ACL的构建及其对结直肠癌HCT116细胞增殖和迁移的作用

目的探讨miR-363-5p靶向三结构域蛋白14(TRIM14)对3种乳腺癌细胞系凋亡的影响。 方法采用实时荧光定量PCR法比较不同化疗药物诱导3种乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-435、MCF-12A)中miR-363-5p和TRIM14 mRNA表达水平,采用免疫组化法检测不同亚型乳腺癌组织TRIM14表达情况。采用Western blotting检测TRIM14蛋白表达。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。应用生物信息学方法预测miR-363-5p与TRIM14的结合位点,通过干扰miR-363-5p和TRIM14研究miR-363-5p对3种乳腺癌细胞中TRIM14的调控作用。Pearson相关分析各亚型乳腺癌组织中miR-363-5p与TRIM14的相关性。 结果3种化疗药物均能促进细胞凋亡,化疗药物处理3种亚型乳腺癌细胞后miR-363-5p表达上升,TRIM14 mRNA表达下降。荧光素酶报告基因实验发现TRIM14是miR-363-5p的靶基因。过表达miR-363-5p后,3种亚型乳腺癌细胞凋亡率上升,TRIM14蛋白和mRNA下降。敲低TRIM14后3种亚型乳腺癌细胞凋亡率上升,过表达TRIM14后3种亚型乳腺癌细胞凋亡率下降。3种亚型乳腺癌组织miR-363-5p与TRIM14表达呈负相关。 结论化疗药物诱导3种亚型乳腺癌细胞后miR-363-5p表达上升,miR-363-5p靶向抑制TRIM14表达,促进3种乳腺癌细胞系凋亡。     

一种核酸适配体高敏检测方法的建立及应用评价

本文建立一种基于免疫印迹的核酸适配体高敏定量分析的检测方法,并探讨其在适配体药物靶向性研究中的应用价值。首先用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行核酸适配体的分离,然后利用电转的方法将凝胶上的核酸适配体转移至PVDF膜上,先后孵育Rabbit Anti-Biotin和HRP-Streptavidin抗体,最后利用化学发光仪进行成像。结果显示核酸适配体可以通过该方法进行定量检测分析,且该方法检测灵敏度高,能够识别荧光染料法检测不到的浓度范围。此外,该方法只识别被生物素修饰的核酸适配体,特异性强。结果提示,核酸免疫印记法可以作为核酸适配体药物靶向性研究的一个定量检测手段。     

残毁性掌跖角化病一例

目的:内服联合外用药物治疗残毁性掌跖角化病疗效观察。方法:选取就诊于我院一例已确诊的残毁性掌跖角化病患儿,给予口服阿维A胶囊10mg口服,每日一次,联合院内自制中药制剂泡洗患处,硫磺霜、地奈德乳膏、止痒润肤乳膏联合局部外用及中药封包治疗。结果:较入院时,患儿皮损处增生的角化性疣状斑块显著好转,渗液及臭味消失,皮肤基本恢复正常色泽。结论:内服联合外用药物治疗残毁性掌跖角化病疗效显著,值得临床推广应用。     

妊娠早期绒毛膜下出血与胎盘脐带附着异常的关系研究

目的探讨妊娠早期绒毛膜下出血与脐带附着部位之间的关系,提高超声对脐带附着部位异常的检出率。方法选取我院经超声诊断为妊娠早期绒毛膜下出血的79例单胎妊娠孕妇(病例组),按照出血面积与孕囊面积的比值分为少量出血亚组33例、中等量出血亚组22例及大量出血亚组24例;另选同期妊娠早期超声检查正常且无任何并发症的102例单胎妊娠孕妇(对照组)。各组均于结构筛查期采用二维超声及彩色多普勒超声观察脐带附着部位,记录两组脐带附着部位情况及病例组不同亚组间脐带附着部位情况;分析不同亚组与脐带附着部位异常的关系。结果病例组脐带异常附着的发生率为13.92%,明显高于对照组(2.94%),差异有统计学意义(P0.05);病例组中,少量出血亚组、中等量出血亚组、大量出血亚组脐带附着部位异常发生率分别为3.03%、13.64%、29.17%,组间比较差异有统计学意义(P0.05);相关性分析显示,妊娠早期绒毛膜下出血程度与结构筛查期脐带附着部位异常呈正相关性(r=0.32,P0.05)。结论妊娠早期发生绒毛膜下出血会对脐带附着部位产生影响,两者呈正相关,即出血程度越高,脐带附着部位异常的发生率越高。     

低氧对顺铂损伤A549细胞的影响

目的 探讨低氧条件对顺铂损伤人非小细胞肺癌A549细胞的影响.方法 实验分为两大组:常氧组(正常对照组、顺铂10 μmol/L组、顺铂20μmol/L组);1％低氧组(正常对照组、顺铂10 μmol/L组、顺铂20μmol/L组).应用MTT法检测顺铂在常氧和低氧条件下对A549细胞增殖率的影响;MDC染色检测细胞自噬空泡的变化;Hoechst33342染色检测细胞核变化.结果 与对照组相比,顺铂能降低A549细胞增殖率,并呈剂量依赖性,细胞自噬空泡无明显积聚,但细胞核发生显著皱缩;低氧条件下细胞内出现大量自噬空泡积聚,且低氧明显降低了顺铂对A549细胞增殖率的影响,降低了顺铂对细胞的损伤作用.结论 顺铂能够诱导A549细胞损伤,而低氧条件引起了细胞自噬过程,并降低了顺铂的损伤作用.推测低氧时的细胞自噬在顺铂损伤A549细胞过程中可能是一种保护作用.     

褪黑素对卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移和血管生成的影响

研究褪黑素对卵巢癌SKOV3细胞侵袭、迁移和血管生成的影响。MTT实验、划痕实验和Transwell侵袭实验分别观察褪黑素对SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。诱导HUVECs成管,观察褪黑素对其影响。Western blot法检测SKOV3细胞内血管内皮生长因子(VEGF)、钙黏附蛋白E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和波形蛋白(Vimentin)的表达。建立卵巢癌移植瘤模型,免疫组化检测CD31的表达。结果显示,褪黑素能抑制卵巢癌SKOV3细胞的侵袭和迁移,并且明显下调MMP-9、Vimentin和VEGF蛋白的表达,上调E-cadherin的表达。此外,褪黑素抑制了HUVECs的小管生成,体内CD31的免疫组化结果也显示褪黑素能够抑制微血管密度。结果提示,褪黑素能抑制卵巢癌细胞的侵袭、迁移和血管生成。     

胰岛素缓释载体聚乙二醇-聚己内酯-聚甲基丙烯酸-N,N-二乙氨基乙酯的制备及评价

目的 制备pH敏感聚乙二醇-聚己内酯-聚甲基丙烯酸-N,N-二乙氨基乙酯(mPEG-PCL-PDEAEMA)载胰岛素缓释纳米粒,考察其体外释放效果和体内降糖活性.方法 结合开环聚合反应和原子转移自由基聚合反应合成具有不同疏水链段的mPEG-PCL-PDEAEMA,用傅里叶红外光谱和核磁共振氢谱表征其结构;采用纳米沉淀技术制备聚合物载胰岛素纳米粒,动态光散射法测定粒径,透射电子显微镜观察其形态;BCA法测定载药情况,并考察其体外释放行为;建立糖尿病大鼠模型,监测给药后血糖水平.结果 在pH1.2~7.4时,聚合物纳米粒的粒径随pH增大而减小.以90%wt投药比制备mPEG5k-PCL13k-PDEAEMA10k和mPEG5k-PCL10k-PDEAEMA10k载胰岛素纳米粒时的包封率和载药率为最佳,包封率分别为(81.99±1.77)%和(53.12±0.62)%,载药率分别为(42.46±0.53)%和(32.34±0.26)%,粒径分别为181.9±6.67 nm和169±7.1 nm.体外释放结果显示聚合物载胰岛素纳米粒具有出色的缓释行为,并且随着疏水链段的增长,药物释放速度减慢.体内药效实验表明mPEG5k-PCL13k-PDEAEMA10k载胰岛素纳米粒能够在体内保持48 h的降血糖效果,较游离胰岛素的降糖作用时间明显延长.结论 pH敏感三嵌段聚合物mPEG-PCL-PDEAEMA有望成为理想的胰岛素缓释载体.     

脐带叉状附着的产前超声特征和妊娠结局6例分析

目的:分析脐带叉状附着的产前超声特征和妊娠结局,提高检出率,降低不良妊娠的发生风险。 方法:回顾性分析2018 年2 月至2021 年2 月在江苏大学附属医院产后经临床检查证实为脐带叉状附着的 6 例孕妇产前超声和临床资料,总结脐带叉状附着的产前超声诊断要点,追踪随访产后临床检查结果及妊 娠结局。 结果:6 例脐带叉状附着二维及彩色多普勒超声检查提示脐带主干均在进入胎盘前分离,分离后 的脐血管分支可游离于羊膜腔,其中,2 例合并部分脐血管分支沿胎膜走行,余脐血管分支正常进入胎盘 实质;1 例副胎盘可见,进入副胎盘的脐血管分支部分边缘附着于副胎盘实质,部分沿胎膜走行,余脐血管 分支正常进入主胎盘实质;1 例所有脐血管分支均边缘附着于胎盘实质;2 例所有脐血管分支均正常进入 胎盘实质。 6 例中急诊剖宫产因脐血管分支断裂导致新生儿死亡 1 例,脐带根部脐静脉瘤样增宽 1 例,脐 带根部血肿1 例,余3 例未见围产期并发症。 结论:脐带叉状附着是一种罕见的脐带异常附着方式,如果 在产前超声检查中发现进入胎盘实质前的脐带主干分离或分支,应警惕叉状附着的可能。     

6-羟基-1-氢-吲唑保护 MPP +诱导凋亡的 SH-SY5Y 细胞的机制

目的：研究6-羟基-1-氢-吲唑对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP +)诱导凋亡的 SH-SY5Y 细胞的保护作用机制。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y,以200μmol/ L MPP +诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡建立体外帕金森病细胞模型。 Western blot 法分别检测200μmol/ L MPP +和200μmol/ L MPP +联合0.1μmol/ L 6-羟基-1-氢-吲唑作用后 SH-SY5Y 细胞内糖原合酶激酶3β(GSK-3β)、周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)以及凋亡蛋白酶3(caspase-3)的活性。结果200μmol/ L MPP +作用 SH-SY5Y 细胞8 h, GSK-3β、CDK5与 caspase-3活性升高。200μmol/ L MPP +联合0.1μmol/ L 6-羟基-1-氢-吲唑作用 SH-SY5Y 细胞8 h,GSK-3β、CDK5与 caspase-3的活性降低。结论6-羟基-1-氢-吲唑对MPP +诱导凋亡的 SH-SY5Y 细胞的保护机制可能是抑制GSK-3β、CDK5和 caspase-3的活性。