miR-29和ZO-1在大鼠血神经屏障中的作用研究

目的:观察重组组织型纤溶酶原激活剂(rt PA)通过miR-29对大鼠外周神经闭锁小带蛋白-1(ZO-1表达水平的影响。方法:健康雌性SD大鼠随机分为对照组(Control)、rt PA组(rt PA)和无催化活性rt PAi组(rt PAi)。3组大鼠分别在坐骨神经旁注射生理盐水、rt PA和rt PAi,2 h后利用real time RT-PCR、Western Blot及免疫荧光方法检测坐骨神经内ZO-1的mRNA和蛋白表达水平变化,并采用real time RT-PCR方法检测坐骨神经miR-29的表达水平。结果:与对照组相比,rt PA组大鼠坐骨神经周围注射rt PA后,ZO-1的mRNA表达下降(P 0. 05),Western Blot发现ZO-1蛋白表达水平下降(P 0. 05),免疫荧光检测同样发现ZO-1表达减少;无催化活性的rt PAi处理大鼠坐骨神经后,神经束膜内ZO-1的mRNA及蛋白水平同样明显下降(P 0. 05);与对照组相比,rt PA和rt PAi处理2 h后大鼠坐骨神经内miR-29表达均明显增高(P 0. 05)。结论:rt PA通过减少神经束膜中ZO-1表达水平,增加神经束膜通透性,其作用不依赖于其对凝血酶原复合物的催化功能,可能通过增加miR-29表达下调ZO-1蛋白表达水平。     

黏附分子cadherin与肝癌生物学特性的关系

肝癌是恶性程度极高的肿瘤,目前对其发生、发展的分子机制尚不清楚．黏附分子cadherin 分子超家族参与机体内许多生物过程,包括调节钙介导的细胞黏附、细胞极性及形态形成, 细胞的聚集和迁移,细胞的识别和信号传导机制,近年来研究发现cadherin分子与肝癌的恶性生物学特征如肿瘤恶性增殖、侵袭及转移特征有密切相关性．如经典的E-cadherin的表达下调与肝癌细胞的高侵袭表型、癌细胞扩散密切相关．非经典的cadherin分子T-cadherin 已发现具有抑制乳腺癌和胶质母细胞瘤增殖及转移的特征,肝癌中T-cadherin表达缺失可能提示与肝癌的恶性生物学特征的相关性． cadherin分子与肝癌的生物学特征的关系的研究进展,可为肝癌的治疗提供新的研究思路．     

黄芪山甲汤治疗慢性前列腺炎62例

<正>慢性前列腺炎具有病因复杂、病情顽固、缠绵难愈、容易复发等特点,其中以气滞血瘀型为多见。笔者近年来采用黄芪山甲汤治疗慢性前列腺炎62例,取得满意疗效,报道如下。     

半枝莲化淤排石汤治疗泌尿系结石的研究

以活血化淤、清热利尿药物组成半枝莲化淤排石汤,治疗泌尿系结石174例,治愈率为72.98%(其中溶石率为23.56%),总有效率为86.78%,并设对照组45例进行对比分析。药理实验结果提示,其作用是多方面的,它可能具有增加输尿管的蠕动、利尿、增加肾动脉血流量等作用,毒性研究证明了本方的安全性。     

柴芩利胆汤治疗慢性胆囊炎68例

目的:观察柴芩利胆汤治疗慢性胆囊炎的疗效。方法:68例慢性胆囊炎患者均有典型的肝郁兼湿热蕴结的症状和体征,治疗给予自拟柴芩利胆汤口服。结果:治疗后根据疗效标准判定,临床治愈33例,好转30例,未愈5例。结论:柴芩利胆汤治疗慢性胆囊炎疗效肯定。     

肾血管外皮细胞瘤切除合并非胰岛细胞瘤性低血糖的麻醉处理一例

患者男,22岁,体质量70 kg,身高174 cm.因“体检发现左肾占位1个月余”于2013年入院.患者一般情况好,体温36.1℃,血压112/73 mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）,脉搏72次/min,ASA分级Ⅰ级.既往史：反复发生不明原因意识不清3个月余,每次发作均在清晨,喂饮糖水后缓解.检测血糖,1.7～2.2 mmol/L.各项常规检查（血、尿常规,生化,心电图,胸部X线片等）除血糖2.7 mmol/L外,余无异常.B超检查提示：（1）左肾下极112mm×73 mm实质性占位病变.（2）脾肿大.（3）胰腺切面形态正常,内未见异常回声,胰管不扩张.MRI检查提示：左肾异常信号,肿瘤性病变可疑,胰腺未见明显异常.SPECT检查意见：双肾动态显像,左肾积水、血流灌注及摄取功能受损、排泄障碍,右肾血流灌注及摄取功能正常.临床诊断：（1）左肾肿瘤.（2）低血糖原因待查.拟全身麻醉下行腹腔镜肾肿瘤根治术.     

人胆囊癌细胞系GBC-SD中侧群细胞的耐药性研究

目的 研究人胆囊细胞系GBC-SD中侧群细胞(side population cells,SP)的耐药特性,并探讨其耐药机制.方法 利用流式细胞术分选SP、非SP细胞,采用MTT检测2种细胞亚群对5种化疗药物吉西他滨、顺铂、5-氟尿嘧啶、表阿霉素、米托蒽醌的药物敏感性;利用流式细胞术检测吉西他滨处理的人胆囊癌细胞系GBC-SD中SP细胞比例的变化,并通过RT-PCR、Western印迹检测SP、非SP细胞亚群中ABCG2 mRNA和蛋白的表达.结果 吉西他滨、顺铂、5-氟尿嘧啶、米托蒽醌以对胆囊癌细胞系GBC-SD的IC50浓度分别作用SP、非SP细胞亚群1 d后,SP细胞的增殖能力高于非SP细胞,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05),而表阿霉素处理水平的两组间差异无统计学意义(P>0.05);人胆囊癌细胞系GBC-SD经过吉西他滨处理3周后,SP细胞的比例显著升高(8.02%±0.13%比0.62%±0.08%,P<0.05),且SP细胞明显高表达ABCG2基因.结论 人胆囊癌细胞系GBC-SD中SP细胞具有类似干细胞的耐药特性,耐药基因ABCG2高表达是其耐药的重要机制.

Abstract：

Objective To investigate the drug resistance of side population cells in human gallbladder cancer cell line GBC-SD and explore its mechanism. Methods Drug sensitivity assays of 5chemotherapeutic agents were performed on side population cells (SP) and non-SP cells of GBC-SD.GBC-SD was cultured and then treated with the chemotherapeutic agent gemcitabine. The frequency of SP by FACS was measured. RT-PCR and Western blotting were used to detect the expression of AB-CG2 in both the SP and the corresponding non-SP subsets. Results After 1 d treatment with 4 chemotherapeutic agents (gemcitabine, cisplatin, 5-fluorouracil and mitoxantrone) in IC50 concentration to GBC-SD cell line, the reproductive ability of SP was higher than that of non-SP (P<0.05). However, statistical significance was not achieved when compared with epirubicin (P>0.05). The percentage of SP in GBC-SD treated with chemotherapeutic agent gemcitabine after 3 weeks was sharply elevated by FACS (8.02% ±0.13% vs 0.62% ±0.08%, P<0.05), and the expression of ABCG2mRNA and protein were increased in SP as compared with non-SP. Conclusion SP from human gallbladder cancer cell line GBC-SD, like stem cell, showed a heighten resistance to drugs. Increased expression of ABCG2 was largely responsible for the multi-drug resistance.     

血神经屏障和Claudin-1蛋白在大鼠慢性神经病理性疼痛中的作用

目的:观察慢性神经病理性疼痛大鼠坐骨神经的血神经屏障(BNB)变化,并探讨紧密连接蛋白Claudin-1在其中的作用。方法:健康雌性SD大鼠分为3组:对照组(Control组)、假手术组(Sham组)和慢性坐骨神经压迫损伤组(CCI组)。对照组不做处理;Sham组仅分离暴露大鼠右侧坐骨神经,不结扎;CCI组暴露大鼠右侧坐骨神经并用丝线结扎。术后1 d,采用伊文斯蓝蛋白染剂(EBA)观察大鼠坐骨神经BNB通透性的变化;免疫荧光染色法观察坐骨神经内的Claudin-1蛋白分布。术前及术后6 h、1 d、7 d和14 d测定各组大鼠后肢机械痛阈值,RT-PCR法测定Claudin-1 m RNA转录水平,Western blot法测定Claudin-1蛋白表达水平。结果:与其他2组相比,CCI组大鼠术后1 d右侧后肢机械痛阈值降低,术后7 d降至最低,并且一直持续到术后14 d(均P0.05);术后1 d,CCI组EBA含量显著增高(P0.05);术后6 h、1 d、7 d和14 d CCI组大鼠坐骨神经内Claudin-1 mRNA转录水平和Claudin-1蛋白表达水平均显著低于其他2组(均P0.05);坐骨神经免疫荧光染色显示,Claudin-1蛋白主要分布于神经内膜和神经束膜,术后1 d,CCI组坐骨神经束膜中Claudin-1蛋白荧光强度明显低于其他2组(均P0.05)。结论:慢性神经病理性疼痛大鼠坐骨神经BNB被破坏,通透性增加,神经内紧密连接蛋白Claudin-1蛋白表达水平减少。     

MiR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达

目的 应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞,检测其miR-590-3p的表达。方法 运用无血清培养基克隆培养ASPC-1、PANC1细胞,检测其单克隆形成、分化及细胞周期、半数抑制浓度(IC50)和表面标记物CD24+、CD44+表达。实时定量PCR法检测细胞miR-590-3p的表达。结果 经无血清培养基培养,(0.94±0.53)％的ASPC-1细胞和(0.57±0.12)％的PANC1细胞能存活,呈克隆球样悬浮生长,并可以在体外连续传代。加入血清后细胞球又重新贴壁生长。ASPC-1细胞球G0/G1期比例和CD24+、C44+、CD24+ CD44+的细胞比例及IC50分别为(75.3±5.4)％、0.96％～2.01％、27.52％～34.47％、0.35％ ～0.44％和(224.37±5.71) μg/ml,均显著高于亲本细胞的(43.7±3.8)％、0.38％～0.42％、17.65％ ～ 18.25％、0.05％～ 0.08％、(11.43±2.10) μg/ml(P值均＜0.05)。PANC1细胞球G0/G1期比例和CD24+、CD44+、CD24 +CD44+的细胞比例及IC50分别为(80.1±4.7)％、5.31％ ～9.84％、72.05％ ～93.06％、4.91％ ～5.21％、(296.58±4.27) μg/ml,均显著高于亲本细胞的(46.1±5.3)％、4.09％～4.97％、47.71％～55.66％、1.48％ ～2.63％、(26.17±3.81) μg/ml(P值均＜0.05)。ASPC-1、PANC1细胞球miR-590-3p表达分别是亲本细胞的4.67和4.52倍。结论 应用无血清培养基可以从ASPC-1、PANC1细胞系中分离出具有干细胞特性的胰腺癌细胞球,其miR-590-3p表达上调,该基因可能是胰腺癌干细胞特性维持的关键基因。     

冷自身抗体伴IgG抗-Jk^b1例

1病例简介 患者,女,32岁。9月3日入我院,患者自诉10余天前出现发热伴有畏寒,体温最高38．3℃,伴头晕,视物模糊,全身乏力,活动后明显,8d前症状加重,在当地医院住院检查血红蛋白为35g／L,并输入了3．5U的红细胞悬液,输后无输血反应。患者入院时神志清,精神疲倦,急病面容,全身皮肤苍白,球结膜、口唇、四肢苍白,重度贫血貌,全身浅表淋巴结触及肿大、压痛,