血清同型半胱氨酸、叶酸、维生素B12水平与溃疡性结肠炎的关系

目的 分析浙江省汉族人群血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、叶酸、维生素B₁₂(vitamin B₁₂,VitB₁₂)水平和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)临床特征的相关性。方法 纳入186例UC患者和202例性别与年龄相匹配的正常对照者,采用“Truelove & Witts”评分评估UC患者的疾病活动度。应用循环酶法测定Hcy水平,化学发光免疫法测定叶酸、VitB₁₂水平。运用Pearson相关性分析、多元线性回归分析探讨UC患者Hcy水平与“Truelove & Witts”评分、叶酸、VitB₁₂、C反应蛋白、血清白蛋白等实验室指标的关系。采用Logistic回归法评估UC独立危险因素。结果 与正常对照组比较,UC组中Hcy水平显著高于正常对照组(13.01±4.02μmol/L vs 10.01±2.40μmol/L,P<0.01),而叶酸、VitB₁₂水平均明显低于正常对照组(5.74±2.64ng/ml vs 7.59±2.21ng/ml,P<0.01;274.49±115.12pg/ml vs 429.85±120.92pg/ml,P<0.01)。UC组中高同型半胱氨酸血症(high homocysteine,HHcy,>15.0μmol/L)和叶酸缺乏(<4.0ng/ml)、VitB₁₂缺乏(<203.0pg/ml)的比例均明显升高(24.19% vs 5.94%,P<0.01;27.96% vs 5.44%,P<0.01;29.57% vs 6.93%,P<0.01),且UC患者中Hcy水平重度＞中度＞轻度(15.27±4.73μmol/L vs 12.45±3.64μmol/L vs 9.32±2.27μmol/L,P均<0.01),而叶酸、VitB₁₂水平均重度＜中度＜轻度(4.26±2.89ng/ml vs 6.03±2.50ng/ml vs 7.14±2.37ng/ml,P均<0.01;198.37±98.64pg/ml vs 316.58±134.37pg/ml vs 402.17±130.61pg/ml,P均<0.01)。多因素Logistic回归分析表明,在校正性别和年龄等因素后,UC组中Hcy水平与叶酸、VitB₁₂水平呈独立负相关(β=-0.287,P=0.025;β=-0.267,P=0.032),多因素Logistic回归分析结果显示,叶酸缺乏、VitB₁₂缺乏均为UC的独立危险因素(OR=3.314,P=0.012;OR=7.019,P<0.01)。结论 浙江省汉族UC患者中高同型半胱氨酸血症和叶酸、VitB₁₂缺乏的情况可能普遍存在,血清Hcy水平和叶酸、VitB₁₂水平与UC患者疾病严重程度密切相关,叶酸、VitB₁₂缺乏均为UC的独立危险因素。     

溃疡性结肠炎患者中诱骗受体和护骨素基因多态性及其结肠组织表达水平分析

目的 拟在浙江省汉族人群中探讨结肠组织中诱骗受体和护骨素基因多态性及其结肠组织表达水平与UC的关系。方法 收集56例UC患者和62例性别、年龄相匹配的良性结肠息肉患者作为对照组,采集空腹外周静脉血和结肠组织标本。采用SNaPshot技术检测DcR1(rs12549481)、DcR2(rs1133782)及OPG(rs3102735)的基因多态性。采用反转录实时定量PCR(RT-qPCR)法和免疫组织化学法检测结肠组织中DcR1、DcR2、OPG mRNA及蛋白表达水平。在UC组和对照组之间,以及携带不同基因型的UC患者之间比较结肠组织中DcR1、DcR2、OPG mRNA和蛋白表达水平差异。结果 UC组中突变基因型(GA+AA)及突变等位基因(A)频率均显著高于正常对照组(15.18% vs 6.45%,OR=2.595,95%CI:1.073~6.274,P=0.030; 28.57% vs 12.90%,OR=2.700,95%CI:1.053~6.926,P=0.035)。UC患者结肠组织中DcR2mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组(4.49±2.29 vs 9.49±4.06,t=8.134,P<0.01;0.180±0.052 vs 0.273±0.069,t=8.322,P<0.01)。携带DcR2(rs1133782)突变基因型(GA+AA)的患者结肠组织中DcR2的mRNA和蛋白表达水平显著高于携带野生纯合子(GG)基因型者(3.64±1.63 vs 6.62±2.35,t=5.43,P<0.01;0.129±0.028 vs 0.198±0.047,t=7.147,P<0.01)。然而,UC组和对照组之间,以及携带DcR1、OPG不同基因型的UC患者之间,DcR1和OPG mRNA和蛋白表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 DcR2 (rs1133782)基因突变可能降低UC的发病风险,其机制可能通过降低DcR2 mRNA和蛋白表达水平发挥作用,DcR1(rs12549481)和OPG (rs3102735) 基因多态性及其结肠组织表达水平与UC的发病风险无显著关联。     

SEC1基因敲除对实验性结肠炎小鼠严重程度和肠道菌群的影响

目的 探讨一种小鼠α-(1,2)-岩藻糖基转移酶SEC1基因敲除(SEC1-/-)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的结肠炎小鼠中结肠炎症和肠道菌群的影响。方法 采用CRISPR/Cas9技术构建SEC1-/-C57BL/6小鼠,通过连续口服3%葡聚糖硫酸钠5天构建实验性结肠炎模型,设置SEC1-/-结肠炎组(14只)、野生型结肠炎组(15只)和野生型对照组(6只)共3组。通过疾病活动度评分和体质量变化评估结肠炎严重程度,收集小鼠升结肠内粪便样本,采用高通量16s-rDNA测序技术检测粪便菌群组分,通过生物信息分析比较肠道菌群组分的差异。组间比较采用方差分析、独立样本t检验或秩和检验。结果饮用DSS第7天,与野生型结肠炎组比较,SEC1-/-结肠炎小鼠体质量显著下降(77.9%±4.7% vs 87.0%±6.2%,P<0.05),而疾病活动指数显著升高(7.3±2.8 vs 9.4±2.6,P <0.05)。野生型结肠炎小鼠Simpson指数显著低于对照组小鼠(0.83 vs 0.91,P<0.05),但两组小鼠肠道菌群OTU个数、Shannon和chao1指数比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。与野生型结肠炎组比较,SEC1-/-结肠炎组肠道菌群的OTU个数显著增多(305 vs 194,P<0.05),Shannon和chao1指数均显著增加(4.71 vs 4.09;332 vs 207;P均<0.05),乳酸杆菌属(28.95 vs 2.23)、梭菌属(0.13 vs 0.01)和糖单胞菌属(1.82 vs 0.09)的丰度均显著增多(P均<0.05)。结论 SEC1基因敲除使葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎小鼠模型严重程度加重,并影响结肠炎小鼠的肠道菌群组成。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因多态性及其血浆表型与克罗恩病的关系

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因多态性及血浆可溶性TRAIL(sTRAIL)水平与克罗恩病(CD)的关系, 并回顾性分析TRAIL基因变异及血浆sTRAIL水平对英夫利昔单抗(IFX)临床应答的影响。方法 2012年1月至2021年1月, 从温州医科大学附属第二医院消化内科收集312例CD患者[男205例, 女107例, 年龄(33.9±9.8)岁]和514名性别、年龄相匹配的正常对照者[男304名, 女210名, 年龄(34.9±9.4)岁]。患者中72例对传统药物治疗无效或不耐受的活动期CD患者接受IFX(5 mg/kg)规范治疗, 第14周时依据Harvey-Bradshaw指数(HBI)和CD简化内镜评分(SES-CD)的变化分为应答组[HBI下降≥3分和(或)SES-CD下降≥50%]和无应答组。采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱技术检测TRAIL(rs1131568)基因多态性, 酶联免疫吸附法检测血浆sTRAIL水平。依据"蒙特利尔CD表型分类标准"将患者分层(确诊年龄、疾病部位、疾病行为)。全面分析rs1131568基因多态性和血浆sTRAIL...