FARS2基因突变对大鼠表型的影响

目的:探讨苯丙酰胺tRNA合成酶(FARS2)基因点突变对大鼠表型的影响。方法:将FARS2基因点突变大鼠与野生型SD大鼠交配,利用PCR及测序方法鉴定子代大鼠的基因型,观察不同基因型大鼠的表型,利用强迫游泳实验检测FARS2基因突变大鼠运动能力的变化,利用免疫荧光染色方法分析突变型FARS2在大鼠脑内的表达。结果:获得杂合子和纯合子子代大鼠,部分子代大鼠出现运动不协调、肢体瘫痪等之症状,大鼠中枢神经系统中FARS2主要表达在小脑,突变型FARS2的表达降低,强迫游泳实验结果显示FARS2基因点突大鼠游泳姿势平衡性变差。结论:FARS2基因突变可导致大鼠运动协调性降低,可作为研究人类遗传性痉挛性瘫痪的动物模型。     

硝苯地平对人牙龈成纤维细胞内Ca2+含量影响的激光共聚焦显微观察

目的:探讨硝苯地平对牙龈成纤维细胞内Ca2 含量的影响。方法:体外培养人牙龈成纤维细胞,钙离子指示剂F luo-3染色,激光扫描共聚焦显微镜下观察加入不同浓度硝苯地平(NIF终浓度分别为1200、32.4 ng/mL)后荧光亮度的变化。结果:硝苯地平能抑制DHP类钙通道激动剂Bay K8644引起的牙龈成纤维细胞内钙离子含量增加(P<0.05),不同浓度硝苯地平的作用之间没有剂量-效应关系。结论:硝苯地平引起牙龈增生可能与抑制牙龈成纤维细胞内Ca2 含量有关。     

兔骨髓基质干细胞自体嚼肌内移植异位成骨实验研究

目的：观察骨髓基质干细胞成骨向分化诱导后植入嚼肌内异位成骨的过程。方法：从兔髂骨分离骨髓基质干细胞，经体外诱导分化，与磷酸三钙／羟基磷灰石（tricalcium phosphate／hydroxyapatite，TCP／HA）支架复合，植入兔自体嚼肌内，形态学、免疫细胞化学、组织学观察其成骨特征。结果：体外培养的兔骨髓基质干细胞性状稳定，经矿化诱导培养的骨髓基质干细胞表现为成骨细胞分化，表达Ⅰ型胶原蛋白，与支架材料复合植入自体嚼肌内可见成熟骨组织形成。结论：利用骨髓基质干细胞为种子细胞植入嚼肌内开展功能性组织工程化颌骨移植方法可行。     

人牙周膜成纤维细胞体外培养条件的优化

目的：优化体外人牙周膜成纤维细胞(HPLF)培养条件，以提高原代HPLF培养成功率。方法：采用玻璃及塑料培养瓶、DMEM、RPMI1640培养液以及胎牛血清、小牛血清，分别比较原代牙周膜成纤维细胞游出率。结果：塑料培养瓶细胞游出率以及细胞游出最短时间均优于常用玻璃培养瓶；两种不同血清比较，胎牛血清的组织块贴壁以及细胞游出率均明显优于小牛血清；RPMI1640比DMEM培养液更适合于HPLF培养。结论：商品塑料培养瓶、胎牛血清、RPMIl640是提高体外HPLF培养成功率的关键。     

利特尔区出血3种治疗方法的疗效观察

我科自2003年以来应用3种不同方法治疗利特尔区反复出血的患者共87例，现将结果报告如下。     

腰椎定量CT与双能X线骨密度测量对老年男性骨质疏松的诊断效能比较

目的评估腰椎定量悦栽与双能X线骨密度测量诊断老年男性骨质疏松的效能。方法 连续选取2012年2月至2012年8月期间于北京积水潭医院干部科住院的老年男性患者,共59例,年 龄54耀92岁。本组病例均行腰椎正位和髋关节DXA及腰椎QCT检查,且两项检查间隔时间不超过 1个月。结果采用世界卫生组织（WHO )DXA -2. 5SD和国际临床骨密度学会（ISCD )腰椎QCT < 80 mg/cm3的骨质疏松诊断标准,DXA诊断本组病例腰椎、髋关节及腰椎或髋关节任一部位骨质疏松 的检出率分别为0%_、. 5豫和8. 5豫。腰椎QCT诊断本组病例骨质疏松的检出率为35. 6豫。其中腰 椎QCT诊断为骨质疏松而腰椎正位DXA未诊断者21例,占35. 6豫,其中3例CT显示有骨质疏松性 椎体骨折;腰椎QCT诊断为骨质疏松而髋关节DXA或任一部位DXA未诊断者均为16例,占 27. 1豫。结论 腰椎QCT比髋关节DXA及腰椎正位DXA对老年男性骨质疏松的诊断更敏感。腰 椎QCT骨密度测量对老年男性的骨质疏松诊断具有较高的临床价值。     

刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达

目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。     

斑马鱼牙齿的组织结构和超微结构特征

目的：观察成年斑马鱼牙齿的组织结构和超微结构特征。方法：以成年斑马鱼（鱼龄〉3月）为研究对象,在体视显微镜下,解剖成年斑马鱼腮弓,对其腮弓和牙齿进行阿辛兰和茜素红染色观察、扫描电镜观察和石蜡切片苏木精-伊红染色观察。结果：阿辛兰和茜素红染色显示斑马鱼牙齿位于第五腮弓上,斑马鱼腮弓和牙齿为硬组织结构,具有透明的牙釉质和红染的牙本质。扫描电镜和苏木精-伊红染色显示斑马鱼牙齿的硬组织有类似人牙釉质和牙本质样结构,斑马鱼牙齿也具有牙髓腔,髓腔内也有牙髓样软组织结构,牙髓腔硬组织壁上具有丰富的牙本质小管样结构。结论：成年斑马鱼牙齿在组织结构和超微结构上与人类牙齿具有相似性。     

增龄因素对人牙髓干细胞生物学行为影响的研究

目的 对不同年龄患者的牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)进行分离培养,并比较其生物学特性.方法 应用组织块联合胰酶消化法培养不同年龄患者的hDPSCs,记录细胞爬出时间,显微镜下观察比较细胞形态.流式细胞术检测细胞表面抗原,并对细胞行体外成骨、成脂诱导,观察矿化结节和脂...