈0．05或〈0．01）。与此同时,p27kip1的阳性信号也由整个细胞分布转变为胞核高分布,而Spy1的阳性信号则由胞核高分布转变为胞浆高分布。血清释放后刺激细胞进入细胞周期,上述分子呈现相反的变化,且p27州的阳性信号在胞浆分布增强。结论Spy1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,从而参与调控肝癌细胞的生长。     

腹腔镜胆囊切除术及开腹胆囊切除术对机体不同应激反应的研究

目的 探讨比较腹腔镜胆囊切除术(LC)与开腹胆囊切除术(OC)两种不同手术方式,对机体应激反应的影响.方法 前瞻性随机选择60例胆囊切除术患者,其中LC和OC均为30例.于手术当天清晨和术后24h分别抽取肘静脉血,测定中性粒细胞热休克蛋白70(HSP70)表达、血浆C-反应蛋白(CRP)和白细胞介素-6水平等进行了随机比较研究.结果 中性粒细胞HSP70,血浆CRP及IL-6等指标水平在OC、LC组术后均高于术前,LC组术后水平均明显低于OC组术后,且发现LC和OC术后中性粒细胞HSP70表达与术后肠功能恢复时间及术后住院天数间均呈显著正相关.结论 LC引发机体的急性期应激反应比OC所引发的机体急性期应激反应轻微.较轻的急性期应激反应可能是LC比OC术后恢复快的重要原因之一.     

大鼠胰腺导管上皮细胞体外诱导分化

目的 探讨上皮细胞生长因子(EGF)、尼克酰胺(NIC)、肝细胞生长因子(HGF)、葡萄糖(Glu)、角脘蛋白生长因子(KGF)和β细胞素在大鼠胰腺导管上皮细胞体外诱导分化的作用.方法 采用健康SD大鼠胰腺导管上皮细胞,分于70个培养孔中,加入含有多种营养因子(不含血清)的PRMI 1640培养液中培养.每个孔中6种诱导剂均进行随机组合.在胰岛样细胞团(ICCs)形成前后的不同天数进行细胞计数、电镜观察、胰岛素测定以及免疫细胞化学和荧光分析.结果 胰腺导管上皮细胞培养7d后,单个贴壁上皮细胞分裂增殖,呈鹅卵石样细胞片,单层覆盖;加入诱导和促生长因子后,单层覆盖上皮细胞中逐渐产生一定数量类似胰岛样球状细胞团,直径为80～130μm.结论 6种促生长和诱导因子中,Glu、NIC、KGF、EGF作用较强;在所设定的浓度范围内,其作用均随着浓度的增加而增强.     

RAGE在结肠癌和正常结肠组织的表达差异

目的研究晚期糖基化终末产物受体蛋白(RAGE)在结肠癌和正常结肠组织中的表达差异。方法采用实时荧光定量PCR法、Western blot法分别从mRNA水平、蛋白水平检测12例结肠癌患者新鲜手术切除标本中RAGE表达。另取60例结肠癌组织标本和10例正常结肠组织标本,采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测RAGE表达。分析表达差异及其与临床病理因素的关系。结果 RAGE定位于正常组织及癌组织的细胞质,在癌组织中的表达明显增多(P<0.05)。RAGE的表达与结肠癌的组织分化程度呈负相关,与TNM分期呈正相关。RAGE在低分化、Ⅲ和Ⅳ期结肠癌组织中阳性表达率增高。结论 RAGE在结肠癌中的表达与其侵袭能力存在相关性。     

RNAi对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白表达的沉默作用观察

目的观察RNA干扰（RNAi）对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白（Paxillin）表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA（shRNA）表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA及蛋白。结果根据针对Paxillin基因设计了小干扰RNA（siRNA）序列,构建了shRNA表达载体,并成功转染至HCT-8细胞。以空白对照组作均一化,转染Paxillin-shRNA_1、Paxillin-shRNA_2、Paxillin-shRNA_3、Paxillin-shRNA_NC的细胞及空白对照组细胞Paxillin mRNA相对表达量分别为0.66±0.28、0.31±0.11、1.00±0.22、1.05±0.32、1.00±0.29,Paxillin蛋白相对表达量分别为0.62±0.11、0.39±0.13、0.74±0.21、0.94±0.09、1.00±0.16。结论 RNAi可沉默结肠癌HCT-8细胞Paxillin的表达。     

肝细胞肝癌中Spy1蛋白的表达及其临床意义

目的 研究肝细胞肝癌(HCC)组织中Spy1的表达,探讨其与增殖细胞核抗原(PCNA、Ki67)以及与临床病理之间的关系.方法 免疫组化方法检测50例HCC及癌旁组织和10例肝血管瘤旁肝组织中spy1和Ki67蛋白的表达.收集5例HCC及癌旁肝新鲜组织,免疫印迹技术检测Spyl和PCNA的表达.结果 Spy1在HCC中的表达高于对应的癌旁肝组织.HCC中,Spyl的表达强度与肿瘤病理分级、血清AFP值之间相关(P<0.05);Spy1与Ki67表达呈正相关(P<0.01).结论 Spy1在HCC组织中高表达,Spy1可能在HOC的发生、发展中发挥重要的作用.     

大黄素诱导细胞凋亡对不同类型急性胰腺炎腺泡死亡方式的影响

Objective To investigate the effect of Chinese medicine emodin on death patterns of pancreaticacinar cells in different types of aute pancreatitis and explore its possible mechanism. Methods Rat acute edematous pancreatitis models and acute necrotic pancreatitis models were estab-lished and treated with emodin. Alternations of apoptosis, NF-κB mRNA, Pax mRNA and TNF-α mRNA expression in pancreatic tissue were studied with in situ TUNEL and RT-PCR. Results Nega-tive correlation was found between apoptosis and the severity of pancreatic damage. Following the treatment with emodin, more apoptosis than necrosis was observed in all treaded groups of acute pan-creatitis and the severity of pancreatic histological pathologic damage was dramatically improved. Local expression of NF-κB mRNA and Bax mRNA increased. Conclusion Pancreas aeinar death patterns of apoptosis are induced by emodin. Emodin might regulate the acinar cell death patterns by changing the activation of NF-κB and the expression of bax to lessen the severity.     

大黄素对急性胰腺炎大鼠中性粒细胞凋亡的影响

目的 探讨大黄素对不同类型急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)大鼠中性粒细胞(polymorphonu-clear neutrophil,PMN)凋亡的影响及其可能机制.方法 制作大鼠急性水肿型胰腺炎(acute edematous Pancreatitis,AEP)与急性坏死型胰腺炎(acute necrotic pancreatitis,ANP)模型,使用大黄素进行治疗.采用流式细胞仪检测,蛋白质免疫印迹法等技术,观察各型AP大鼠模型PMN凋亡率及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3、capase-8)表达水平变化情况.结果 大黄素治疗组PMN凋亡率及PMN表达caspase-3、caspase-8水平较同型AP组明显增加(P均＜0.05);各AP组PMN凋亡率与capase-3、capase-8表达变化呈显著正相关(P＜0.05).结论 大黄素可能通过caspase途径来诱导AP中性细胞凋亡.