Cx43在造血调控及重建中的作用

目的:采用条件性基因敲除技术构建造血系统间隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除(Cx43~(-/-))小鼠模型,并探讨Cx43在维持造血细胞自我更新及功能稳定中的作用。方法:将引进的2对转基因小鼠Cx43 loxP/loxP和Lyz-Cre/+杂交,选取F1雌性子代Cx43 loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43 loxP/loxP合笼回配,提取所获得子代小鼠鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法筛选Cx43~(-/-)小鼠,同时分析小鼠不同器官中Cx43基因的表达差异;该类小鼠经5-氟尿嘧啶(5-FU;125 mg/kg)处理,在化疗前及化疗后第5、10和15天经眼球取血分析其血象变化。Cx43~(-/-)及Cx43~(+/+)小鼠予7.5 Gy(~(60)Co-γ)的致死量照射,剂量率1 Gy/min,照射后6 h分别给予事先准备就序的骨髓细胞,每只3×10~6细胞于尾静脉注入,2周后处死小鼠检测造血是否重建:分离股骨切片后,收集骨髓细胞进行细胞表型分析(选用的单抗为CD45R、Gr-1、CD4、 CD8a、TCRαβ、Mac-1、抗sIgM、TER119、Sca-1及CD117);同时进行体外造血细胞集落实验观察造血细胞的体外增殖能力。结果:本研究通过2种转基因小鼠间杂交和回交,成功获得造血系统选择性Cx43基因敲除小鼠;该类小鼠骨髓及外周血细胞无Cx43表达,参与造血的组织,如肝脏和脾脏中Cx43表达也显著下调(P0.01),而心脏和肾脏的Cx43表达则无影响,小鼠成年后外周血象分析并无明显异常,但应急代偿能力下降,经5-FU处理后,其造血功能恢复显著减缓,处理15 d后,Cx43~(+/+)小鼠造血功能已接近正常水平,而Cx43~(-/-)小鼠仍无明显的恢复迹象,血红蛋白、白细胞及血小板仍处低位,2者差别有统计学显著性(P0.01);体外集落试验也证实Cx43~(-/-)小鼠造血干/祖细胞的增殖能力下降,其CFU-GM或CFU-E集落数均明显少于Cx43~(+/+)小鼠(P0.01),但流式细胞术结果显示,Cx43~(-/-)小鼠骨髓中Lin~-/c-Kit~+/Sca-1~+细胞亚群数量与Cx43~(+/+)小鼠相比差异并无统计学显著性;Cx43~(-/-)小鼠在化疗或移植后其骨髓造血功能重建均延迟,且化疗15 d后骨髓切片及涂片均证实其骨髓中造血细胞增生程度明显降低,脂肪组织显著增多,而且T、B细胞发育也有异常。此外,其外周血中CD4~+CD8~+细胞比例比野生型小鼠增多(P0.05),但CD4~+T细胞显著减少(P0.01),尤其是TCRαβ亚群细胞减少最为明显(P0.01)。同样,Cx43~(-/-)小鼠外周血中CD45R~+sIgM~-细胞亚群比例与野生型小鼠相比显著减少(P0.01)。结论:骨髓中Cx43基因表达在造血干/祖细胞发育(尤其是应急状态时)具重要作用,敲除Cx43基因后造血干/祖细胞增殖减缓,造血及免疫重建功能受损。     

非霍奇金淋巴瘤合并静脉血栓栓塞症患者相关因素分析

目的 探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)合并静脉血栓栓塞症(VTE)患者的临床特征及相关风险因素.方法 选择2016年8月至2019年8月该院血液科收治的NHL患者140例,分析其临床特征及发生VTE的相关风险因素.结果 140例NHL患者中出现VTE 18例(12.8％),经单因素分析,NHL患者的疾病分期、健康状况、血红蛋白(Hb)、D二聚体、合并糖尿病、手术或外伤病史与VTE发生有关,差异有统计学意义(P<0.05).经logistic线性回归分析,疾病分期(Ⅲ～Ⅳ期,OR=7.548,95％CI:1.997～28.534),Hb<100 g/L(OR=4.747,95％CI:1.204～18.715),健康状况[美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分大于或等于3分,OR=2.986,95％CI:1.490～8.046]是NHL患者发生VTE的影响因素.结论 根据NHL患者的临床分期、健康状况及实验室指标等,临床上可早期评估N H L患者发生VTE的风险性,并可以予以适当的用药从而降低VTE的发生率.     

2006～2010年哈尔滨医科大学附属第一医院死亡儿童病例分析

目的:总结并探讨2006～2010年哈尔滨医科大学附属第一医院儿童(<16岁)的死亡原因变化情况和死亡相关因素的特点。方法:对2006～2010年哈尔滨医科大学附属第一医院死亡的193例患儿资料进行回顾,运用统计学方法进行Ridit分析,u检验,c2检验。结果:将0～16岁患儿根据年龄分为5组,对不同年龄段死亡患儿的性别采用Ridit分析,经u检验,提示死亡患儿不同年龄段的性别构成差异无统计学意义(P>0.05)。将2006～2010年死亡患儿按病因分为感染因素、非感染因素与未明诊断3组,经c2检验,提示不同年龄组的疾病病因差异无显著性意义(P>0.05)。结论:近5年来,哈尔滨医科大学附属第一医院死亡儿童疾病构成及死亡原因发生了较为明显的变化。感染性疾病发生相对减少,非感染性疾病发生呈明显上升趋势。我院小儿死亡病因前3位分别是先天性心脏病、意外伤害、呼吸系统感染。7岁～16岁学龄儿童病死率较高,以非感染性因素为主。意外伤害造成的死亡相对集中于7岁～16岁学龄儿童,且高发于农村。     

结核性脑膜炎误诊为病毒性脑膜炎一例报告

病例：患儿，女，13岁。发热，体温38℃左右，不欲进食，呕吐，烦躁，易激怒，消瘦，乏力两个月。到哈市某医院治疗根据患儿临床症状脑膜刺激症，做腰穿脑脊液提示外观清亮，蛋白弱阳性，PPD阴性，诊断为病毒性脑炎，但不排除结核性脑膜炎。患儿到传染病医院诊治，根据腰穿结果，脑脊液提示外观清亮，蛋白＋＋，PPD阴性，脑脊液抗酸染色未查到结核菌，墨汁染色未查到新型隐球菌。因患儿病情重，急诊来我院诊治。     

浅析农村公共卫生服务均等化现状中存在的问题及建议

目的 促进基本公共卫生服务逐步均等化是深化医药卫生体制改革的重点内容.实现基本公共卫生服务均等化的重点在于农村.结合农村工作现状,本文提出了当前农村基本公共卫生服务存在的一些问题,并初步进行了探讨.     

滤泡辅助性T细胞和相关分子在淋系恶性疾病中的变化及其意义

目的：动态分析淋系恶性疾病（MLD）患者外周血滤泡辅助性T细胞（Tfh细胞）变化,探讨其在预后判断中的作用。方法55例MLD患者纳入研究,其中急性淋巴细胞白血病（ALL）9例、非霍奇金淋巴瘤（NHL）30例、多发性骨髓瘤（MM）16例;以10名健康体检者为健康对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4+ CXCR5+细胞（Tfh细胞）占CD4+细胞比例及诱导共刺激分子（ICOS）、程序性死亡蛋白1（PD-1）的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆白细胞介素21（IL-21）浓度。结果 MLD患者治疗前Tfh细胞比例及ICOS、PD-1表达均高于健康对照组（均P＜0.01）,MLD患者中Tfh细胞比例及ICOS、PD-1表达水平由低至高依次为MM组、ALL组、NHL组。化疗第2、4、6个疗程末有效（完全缓解+部分缓解）者Tfh细胞比例及ICOS、PD-1表达水平总体呈下降趋势（P＜0.05）,至第6个疗程末接近甚至低于健康对照组。第2个疗程末疾病进展患者Tfh细胞比例及ICOS、PD-1表达水平接近甚至高于治疗前水平。第6个疗程末获得完全缓解的ALL、NHL、MM患者Tfh细胞比例及ICOS、PD-1表达水平更接近于健康对照组（P＞0.05）,且低于部分缓解者（P＜0.05）。 T细胞型ALL组和NHL组Tfh细胞比例稍高于B细胞型,但差异无统计学意义（P＞0.05）,且均高于健康对照组（P＜0.01）。ALL、NHL、MM患者血浆IL-21浓度[（474.55±33.41）pg／ml、（498.64±68.11）pg／ml、（445.08±36.14）pg／ml]高于健康对照组[（326.56±32.44）pg／ml,均P＜0.01]。 Tfh细胞比例与骨髓中原始淋巴细胞+幼稚淋巴细胞百分比、血清乳酸脱氢酶、国际预后指数、Ann Arbor分期、ISS分期、β2微球蛋白呈正相关（r值分别为0.52、0.32、0.60、0.23、0.76、0.49,均P＜0.05）。结论 ICOS、PD-1和IL-21表达异常所致外周血Tfh细胞过度活化可能参与了MLD的发病过程,动态测定Tfh细胞可用于评价临床疗效和判断预后。 Tfh细胞及相关分子有可能成为MLD潜在的治疗靶点。