海洛因对大鼠脾中腺苷脱氨酶、黄嘌呤氧化酶和血尿酸的影响

目的：研究海洛因依赖对大鼠血浆尿酸含量和脾中腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶（XOD）的影响。 方法：剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,50只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组、3 d给药组、9 d给药组、3 d戒断组及8 d戒断组,每组10只。测定各组脾组织中ADA、XOD和血浆中尿酸的含量。 结果：3 d和9 d给药组大鼠血尿酸含量均明显高于对照组（P<0.01）,戒断组均低于9 d给药组,但差异无显著性（P>0.05）。脾中ADA 3 d和9 d给药组均明显高于对照组（P<0.05）, 8 d戒断组与9 d给药组相比明显下降（P<0.05）;脾中XOD 9 d给药组与对照组相比明显升高（P<0.05）,戒断组与9 d给药组比较差异无显著性（P>0.05）,但呈下降趋势。 结论：海洛因给药使脾中ADA、XOD活力升高,引起嘌呤核苷酸分解代谢增强,而且脾细胞核苷酸分解代谢增强是海洛因依赖引起的免疫力下降的重要原因。     

海洛因对雌性大鼠催乳素基因表达的影响

目的:研究海洛因对雌性大鼠垂体催乳素（PRL）基因表达的影响。 方法：50只雌性Wistar大鼠,随机分为5组（每组10只）：对照组、海洛因给药3和9 d组、海洛因给药 9 d后停药3和9 d组;逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测垂体PRL mRNA相对含量,放射免疫分析法(RIA)检测血浆催乳素（PRL）水平。 结果：给药3和9 d组及停药3 d组大鼠垂体PRL mRNA水平显著低于对照组（P<0.01）,停药9 d组PRL mRNA的水平虽低于对照组,但差异无显著性（P>0.05）;与给药9 d组相比,停药3 d组PRL mRNA水平有增高趋势,但差异无显著性（P>0.05）,停药9 d组的PRL mRNA的水平则显著高于给药9 d组（P<0.05）。 给药3和9 d组及停药3和9 d组血浆PRL显著低于对照组（P<0.01）;与给药9 d组比较,停药3 d组的血浆PRL水平仍然较低（P<0.05）,停药9 d组的PRL水平有高于给药9 d组的趋势,但差异无 显著性（P>0.05）。 结论：海洛因使雌性大鼠垂体PRL mRNA表达水平下降,短期停用海洛因其无法恢复到正常水平。     

血管内皮生长因子基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍的治疗作用

目的探讨阴茎海绵体内注射血管内皮生长因子(VEGF)基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍(ED)的治疗作用。方法通过超速离心纯化pcDNA-3.0和pcDNA-VEGF165质粒,选取雄性Wistar大鼠32只,分为4组,每组8只。Ⅰ组,双侧髂内动脉结扎组;Ⅱ组,双侧髂内动脉结扎后阴茎海绵体内注射pcDNA-3.0质粒组;Ⅲ组,双侧髂内动脉结扎后阴茎海绵体内注射注射pcDNA-VEGF165质粒组;Ⅳ组,假手术组。饲养4w后,对4组大鼠注射阿朴吗啡(APO)行电刺激海绵体神经实验(ICP),评价其勃起功能。结果在阿朴吗啡实验中Ⅰ组、Ⅱ组大鼠的勃起次数明显少于Ⅲ组、Ⅳ组(P0.05);大鼠打哈欠次数各组之间无变化(P0.05)。在电刺激海绵体神经实验中Ⅰ组、Ⅱ组ICP增幅明显低于Ⅲ组、Ⅳ组(P0.05)。结论阴茎海绵体内注射VEGF基因对大鼠动脉性ED有一定的治疗作用。     

VEGF基因治疗大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍的机制

目的探讨阴茎海绵体内注射血管内皮生长因子(VEGF)基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍(ED)的治疗机制。方法通过超速离心纯化pcDNA-VEGF165质粒;通过双侧髂内动脉结扎建立动脉性ED大鼠模型;通过大鼠阴茎海绵体内注射质粒进行转基因治疗;通过阿朴吗啡实验和电刺激海绵体神经实验检测大鼠勃起功能;通过RT-PCR和VEGF免疫化学染色检测外源基因的表达;通过电镜检查和FⅧ因子免疫化学染色观察海绵体结构的变化;通过NADPHd染色观察NOS水平的变化。结果在阿扑吗啡实验和电刺激海绵体神经实验中,转基因治疗的ED大鼠的勃起功能得到了一定的恢复,但还没有达到正常水平。转基因治疗后1个月阴茎组织内仍存在外源基因并可表达;组织内血管增多。治疗组的NOS染色强度要强于对照组。结论阴茎海绵体内注射pcDNA-VEGF165质粒,对动脉性ED大鼠有一定的治疗作用,其机制是通过促进血管增生、改善血流灌注和上调NOS表达完成的。     

海洛因对大鼠腺苷脱氨酶和血尿酸影响的研究

关于阿片类作用与核酸代谢变化的关系，国内外报道很少。控制嘌呤核苷酸分解代谢的关键酶有腺苷脱氨酶(adenosine deaminase，ADA)和黄嘌呤氧化酶，ADA占优势地位，故通过检测ADA和血浆尿酸含量，研究海洛因是否影响了机体的核酸代谢，探讨海洛因作用的物质基础。     

大鼠肾移植急性排斥模型中移植肾水通道蛋白-2 mRNA表达的变化

目的 研究水通道蛋白-2(AQP2)mRNA在大鼠肾移植急性排斥模型中移植肾表达的变化及意义.方法 正常大鼠肾脏为正常对照组;Wistar大鼠作为供、受者建立同系基因对照组;SD大鼠为供者、Wistar大鼠为受者建立同种异体移植急性排斥组;SD大鼠为供者、Wistar大鼠为受者,术后给予免疫抑制剂环孢素(CsA)建立同种异体移植免疫抑制组;均为雄性大鼠.RT-PCR半定量检测移植肾AQP2 mRNA在各组中表达的变化.结果 同种异体移植急性排斥组移植肾AQP2 mRNA表达下调,与正常对照组比较有统计学差异(P＜0.05),与同系基因对照组和同种异体移植免疫抑制组比较有统计学差异(P＜0.05).同系基因对照组和同种异体移植免疫抑制组中移植肾AQP2 mRNA表达的变化与正常对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论 AQP2 mRNA的表达在急性排斥时表达下调,可以减少对水的重吸收,同时可以减少集合系统能量消耗,有利于移植肾功能的恢复.     

海洛因对大鼠谷氨酸脱氢酶基因表达的影响

目的:研究海洛因对大鼠谷氨酸脱氢酶(GDH)基因表达的影响。方法:40只成年♂Wistar大鼠随机分为4组:对照组腹腔注射(ip)生理盐水9d;给药3d组ip海洛因3d;给药9d组ip海洛因9d;停药组ip海洛因9d后停药8d。采用生化自动分析系统检测血浆及组织中GDH活性,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测组织中GDHmRNA的含量。结果:血浆中GDH活性在海洛因给药期间逐渐增高,停药8d后仍无明显降低;大脑组织GDH活性在海洛因给药3d、海洛因给药9d及停药8d后均显著低于对照组(P<0·01);肝脏GDH活性在海洛因给药过程中降低(P<0·01),停药8d后恢复到对照组水平;小肠GDH活性在海洛因给药9d后显著高于对照组(P<0·05),停药8d后小肠GDH活性继续升高并明显高于对照组(P<0·01)和海洛因给药9d组(P<0·05)。大脑、肝脏和小肠GDHmRNA含量分别与其GDH活性变化趋势一致。结论:海洛因对大鼠不同组织GDH基因表达影响不同。     

吗啡对大鼠催乳素基因表达的影响

目的 :研究吗啡依赖及戒断对大鼠垂体催乳素 (PRL)基因表达的影响。方法 :核酸分子杂交及放射免疫分析。结果 :吗啡依赖组及戒断组大鼠垂体的PRLmRNA含量降低 ,戒断 2组与对照组之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;吗啡依赖组及戒断组血清PRL水平均高于对照组 ,后者与对照组之间差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :吗啡依赖及戒断显著影响大鼠垂体PRL的基因表达 ,表现为转录功能的下降和可能直接刺激催乳素的合成及分泌     

海洛因对C6细胞增殖细胞核抗原基因表达的影响

目的：检测海洛因对大鼠神经胶质瘤C6细胞的增殖细胞核抗原（PCNA）基因表达的影 响,为探索海洛因成瘾的分子生物学机制提供依据。方法：大鼠神经胶质瘤C6细胞加入浓度为0～100 mg•L^-1的海洛因进行细胞培养,24 h后用MTT法检测海洛因对C6细胞存活率的影响。RT-PCR法检测海洛因作用下C6细胞PCNA mRNA的表达。结果：MTT结果显示海洛因浓度为10、20和100 mg•L^-1时C6细胞存活率分别为90.62%、80.97% 和62.73%,与对照组比较明显下降 (P<0.05)。在转录物水平,浓度为20 mg•L^-1的海洛因作用于C6细胞48 h时,PCNA基因的转录产物PCNA mRNA明显减少,与对照组比值为0.297（P<0.01）。结论：海洛因浓度为20 mg•L^-1时对C6细胞的增殖抑制作用接近30%,可能与海洛因成瘾形成有关。     

一种新的具有纤溶活性的N-V蛋白酶酶学性质分析

目的： 测定N-V蛋白酶的最适反应温度、最适反应pH值及酶促反应动力学常数（Km）,并对其进行蛋白酶分类。 方法 ：利用纤维蛋白平板法测定N-V蛋白酶最适反应温度、最适反应pH值。以L-亮氨酸-p-硝基苯胺酯(Leu-pNA)作为底物,测定N-V蛋白酶的Km值。利用L-反式环氧琥珀酰亮氨酰氨基（4-胍基）丁烷（E64）、苯甲基磺酰氟（PMSF）、1,10-邻菲啰啉、抑肽酶作为抑制剂对N-V蛋白酶的纤溶活性进行抑制作用,确定其蛋白酶分类。结果：N-V蛋白酶最适反应温度为50℃,最适反应pH值为8～9, Km值为1.97×10^-3mol •L^-1 ,PMSF有效抑制N-V蛋白酶的纤溶活性(P<0.01）,而E64、1,10-邻菲啰啉啉、抑肽酶对其活性均无明显抑制作用(P>0.05）。结论： N-V蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶类。