血清中氧化三甲胺的高效液相色谱串联质谱法测定研究

目的建立人血清中胆碱依赖肠道菌群代谢物——氧化三甲胺(TMAO)的高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)的测定方法,并研究其精密度和稳定性。方法以d9-TMAO为内标,血清经乙腈除蛋白后,采用Si O2柱(2.1 mm×100 mm,5μm)、乙腈-甲酸铵(10 mmol/L,p H 3.0)等度洗脱,选择多反应监测模式测定,测定方法的精密度和准确度及不同保存条件下的稳定性。结果本研究方法的检测限和定量限分别为0.003和0.063μmol/L,线性范围为0.16~20.00μmol/L(r2=0.999 9),不同浓度点的日内变异系数为2.03%~2.64%,日间变异系数为6.00%~9.94%,回收率为89.5%~103.0%;血清在4℃保存时,24 h内TMAO浓度变化在10%以内,72 h后TMAO浓度升高明显,浓度变化为15.85%;血清保存于-80℃时,72 h后TMAO浓度变化范围均在10%以内;反复冻融4个冻融循环内浓度变化仍在15%的可接受范围内。结论本研究建立的高效液相色谱串联质谱法检测TMAO的方法具有快速、准确且灵敏的特点,可以满足大样本人群血样检测要求。血液样本保存时应注意保存温度、时间对TMAO浓度的影响。     

载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积与血清抗氧化低密度脂蛋白的抗体水平

背景低密度脂蛋白的氧化是动脉粥样硬化发生和发展过程中关键的影响因素,血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法对动脉粥样硬化斑块的评估价值如何?目的探讨载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法,并分析血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积的评估价值.设计单因素方差分析(分组对照实验).单位一所大学的营养与代谢性疾病实验室.对象apoE基因缺陷小鼠作为阳性组(品系C57BL/6J,n=15),正常小鼠作为对照组(品系C57BL/6J,n=15).干预两组实验小鼠在层流架中分笼喂养,自由饮水摄食,16周后自小鼠眼眶静脉采血,分离小鼠血清.分离载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠血清,用酶联免疫吸附法检测血清氧化低密度脂蛋白抗体水平;用油红O染色法和图像分析法测量小鼠动脉粥样硬化斑块面积.主要观察指标载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠小鼠氧化低密度脂蛋白的水平和动脉粥样斑块面积.结果apoE基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白的水平显著高于正常小鼠的水平[(0.079±0.028)%,(0.012±0.001)%,F=10.666,P＜0.01];载脂蛋白E基因缺陷小鼠的动脉粥样硬化斑块面积[(26.25±9.20)%]也显著高于正常小鼠(0%),且二者之间呈显著性相关,r=0.638,P＜0.01.结论载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平与其动脉粥样斑块面积的大小密切相关,是载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成的一个重要指标.     

广州市低肌肉量老年人膳食现况调查

目的了解广州市低肌肉量老年人膳食营养状况,为低肌肉量老年人合理膳食、预防肌肉衰减提供科学建议。方法对参与补充乳清蛋白随机对照试验的低肌肉量老年人进行基线问卷调查,收集调查对象一般情况和体格测量资料,采用半定量79条目食物频率问卷调查参与者近1年的膳食情况。结果共调查122名老年人,男性和女性各61人,平均年龄(71.3±3.8)岁;四肢骨骼肌质量指数(ASMI)男性为(6.39±0.47)、女性为(4.94±0.38)。该人群膳食营养素日均摄入量与膳食营养素参考摄入量(DRIs)比较,男性和女性日均蛋白质、维生素E、维生素C和铁的摄入量均达到100%DRIs;总能量日均摄入量基本达到80%DRIs;钙的日均摄入量男性仅占DRIs的59.7%、女性占57.7%。蔬菜、畜禽肉日均摄入量男性依次为(344.3±150.3)、(100.2±67.8)g/d,女性依次为(352.9±154.1)、(79.8±49.4)g/d,均高于膳食指南推荐量;水果摄入量男性为(137.7±110.9)g/d、女性为(121.6±62.7)g/d,奶类摄入量男性为(45.6±60.6)g/d、女性为(61.0±69.0)g/d,豆类摄入量男性为(17.4±31.4)g/wk、女性为(17.1±33.8)g/wk,均低于膳食指南推荐量。结论广州市低肌肉量老年人膳食蛋白质摄入基本充足,但奶类、豆类和水果摄入量不足,建议改善膳食结构以维持适宜的骨骼肌量。     

载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积与血清抗氧化低密度脂蛋白的抗体水平

背景：低密度脂蛋白的氧化是动脉粥样硬化发生和发展过程中关键的影响因素，血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法对动脉粥样硬化斑块的评估价值如何?目的：探讨载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测方法，并分析血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块面积的评估价值。设计：单因素方差分析(分组对照实验)。单位：一所大学的营养与代谢性疾病实验室。对象：apoE基因缺陷小鼠作为阳性组(品系C57BL／6J，n=15)，正常小鼠作为对照组(品系C57BL／6J，n=15)。干预：两组实验小鼠在层流架中分笼喂养，自由饮水摄食，16周后自小鼠眼眶静脉采血，分离小鼠血清。分离载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠血清，用酶联免疫吸附法检测血清氧化低密度脂蛋白抗体水平；用油红O染色法和图像分析法测量小鼠动脉粥样硬化斑块面积。主要观察指标：载脂蛋白E基因缺陷小鼠和正常小鼠小鼠氧化低密度脂蛋白的水平和动脉粥样斑块面积。结果：apoE基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白的水平显著高于正常小鼠的水平[(0．079&;#177;0．028)％，[0．012&;#177;0．001)％，F=10．666，P&;lt;0．01]；载脂蛋白E基因缺陷小鼠的动脉粥样硬化斑块面积[(26．25&;#177;9．20)％]也显著高于正常小鼠(0％)，且二者之间呈显著性相关，r=0．638，P&;lt;0．01。结论：载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化低密度脂蛋白抗体水平与其动脉粥样斑块面积的大小密切相关，是载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成的一个重要指标。     

黑米花色苷影响动脉粥样硬化不稳定斑块及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的作用

目的：建立动脉粥样硬化不稳定斑块动物模型，观察黑米花色苷对动脉粥样硬化不稳定斑块及诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响。 方法：实验于2004—06／2006—10在中山大学公共卫生学院营养系完成。黑米花色苷从广东省广州市产的黑优占品种的米皮中提取纯化，主要成分为矢车菊定-3-葡萄糖苷和芍药定-3-葡萄糖苷。48只4周龄脂蛋白E基因敲除C57BL／6J小鼠，平均体质量（21&;#177;3）g，抽签随机分为3组：黑米花色苷组、辛伐他汀组和对照组，其中黑米花色苷的添加剂量为1g／kg饲料，辛伐他汀为0．5g／kg饲料，每组16只，雌雄各8只。所有小鼠分笼喂养在层流架中，自由饮水摄食，室温24℃，每两天用紫外灯消毒1次以保持层流架的无菌环境，30周后麻醉颈椎脱臼处死，磷酸盐缓冲液灌注后取出无名动脉，苏木精-伊红染色进行组织学观察，并提取RNA检测诱导型一氧化氮合酶表达变化。 结果：48只小鼠均进入统计分析。①脂蛋白E基因敲除小鼠饲喂基础饲料30周在无名动脉处能观察到钙化、薄纤维帽及大脂核等不稳定斑块的典型特征。（④与对照组小鼠相比，黑米花色苷组出现具有三层以下细胞组成的薄纤维帽、占斑块面积＞50％的大脂核等特征的动脉粥样硬化斑块的频率分别降低了57.38％和53．13％；与对照组小鼠相比，辛伐他汀组薄纤维帽和大脂核出现的频率也分别降低了51．29％和64．25％，而3组间出现钙化现象斑块的频率差异不显著。③黑米花色苷组和辛伐他汀组与对照组相比，诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达分别下降了39．26％和45．82％，而黑米花色苷组与辛伐他汀组相比，诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达量差异不显著。 结论：脂蛋白E基因敲除小鼠可作为动脉粥样硬化不稳定斑块实验动物模型，黑米花色苷能促进斑块稳定性，这种作用与不稳定斑块诱导型一氧化氮合酶表达下调有关。     

人脐静脉内皮细胞体外培养、鉴定与形态学特征观察

目的：建立人血管内皮细胞的培养模型，为体外研究动脉硬化发病机制提供重要的实验手段。方法：采用1．25g／L胰蛋白酶(2．5g／L胰蛋白酶：0．2g／LEDTA：1：1V／V)消化、分离和传代人脐静脉内皮细胞，并用光镜、电镜和免疫组化等方法进行内皮细胞的形态观察和鉴定。结果：原代培养的内皮细胞在接种后约2h开始贴壁生长，光镜下内皮细胞呈铺路石状镶嵌排列；免疫组化可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应；电镜下可见胞浆中有W-P小体，证实培养的细胞为内皮细胞。结论：用胰酶灌注消化脐静脉可获得高纯度的内皮细胞，细胞存活率高。本方法为血管内皮细胞的研究提供了实验模型。     

2011年广州市越秀区部分公务员亚健康状况调查

[目的]了解广州市越秀区公务员亚健康罹患状况,为公务员亚健康的干预措施提供科学依据。[方法]2011年3～6月,在越秀区党校2011年上半学年各级培训班的干部学员中,抽取部分没有疾病的学员,采用亚健康自评表进行调查。[结果]调查1147人,处于总体亚健康者占71．57％,躯体亚健康罹患率为52．49％,心理型亚健康罹患率为34．00％,社会型亚健康罹患率为3．40％。总体亚健康罹患率在不同年龄、不同体重指数（BMI）、不同行政级别组的差异有统计学意义（P〈O．01）;躯体亚健康罹患率,男性高于女性,不同年龄、不同BMI组、不同婚姻状况、不同行政级别的差异均有统计学意义（P〈0．01）。调查对象亚健康自评总得分为216．88±29．47分,躯体亚健康得分为127．11±18．78分,心理亚健康得分为42．36±7．40分,社会亚健康得分为36．45±5．35分。亚健康自评总得分,女性低于男性（P〈O．01）;躯体亚健康得分,女性低于男性,不同年龄、不同婚姻状况、不同行政级别的差异均有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）。[结论]越秀区公务员总体亚健康罹患率处于一般水平。亚健康表现以躯体亚健康为主,应重视对公务员群体开展健康教育,增强对亚健康危害的认识及知晓率。     

对氧磷酶2148 Ala/Gly基因多态性与冠心病的关系

目的:探讨对氧磷酶(PON)2148Ala/Gly(PON2148Ala/Gly)基因多态性与冠心病(CHD)、血浆PON和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)浓度的关系。方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测161例CHD患者和72例对照组的PON2148Ala/Gly基因多态性基因型,采用比色法测定血浆PON、SOD活性和MDA浓度。结果:与对照组相比,CHD组的血浆PON活性和SOD活性明显降低[(357.53±145.07)∶(463.99±162.56)μmol·min-1·L-1和(25.08±17.05)∶(42.99±22.82)kU/L],均P<0.01;MDA浓度显著增高[(2.47±0.73)∶(2.13±0.56)μmol/L],P<0.01;CHD患者以PON2148突变纯合子(GG)基因型、杂合子(AG)基因型为主,分别为11.2%、43.5%,与对照组(5.6%、27.8%)比较,P<0.01。CHD组PON2148突变GG和AG基因型的PON活性较野生纯合子(AA)基因型明显降低[分别为(291.00±91.59)、(371.52±154.63)∶(422.68±161.46)μmol·min-1·L-1,P<0.01和P<0.05];Logistic回归分析显示PON2148Ala/Gly基因多态性GG、AG基因型(OR=1.55,95%CI1.13～2.11,P<0.01)和G等位基因携带者(OR=2.03,95%CI1.04～3.97,P<0.05)是CHD的独立危险因子。结论:PON2148Ala/Gly基因多态性的GG、AG基因型和G等位基因携带者是CHD的危险因子,并且这2种基因型患者的血浆PON活性明显降低;CHD患者的血浆PON和SOD活性明显降低,MDA浓度显著增高。     

“鳕鱼”的美味陷阱

什么!我们吃的鳕鱼基本都是假的？前段时间,微博上爆发了“鳕鱼门”事件,马伊喇曝女儿吃假鳕鱼导致拉肚子并愤怒指责相关部门,同时文章在微博上针对女儿吃到假鳕鱼事件爆骂造假商家和相关部门,并且表示要“跟他们没完”……     

乳酸杆菌对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样斑块形成抑制作用

目的 研究乳酸杆菌对载脂蛋白E(apoE)基因缺陷小鼠动脉粥样斑块形成的影响,探讨乳酸杆菌抗动脉粥样硬化作用机制.方法 将apoE基因缺陷(ApoE~(-/-))小鼠随机分为4组:对照组(A组)、乳酸杆菌10~8组(B组)、乳酸杆菌10~(10)组(C组)、乳酸杆菌10~(12)(D组).A组喂养正常小鼠饲料(AIN-93),B、C、D组在正常饲料基础上添加10~8,10~(10),10~(12) cfu/mL乳酸杆菌喂养16周,检测动脉粥样斑块面积.结果 乳酸杆菌10~(12),10~(10),10~8 cfu/mL组的主动脉窦动脉粥样斑块面积分别为13.98%,17.36%,21.54%,比对照组的30.51%分别低54.18%,43.10%,29.40%,差异有统计学意义(P<0.05);随着乳酸杆菌浓度增加,主动脉窦动脉粥样斑块面积减少,但乳酸杆菌各组之间动脉粥样斑块面积差异无统计学意义.结论 乳酸杆菌可以抑制ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样斑块形成,具有抗动脉粥样硬化作用.