川芎、黄芪有效成分配伍对缺氧脑微血管内皮细胞的影响

目的观察黄芪、川芎中的有效成分黄芪甲苷、川芎嗪、阿魏酸、毛蕊异黄酮、藁本内酯的正交组合配伍对SD乳鼠脑微血管内皮细胞(rBMVECs)缺氧损伤的保护作用,并找出较优组合。方法 rBMVECs原代传代培养,并建立缺氧模型,4h后观察细胞形态,MTT法测定各成分的最大耐药质量浓度,以L_(18)(3~5)正交表设计安排成分配伍给药,采用黄嘌呤氧化酶显色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法测定caspase-3与caspase-8基因在细胞中的表达。采用极差分析法分析正交试验结果。结果药物正交配伍组合可显著改善缺氧rBMVECs的形态,有效增强SOD活性,有效抑制缺氧诱导的rBMVECs发生Gl/S期阻滞,明显减少了细胞的凋亡,减弱细胞中caspase-3和caspase-8基因表达。正交试验结果分析显示其较优组合为藁本内酯5μg/mL、川芎嗪10μg/mL、阿魏酸20μg/mL、毛蕊异黄酮10μg/mL、黄芪甲苷10μg/mL。结论黄芪、川芎有效成分组合配伍对内皮细胞缺氧损伤有明显的保护作用。     

参芎注射液对缺血再灌注损伤大鼠炎症损伤的影响

为研究参芎注射液对脑缺血再灌注老龄大鼠炎症损伤的影响.将84只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫通组、参芎注射液高、中、低剂量组.连续腹腔注射给药3d,采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,再灌注24h,神经功能评分,取脑TTC染色,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,荧光实时定量PCR(RT-PCR)对海马区IL-1β,TNF-α,ICAM-1和MMP-9 mRNA的表达量进行检测.结果,参芎注射液可使脑梗死体积减少,明显改善神经功能,参芎注射液能减少IL-1β,TNF-α,ICAM-1和MMP-9 mRNA的表达量,并减少IL-1β和TNF-α的含量.表明参芎注射液对大鼠缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抑制炎症因子表达有关.     

大鼠脑缺血后脑组织内皮素-1基因表达及养阴通脑颗粒对其干预的作用

目的:观察养阴通脑颗粒对大鼠脑缺血后脑组织内皮素-1(ET-1)基因表达的干预作用,探讨其对脑缺血损伤保护作用的机制.方法:应用原位杂交及图像分析技术观察脑缺血侧皮质ET-1基因表达的变化.结果:缺血组与养阴通脑颗粒组缺血侧皮质ET-1基因表达显著高于自身健侧相应脑区,养阴通脑颗粒组缺血侧皮质ET-1基因表达显著低于模型组缺血侧.结论:脑缺血后脑组织ET-1基因表达增高,养阴通脑颗粒可显著抑制缺血侧皮质ET-1基因表达,对脑缺血性损伤具有保护作用.     

中药远志、石菖蒲治疗AD的实验研究进展

中药远志、石菖蒲的祛痰开窍在健脑益智作用方面具有理论基础,实验研究提示:远志、石菖蒲能通过抗氧化、清除自由基,改善胆碱能神经功能,调节脑内免疫和细胞因子,改善脑血流量等多途径改善学习记忆能力来实现对阿尔茨海默病的治疗作用.     

基于生物信息学探讨中风醒脑液对脑出血后神经系统及免疫系统 的影响

探讨中风醒脑液（Zhongfeng Xingnao Liquid）对脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）后神经系统 及免疫系统的影响。方法 从中医药系统药理数据库和分析平台（Traditional Chinese Medicine Database and Analysis Platform,TCMSP）获取中风醒脑液有效活性成分;并通过TCMSP、SwissTargetPrediction 数据库获取有 效活性成分作用靶点;通过药物靶标在线数据库（Therapeutic Target Database,TTD）、人类在线孟德尔遗传数 据库（Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM）、DisGeNET、GeneCards 和Drugbank 数据库筛选脑出血相关 靶点;通过京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）筛选神经系统和免疫 系统相关靶点;运用STRING 平台分别对“中风醒脑液-脑出血-免疫系统”,“中风醒脑液-脑出血-神经系统” 交集靶点进行蛋白互作分析和筛选信号通路,运用MCC 法筛选中风醒脑液影响脑出血后神经系统和免疫系统 的核心靶点;利用Cytoscape 3.9.0 软件构建“药物-成分-核心靶点-通路”网络,计算网络度值（Degree）,筛 选出中风醒脑液关键活性成分,运用Autodock Vina 软件对活性成分与核心靶点进行分子对接。利用胶原酶Ⅶ 型诱导大鼠脑出血疾病模型进行实验验证。结果 预测得出中风醒脑液主要活性成分31 种;中风醒脑液对脑 出血后神经系统潜在作用靶点33 个,对免疫系统潜在作用靶点68 个;槲皮素、洋川芎醌和β-谷甾醇等是 中风醒脑液影响脑出血后神经系统和免疫系统的主要活性成分,预测得出肿瘤蛋白P53（TP53）、丝裂原活化蛋 白激酶1（MAPK1）、胱天蛋白酶3（CASP3）等是中风醒脑液影响脑出血后神经系统的核心靶点,肿瘤坏死因子 （TNF）、白细胞介素6（IL-6）、基质金属蛋白酶9（MMP9）等是中风醒脑液影响脑出血后免疫系统的核心靶点; 分子对接结果显示MMP9、信号转导及转录激活蛋白3（STAT3）和白细胞介素1β（IL-1β）等蛋白受体与槲皮 素,洋川芎醌,β-谷甾醇及人参皂苷Rh2 等主要活性成分具有较好的亲和力。动物实验验证结果表明,中风 醒脑液高剂量组能改善脑出血大鼠神经缺损症状及血肿周边组织病理结构,有效减少脑出血后CASP3、IL-1β、 IL-6、TNF、PRKCA、PRKCD、RELA、TP53和MAPK1 mRNA的相对表达,上调NFKBIA、AKT1 mRNA 的相对表 达（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）。结论 中风醒脑液可能通过调控TNF、IL-6、TP53、MAPK1 及CASP3 等 表达来影响脑出血后神经系统和免疫系统,发挥治疗作用。     

次乌头碱、甘草苷及甘草次酸配伍对慢性心力衰竭大鼠的心肾保护作用研究

目的研究附子、甘草三种有效成分次乌头碱、甘草次酸、甘草苷配伍对慢性心力衰竭大鼠的心肾保护作用。方法应用主动脉弓缩窄术(TAC)建立慢性心力衰竭模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(1mg/kg,地高辛组)、次乌头碱组(2.07mg/kg)、次乌头碱(2.07mg/kg)+甘草苷(20mg/kg)+甘草次酸(25mg/kg)配伍组(三药合用组),每组8只,各治疗组连续灌胃给药1周。干预结束6h后检测各组大鼠的超声心动图指标室间隔的厚度(IVSd)、左室后壁厚度(LVPWd)、左心室质量(LVMass)、左室短轴缩短率(FS)、左室射血分数(EF);腹主动脉取血后,取心、肾称重。酶联免疫法检测血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量变化;全自动生化检测仪检测血清BUN、SCr含量变化;HE染色评估心脏病理损伤情况;HE染色和Masson染色评估肾小球肾小管损伤情况以及肾间质纤维化程度。结果与模型组比较,三药合用组超声心动图指标IVSd、LVPWd、LVMass、FS、EF降低(P0.01,P0.05),BUN、SCr、AngⅡ浓度以及单侧肾比重降低(P0.01,P0.05),心、肾组织的病理损伤有明显改善。与次乌头碱组比较,三药合用组FS、EF、BUN、SCr、AngⅡ浓度降低(P0.05),心、肾组织的病理损伤有改善。结论慢性心力衰竭可导致肾脏损伤,次乌头碱、甘草次酸、甘草苷配伍对慢性心力衰竭引起的左心室肥大、心功能障碍以及肾功能损伤有拮抗作用,三药合用的保护作用显著强于次乌头碱。     

养阴益气活血法治疗缺血性中风机理探讨

中风具有起病急、变化快的特点,中医学将其列为"风、劳、臌、膈"四大顽症之首。缺血性中风是中风的常见类型,其发病率远高于其他类型中风。因此,缺血性中风已成为我国中风病防治研究的重中之重,探索有效的治疗方法也具有重要的临床意义和社会价值。本文根据通信作者万海同教授提出的"气阴两虚致血瘀"是缺血性中风的基本病机,探讨养阴益气活血法治疗缺血性中风的理论和实践依据,旨在为临床治疗缺血性中风提供一种新的思路与方法。     

丹参与红花有效成分配伍对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探究丹参与红花有效成分的不同配伍组方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法选取成年雄性SD大鼠,通过大脑中动脉线栓法建立脑缺血再灌注模型,随机分成假手术组、模型组、阳性对照组(丹红注射液2 m L/kg)以及采用正交试验法L9(34)对丹参与红花主要有效成分[丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、羟基红花黄色素A(HYSA)]剂量配伍9组。大鼠尾iv给药,每天1次,连续给药3 d后进行神经功能缺损评分;实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑皮层中葡萄糖调控蛋白78(GRP-78)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、内质网源性转录因子(CHOP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)m RNA表达;HE染色检测大鼠大脑皮层病理变化;免疫组化法检测大鼠大脑皮层中NF-κB p65蛋白的表达情况。结果与模型组比较,丹红注射液、丹参与红花主要有效成分配伍可显著降低脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分,使大鼠大脑皮层GRP-78 m RNA表达水平升高,NF-κB p65、CHOP、TNF-a、IL-6 m RNA表达水平降低,抑制大脑皮层中NF-κB p65蛋白表达。丹参与红花主要有效成分配伍9组中第4组(丹参素30 mg/kg、丹酚酸A 2.5 mg/kg、丹酚酸B 16mg/kg、HYSA 8 mg/kg)、第6组(丹参素30 mg/kg、丹酚酸A 10 mg/kg、丹酚酸B 8 mg/kg、HYSA 4 mg/kg)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用更为显著。结论丹参与红花有效成分各配伍组方均能对脑缺血再灌注损伤大鼠内质网应激、炎症等方面起良好的保护作用。     

甘草酸对雷公藤多甙治疗类风湿性关节炎增效减毒作用的实验研究

1实验材料 雷公藤多甙（TG）、甘草酸（GA）：均由浙江中医药大学生化分离工程实验室制备，含量均在90％以上。酸溶性Ⅱ型胶原（CⅡ）：Sigma产品。卡介苗：购于卫生部生物制品研究所，批号2005263。二硝基氟苯（DNFB）、丙酮：购于华东医药公司。MTT：购于杭州四季青生物技术公司。BIO-RAD-680型酶标仪：美国。     

附子甘草配伍对乌头碱、甘草酸、甘草苷的动态影响

 目的建立水煎液中甘草苷、甘草酸、乌头碱的HPLC定量测定方法。研究附子与甘草配伍前后产生的化学成分的动态变化现象,探讨附子甘草配伍增效减毒的物质基础。方法用高效液相色谱法测定附子、甘草单煎及附子与甘草配伍合煎液中甘草苷、甘草酸、乌头碱的含量,分别观察在煎煮的0,5,10,20,30,45,60,75,90 min化学成分的动态变化情况。结果附子甘草配伍后乌头碱、甘草苷、甘草酸含量均比单煎时低。结论甘草苷、甘草酸、乌头碱等化学成分的变化是附子甘草配伍能增效减毒的重要物质基础。本实验从组分合和的角度,肯定了附子甘草组分配伍的合理性与科学性。