临床微生物实验室管理系统的开发与应用

目的在实验室信息管理系统(LIS)的基础上开发临床微生物实验室管理系统,实现微生物实验室无纸化和信息化管理。方法利用编程语言Visual Basic 6.0和数据库平台SQL Server 2005进行软件开发。结果开发出的临床微生物实验室管理系统主要包括6个模块:标签打印模块用于非培养瓶标本接收后打印标签,可根据申请项目选择相应培养基打印;培养管理模块用于培养瓶标本的管理,包括上机时间、下机时间、培养结果等数据的采集和传输,并自动进行初级报告等;常规鉴定模块用来管理标本所有的操作记录,关于标本的所有操作均采用电子化记录,可随时监控及查看;工作列表模块用于操作类型内容的分类,可进行排序、保存、打印等,方便检验人员随时查看历史操作记录;信息查询模块用于检索患者信息及操作记录等内容;系统设置模块供管理员进行后台管理,包括基础设置、人员设置、参数设置、操作日志、系统帮助等。系统调试稳定后,标本前处理时间由原来的30 min缩短至10 min,血培养处理时间由原来的30 min缩短至5 min,报告审核效率提高75%,多级报告完成率由原来的8%提高至100%。结论开发出的系统全面废除了微生物实验室手工记录等繁琐的纸质操作,提高了工作效率和质量,可缩短报告时限,提升流程管理的信息化水平。     

常见腹泻病毒多重荧光逆转录聚合酶链反应检测方法的建立及临床应用

目的建立能同时检测星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和诺如病毒的多重荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法。方法根据上述4种病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析多重荧光RT-PCR的特异性、敏感性、灵敏度;以所建立方法对256例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果所建立的腹泻病毒多重荧光RT-PCR检测方法对具有星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒特异性,灵敏度可达500 copy/mL。256例粪便标本中,星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和诺如病毒的检出率分别为3.13%、42.97%、9.38%和10.16%,与基因测序比对结果相符。结论成功构建可用于常见腹泻病毒检测的多重荧光RT-PCR检测方法,该法具有快速、灵敏、特异等优点,可用于临床病原诊断。     

223株常见肠球菌的临床分布和耐药性分析

目的分析常见肠球菌在临床标本中的分布及对常用抗菌药物的耐药性,为临床治疗提供参考。方法采用法国梅里埃生物API鉴定系统进行菌种鉴定,并采用K—B纸片扩散法进行体外耐药监测及统计耐药率。结果肠球菌的临床分离率为8．78％,分类以粪肠球菌为主,其次为屎肠球菌,肠球菌属对利福平、四环素、红霉素、达福普汀、氯霉素耐药率较高。而对万古霉素、替考拉宁和呋喃妥因仍然保持良好的敏感性。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、左旋氧氟沙星的耐药率分别为2．4％、2．4％、5．9％,均低于屎肠球菌的90．7％、88．9％、13．0％,屎肠球菌对四环素、氯霉素的耐药率分别为51．9％和48．1％,均低于粪肠球菌的95．3％和78．1％。结论临床标本中,肠球菌在泌尿生殖道标本中的分布最高,粪肠球菌和屎肠球菌的耐药谱明显不同,在重症感染时可选用万古霉素、替考拉宁和呋喃妥因进行治疗。     

ABO血型不合异基因造血干细胞移植患者ABO血型抗体的监测

目的:监测ABO血型不合造血干细胞移植患者IgM型和IgG型ABO血型抗体的变化,研究这些变化在移植患者血型转变中的作用。方法:用凝聚胺法和微柱凝胶法监测32例移植患者ABO血型,IgM型和IgG型ABO血型抗体的变化。结果:32例ABO血型不合患者血型全部转变为供者型,造血重建时间结果分析表明血型不合对于粒系和血小板的恢复无影响;患者血型转为供者血型后,其血清中缺乏相对应的抗体;32例ABO血型不合患者中有6例供受者移植模式为A→O,其中有3例发生PRCA,且均检出IgG型抗A抗体,其余29例未检测到IgG血型抗体;3例PRCA患者红系造血恢复时间明显延长。结论:IgG型ABO血型抗体可能会抑制ABO血型不合骨髓移植患者的红系分化成熟,在PRCA的发生中可能起重要作用。监测ABO血型不合移植患者体内的ABO血型抗体变化可指导输血治疗,避免溶血性输血反应。     

葡萄球菌的耐药性分析

目的分析葡萄球菌（包括MRS和MSS株）的耐药性,为临床合理选择抗生素提供依据。方法药敏试验及耐甲氧西林葡萄球菌的检测均采用琼脂扩散法（K—B法）,操作及结果判断均按NCCLS（2002）标准执行。结果金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌的分离率分别占41．3％和72．1％;MRSA和MRSCON株的检出率分别为45．0％和75．0％;MRSA株对喹诺酮类的耐药性（21．0％-57．0％）明显低于MRSCON株（81．2％～89．6％）;除万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、阿米卡星和部分青霉素类外,MRSA和MRSCON株的耐药性显著高于MSSA和MSSCON株〈P〈0．05）;未发现耐万古霉素和替考拉宁菌株。结论由MRS菌株引起的严重感染首选万古霉素和替考拉宁治疗,发现耐万古霉素和替考拉宁菌株的实验室要根据NCCLS的有关规定修订药敏报告,并且及时切断传播途径,降低细菌的耐药性和医院感染。     

原发性肝癌与HBV、HCV感染关系

目的：了解乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）在原发性肝细胞癌（HCC）发生中的作用以及两种病毒的相互关系。方法：168例HCC组和182例正常组的配对对照研究。结果：HCC组中HBV-DNA和HCV-RNA阳性率分别为74.4%及11.9%,显著高于对照组的10.4%和3.3%,HBV-DNA或HCV-RNA阳性以及两者均阳性时发生HCC的相对危险度分别为52.7、30.2和84.0。此外,原发性肝癌还与既往肝硬化史、家族肝癌史有关,且以男性高发。结论：原发性肝癌的发生受多种因素影响,尤其HBV和（或）HCV慢性感染是主要危险因素之一。HBV感染除可能有直接致癌作用外,还可与HCV有协同致癌作用。     

葡萄球菌的耐药性分析

[目的]分析葡萄球菌（包括MRS和MSS株）的耐药性，为临床合理选择抗生素提供依据。[方法]药敏试验及耐甲氧西林葡萄球菌的检测均采用琼脂扩散法（K-B法），操作及结果判断均按NCCLS（2002）标准执行。[结果]金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌的分离率分别占41．3％和72．1％；MRSA和MRSCON株的检出率分别为45．0％和75．0％；MRSA株对喹诺酮类的耐药性（21．0％～57．0％）明显低于MRSCON株（81．2％～89．6％）；除万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、阿米卡星和部分青霉素类外，MRSA和MRSCON株的耐药性显著高于MSSA和MSSCON株（P〈0．05）；未发现耐万古霉素和替考拉宁菌株。[结论]由MRS菌株引起的严重感染首选万古霉素和替考拉宁治疗，发现耐万古霉素和替考拉宁菌株的实验室要根据NCCLS的有关规定修订药敏报告，并且及时切断传播途径，降低细菌的耐药性和医院感染。     

179株医院感染铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的探讨医院感染铜绿假单胞菌(PA)的耐药性,为医院感染的监测与控制提供依据。方法采用法国梅里埃生物API鉴定系统进行PA鉴定,并采用K-B纸片扩散法进行体外耐药监测及统计耐药率。结果2年中检出179株PA,其中对耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)占总株数的12.8%;PA分离率最高的病区为重症监护病房(ICU),占35.8%;其次为外三科(16.2%);内一科(15.1%)。PA药物敏感率最高的是多黏菌素E(100%),其次为美罗培南(86.6%)和亚胺培南(82.7%)。耐药率最高的药物是氨苄西林/舒巴坦(95.0%)和复方新诺明(91.6%)。IRPA对15种常规抗菌药物的耐药率明显高于非耐药株,IRPA除对多黏菌素E无耐药外,对其余14种抗菌药物耐药率均大于50%。结论PA的耐药性已十分严重,必须进行严密的监控,预防PA导致的医院感染暴发流行。     

广州管圆线虫感染大鼠血清IgG抗体水平动态观察

目的了解大鼠感染广州管圆线虫后血清特异性IgG抗体水平的动态变化。方法用ELISA方法对感染后不同时间采集的大鼠血清进行抗广州管圆线虫IgG抗体滴度的检测，以了解其抗体水平的动态变化。并比较了感染血清经过或不经过2-琉基乙醇处理和给大鼠灌服吡喹酮的情况下，ELISA检测值的变化。蛄果大鼠感染广州管圆线虫后，其血清特异性IgG抗体水平随时间的推移而逐渐升高。用2-ME处理后各时点采集的感染大鼠血清OD值均较不加处理者有不同程度的提高。服药结束后第3d大鼠血清IgG抗体ELISA检测值约为未服药组感染大鼠的2．2倍。结论以2-ME处理的血清及服用吡喹酮能提高阳性检出率。