超细β-磷酸三钙/聚-L-乳酸复合材料的制备与骨折内固定器的加工

目的：制备分散性良好的超细β-磷酸三钙(β-TCP)／聚-L-乳酸(PLLA)复合材料及新型可吸收骨折内固定器。方法：通过研磨方法制备β-TCP超细粒子，用一缩二乙二醇作分散剂研磨β-TCP后，再将β-TCP与PLLA超声混合，制得复合材料，经注塑加工制成可吸收骨钉，并采用扫描电镜等方法进行表征。结果与结论：用一缩二乙二醇作分散剂研磨β-TCP后再经超声混合，可以使β-TCP超细粒子在复合材料中分散均匀，粒子大小仅为300nm左右，β-TCP与PLlA基体之间结合良好。超细β-TCP／PLLA复合材料可加工成可吸收骨钉，弯曲强度达到100MPa左右，完全满足松质骨内固定的要求。     

两种壳聚糖修饰材料细胞相容性及蛋白吸附行为的评价

目的对甘油明胶/壳聚糖(CGG)和玉米醇溶蛋白/壳聚糖(ZC)两种壳聚糖修饰生物材料的细胞相容性和蛋白吸附作用进行初步评价。方法应用M TT比色法,评价两种材料对L 929小鼠细胞的细胞毒性,测定他们对大鼠原代表皮细胞的细胞粘附率和细胞增殖率;同时应用考马斯亮兰G-250染色法测定材料对牛血清蛋白的吸附作用。结果本实验结果显示,两种壳聚糖修饰材料对L 929细胞生长抑制反应级别为1级或0级,属于无明显毒性作用。大鼠皮肤成纤维细胞在CGG上的粘附率和增殖率分别达到88.8%和96.0%;在ZC上的粘附率和增殖率分别达到80.7%和94.7%。两种材料不同时间对蛋白的吸附量存在有差异。结论两种修饰材料具有良好的细胞相容性,其中CGG在细胞体外增殖作用和蛋白吸附作用方面要优于单纯壳聚糖和ZC。     

一株产紫杉醇内生真菌的分离及其代谢产物的研究

目的从南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)中分离产紫杉醇内生真菌,并研究其抗肿瘤细胞活性。方法采用组织块法从南方红豆杉的树根部、树主干内层、侧枝及针叶分离纯化内生真菌,经液体发酵培养,抽提发酵粗产物,以标准紫杉醇为对照进行薄层层析(TLC)、紫外光谱(UV)、HPLC、质谱(MS)分析。同时将经上述方法确认后的内生真菌产的紫杉醇作用于人宫颈癌HeLa细胞,采用MTT法分析其抗肿瘤细胞活性。结果从南方红豆杉主干韧皮部分离得到1株产紫杉醇内生真菌D62,其紫杉醇产量为148.95μg/L。对菌株D62的菌落和菌丝体的形态学分析表明其属于镰刀属(Fusarium sp.)。将该菌株产紫杉醇作用于HeLa细胞,表现出明显的致细胞凋亡作用。结论南方红豆杉中分离得到的产紫杉醇内生真菌D62具有优良的发酵特性。     

聚乳酸-聚羟乙酸／磷酸三钙薄膜预防屈肌腱粘连的实验

目的：探讨在屈肌腱损伤修复后应用和不应用聚乳酸-聚羟乙酸／磷酸三钙薄膜包裹两种情况下，术后不同时期屈肌腱的粘连情况和聚乳酸-聚羟乙酸／磷酸三钙薄膜在肌腱愈合过程中的作用。方法：实验于2004-03／10在东南大学修复重建外科研究所实验室进行。选取健康成熟的三黄鸡40只，以右足第2，3趾深屈肌腱横断后修复作为肌腱粘连的动物模型，取右足第2趾为实验趾、第3趾为对照趾。聚乳酸-聚羟乙酸／磷酸三钙薄膜包裹，术后3，4，8周分别取材。通过生物力学、大体观察、组织学及扫描电镜检查，观测肌腱愈合情况、与周围组织的粘连情况、屈趾功能及假鞘结构。结果：进入结果分析的实验鸡39只。①实验趾肌腱的屈趾功能明显优于对照趾[术后3周：（10．53&;#177;1．07），（7．78&;#177;0．37）mm，术后4周：（14．96&;#177;1.51），（9．37&;#177;1．35）mm，术后8周：（19．93&;#177;0．81），（11．47&;#177;0．15）mm，P〈0．05]。②大体观察实验趾在各时间段肌腱与腱周组织的粘连均较对照趾轻，肌腱为内源性愈合，并形成具有正常滑膜A、B型细胞的假鞘结构，与肌腱间有间隙。结论：聚乳酸-聚羟乙酸／磷酸三钙薄膜通过刺激周围组织形成假鞘，阻止来自腱周的粘连，且不影响肌腱正常愈合，是较理想的预防肌腱粘连材料。     

日本血吸虫病新型树枝状载体-DNA疫苗的构建及其评价

[摘要] 目的构建并评价一种新型的日本血吸虫病聚酰胺-胺（PAMAM）型树枝状载体DNA疫苗。方法采用赖氨酸对4.0 G PAMAM进行表面修饰,合成端基改性产物PAMAM-Lys。用电泳阻滞实验确定质粒DNA与PAMAM-Lys复合的比例,用透射电镜测试复合物微观结构变化,并通过电泳分析复合物的稳定性。同时采用MTT法对PAMAM-Lys进行体外细胞活性评价。分别用纯化质粒pJW4303、pJW4303-SjC23、树枝状载体PAMAM-Lys和复合物PAMAM-Lys/pJW4303-SjC23免疫50只小鼠,检测各组小鼠的特异性抗体水平以评价其免疫反应性。结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示,电荷比在2～4时,PAMAM-Lys与DNA正负电荷完全中和,DNA电泳被完全阻滞,两者能完全结合。透射电镜测试结果表明,树枝状高分子载体与DNA的复合导致DNA结构收缩,粒径减小,分布均匀。树枝状高分子与DNA复合物具有良好的稳定性。噻唑蓝法检测结果表明,改性后的树枝状高分子载体及其DNA复合物作用于293T细胞较未改性树枝状载体产生的细胞毒性低;经PAMAM-Lys/pJW4303-Sj23免疫的小鼠产生的特异性抗体水平显著高于注射裸DNA疫苗组（P<0.05）。结论 氨基酸修饰的树枝状高分子PAMAM-Lys是DNA转染的优良载体,具有良好的生物相容性,赖氨酸修饰可以显著降低PAMAM树枝状高分子的细胞毒性,并能增强DNA疫苗的免疫反应性。     

镇咳清肺汤治疗肺热痰咳证100例

镇咳清肺汤系昆明地区名中医姚贞白所拟验方。其方以疏络理肺，清化痰热，宣肺止咳，理气祛痰立法，经临床观察１００例，治疗结果临床控制１２％，显效２９％。好转５０％，无效９％。总有效率９１％。对肺系痰热证有显著疗效。     

聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙薄膜预防屈肌腱粘连的实验

目的:探讨在屈肌腱损伤修复后应用和不应用聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙薄膜包裹两种情况下,术后不同时期屈肌腱的粘连情况和聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙薄膜在肌腱愈合过程中的作用。方法:实验于2004-03/10在东南大学修复重建外科研究所实验室进行。选取健康成熟的三黄鸡40只,以右足第2,3趾深屈肌腱横断后修复作为肌腱粘连的动物模型,取右足第2趾为实验趾、第3趾为对照趾。聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙薄膜包裹,术后3,4,8周分别取材。通过生物力学、大体观察、组织学及扫描电镜检查,观测肌腱愈合情况、与周围组织的粘连情况、屈趾功能及假鞘结构。结果:进入结果分析的实验鸡39只。①实验趾肌腱的屈趾功能明显优于对照趾[术后3周:(10.53±1.07),(7.78±0.37)mm,术后4周:(14.96±1.51),(9.37±1.35)mm,术后8周:(19.93±0.81),(11.47±0.15)mm,P<0.05]。②大体观察实验趾在各时间段肌腱与腱周组织的粘连均较对照趾轻,肌腱为内源性愈合,并形成具有正常滑膜A、B型细胞的假鞘结构,与肌腱间有间隙。结论:聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙薄膜通过刺激周围组织形成假鞘,阻止来自腱周的粘连,且不影响肌腱正常愈合,是较理想的预防肌腱粘连材料。     

葛根素脂质体滴眼液的制备及其药动学研究

目的:制备葛根素脂质体滴眼液,研究其在兔泪液中的消除情况.方法:采用逆相蒸发法制备葛根素脂质体;用葡聚糖凝胶柱分离脂质体和游离药物,测定葛根素在脂质体中的包封率;采用透射电子显微镜观察脂质体形态,激光粒度测定仪测定脂质体的粒径分布;以葛根素滴眼液为对照,HPLC法测定葛根素脂质体滴眼液在兔泪液中药物浓度,计算药物动力学参数.结果:葛根素脂质体形态圆整,平均粒径为195.7nm,药物包封率为48.3%,葛根素脂质体制刺在兔泪液中代谢药动学参数MRT,AUC分别为葛根素滴眼液的3.89和3.06倍.结论:成功制备了葛根素脂质体滴眼液,与普通滴眼液相比,显著提高了药物在泪液中的浓度,延长了平均滞留时间,提高了药物在眼部的吸收.