血管内皮生长因子基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍的治疗作用

目的探讨阴茎海绵体内注射血管内皮生长因子(VEGF)基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍(ED)的治疗作用。方法通过超速离心纯化pcDNA-3.0和pcDNA-VEGF165质粒,选取雄性Wistar大鼠32只,分为4组,每组8只。Ⅰ组,双侧髂内动脉结扎组;Ⅱ组,双侧髂内动脉结扎后阴茎海绵体内注射pcDNA-3.0质粒组;Ⅲ组,双侧髂内动脉结扎后阴茎海绵体内注射注射pcDNA-VEGF165质粒组;Ⅳ组,假手术组。饲养4w后,对4组大鼠注射阿朴吗啡(APO)行电刺激海绵体神经实验(ICP),评价其勃起功能。结果在阿朴吗啡实验中Ⅰ组、Ⅱ组大鼠的勃起次数明显少于Ⅲ组、Ⅳ组(P0.05);大鼠打哈欠次数各组之间无变化(P0.05)。在电刺激海绵体神经实验中Ⅰ组、Ⅱ组ICP增幅明显低于Ⅲ组、Ⅳ组(P0.05)。结论阴茎海绵体内注射VEGF基因对大鼠动脉性ED有一定的治疗作用。     

增龄对大鼠阴茎勃起功能的影响

目的　探讨增龄在勃起功能障碍 ( ED)中的作用。方法　应用注射阿朴吗啡和电刺激海绵体神经的方法 ,观察低月龄大鼠与老龄大鼠阴茎勃起情况 ,采用免疫组化方法检测大鼠阴茎组织一氧化氮合酶 ( NOS)的染色情况。结果　注射阿朴吗啡后 ,老龄大鼠阴茎勃起次数要少于低月龄大鼠 ( P<0 .0 5) ;电刺激海绵体神经后 ,老龄组大鼠阴茎海绵体内压增幅与低月龄大鼠相近 ( P>0 .0 5) ,但勃起潜伏期延长 ( P<0 .0 5) ;组织化学染色显示低月龄大鼠阴茎组织 NOS的染色明显强于老龄大鼠。结论　增龄对大鼠阴茎勃起功能有一定的影响 ,主要表现在中枢调节及 NOS水平下降两方面     

三种ED模型小鼠海绵体组织Cx43蛋白表达变化

目的 观察三种阴茎勃起功能障碍(ED)小鼠海绵体组织中连接蛋白(Cx)43表达变化.方法 将125只Wistar大鼠随机分为DM因素组35只、血管因素组31只、神经因素组28只及对照组31只,其中前三组分别通过腹腔注射链脲菌素(STZ)、结扎髂内动脉及游离并切断海绵体神经等方法建立ED模型.各组均于制模后3周进行阿朴吗啡试验,观察大鼠阴茎勃起情况;并分别于8、12、16周分批断颈处死,采用免疫组化法检测阴茎海绵体组织的Cx43.结果 DM因素组、血管因素组及神经因素组勃起比例及次数均明显低于对照组,阴茎海绵体组织Cx43蛋白表达显著低于对照组(P＜0.01),尤以DM因素组为著(P＜0.05).结论 三种ED小鼠海绵体组织中Cx43蛋白表达均下降,尤以DM性ED为著.     

糖尿病ED大鼠阴茎海绵体中血红素加氧酶的表达变化及意义

目的观察糖尿病(DM)勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体组织中血红素加氧酶1、2(HO-1,HO-2)的表达变化,并探讨其临床意义。方法选取40只SD雄性大鼠,随机分为正常对照(NC)组10只和DM组30只。DM组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素建立DM模型,造模8周后,DM大鼠通过皮下注射阿扑吗啡评价勃起功能;未发生ED者为单纯DM组,发生ED者为DM-ED组。采用免疫组化法及Western blot法测定各组阴茎海绵体组织中的HO-1、HO-2。结果 HO-1和HO-2在各组大鼠阴茎海绵体组织中均有表达,主要表达于海绵体平滑肌细胞和血管内皮细胞胞质中。NC组阴茎海绵体组织中HO-1、HO-2相对表达量分别为11.38±1.77、27.69±5.07,单纯DM组分别为28.49±4.74、16.41±2.75,DM-ED组分别为18.02±3.19、7.04±2.94;单纯DM组、DM-ED组HO-1、HO-2相对表达量与NC组比较,P均<0.05;DM-ED组HO-1、HO-2相对表达量与DM组比较,P均<0.05。结论 DM-ED大鼠阴茎海绵体组织中HO-1表达上调,HO-2表达下调,二者可能参与DM所致ED的发生发展。     

大鼠阴茎组织中DDAH1和神经型一氧化氮合酶的变化及其对勃起功能障碍的影响

目的探讨老年大鼠阴茎组织中不对称二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)和神经型一氧化氮合酶(n NOS)的变化对老年性勃起功能障碍(ED)的影响。方法随机抽取3月龄与18月龄大鼠作为青年组与老年组,检测两组大鼠基础阴茎海绵体内压(ICP);电镜观察两组大鼠阴茎海绵体组织细胞形态学差异;采用ELISA方法检测两组大鼠阴茎组织中不对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度;采用Western印迹检测大鼠阴茎组织中DDAH1及n NOS表达水平。结果老年组与青年组基础ICP无明显差异(P0.05),注射罂粟碱后老年组ICP明显低于青年组ICP(P0.05);电镜发现老年组阴茎海绵体组织中内皮下纤维化明显;内皮细胞细胞器减少,线粒体聚集、肿胀明显,细胞核变形、固缩时见。青年组组织内未见明显异常。ELISA发现老年组阴茎海绵体内ADMA浓度明显高于青年组(P0.01)。Western印迹发现老年组阴茎组织中DDAH1与n NOS的表达明显低于青年组(P0.05)。结论增龄对阴茎组织中DDAH1和n NOS的影响是引起老年性勃起功能障碍的重要原因。     

糖尿病性ED大鼠模型建立及阴茎海绵体超微结构变化

目的观察糖尿病（DM）对大鼠勃起功能及阴茎海绵体超微结构的影响,探讨DM引起勃起功能障碍（ED）的机理。方法 24只SPF级SD雄性大鼠随机分为4组,按不同处理因素给予大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ）,分别记录给药后4 d、1周、2周、3周大鼠的体质量、阿朴吗啡（APO）诱导阴茎的勃起次数及空腹血糖值。应用光镜及透射电镜观察各组大鼠阴茎海绵体的形态结构。结果注射60 mg/kg STZ组大鼠体质量较轻、血糖较高。APO诱导阴茎勃起次数组间差异显著,注射60 mg/kg STZ组应用APO后阴茎未勃起的例数较多。DM性ED（DM＆ED）大鼠阴茎海绵体的形态结构改变明显。结论大鼠注射STZ后2周血糖〉7.2 mmol/L及APO诱导未出现阴茎勃起的大鼠可认为是DM＆ED模型;DM引起大鼠阴茎海绵体超微结构明显改变可能是导致ED的重要原因之一。     

硫化氢对老年大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞内一氧化氮合酶含量的影响

目的探讨硫化氢(H2S)对老年大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞内一氧化氮合酶(NOS)及阴茎勃起功能的影响及H2S在阴茎勃起过程中的作用机制。方法 24月龄(老年)雄性Wistar大鼠80只随机分成正常对照组,测试前腹腔内注射生理盐水1 ml/kg,持续1 w;10、20、30μmol/kg硫化氢钠组1 w每日腹腔内注射10、20、30μmol/kg硫氢化钠,持续1 w。注射药物前后评估勃起功能,并测量血液H2S含量,后处死,切取阴茎海绵体组织,研磨匀浆,测量NOS含量。结果随着腹腔内生理浓度硫氢化钠注入量的不断增加,单位时间内阴茎勃起次数逐渐增加(r=0.682,P<0.01),阴茎海绵体内NOS含量逐渐增加(r=0.957,P<0.01)。结论 H2S在勃起功能中起重要作用,生理浓度H2S可通过提高阴茎海绵体内NOS含量改善勃起功能。     

高血压大鼠勃起功能及其阴茎海绵体组织结构变化

目的观察高血压大鼠的勃起功能及阴茎海绵体组织结构的变化,探讨高血压引起勃起功能障碍(ED)的可能原因。方法以16周龄雄性自发性高血压大鼠18只(SHR组)及同系正常血压大鼠10只(WKY组)作为实验对象,测量两组大鼠尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡(APO)记录其阴茎勃起次数;取大鼠根部阴茎海绵体,光镜及透射电镜下观察组织结构变化。结果与WKY组相比,SHR组大鼠阴茎勃起次数明显减少(P<0.01);光镜及电镜下SHR组大鼠阴茎海绵体组织结构改变明显,主要表现为微血管管腔变小或闭塞、平滑肌细胞外基质增多、平滑肌细胞和内皮细胞损伤。结论高血压大鼠勃起功能严重减退,其阴茎海绵体组织结构改变明显,这可能是高血压致勃起功能减退的重要原因。     

老年性勃起功能障碍的临床特点

目的 通过对老年性勃起功能障碍(ED)患者回顾性研究,探讨其发病规律和临床特点.方法 将ED患者分为2组,老年性ED组(49例)和非老年性ED组(425例).统计各组患者年龄、病程、既往病史(糖尿病、高血压、高血脂)以及国际勃起功能指数评分表(IIEF-5)、夜间阴茎涨大试验(NPT)、阴茎海绵体注射试验(ICI)结果.结果 与非老年性ED患者相比,老年性ED患者病程长,同时患有糖尿病、高血压、高血脂的患者比例明显升高(分别为61%、78%、37%).老年性ED患者IIEF-5评分明显降低,患有重度ED比例明显升高.老年性ED患者平均夜间勃起事件明显减少,每次勃起平均时间明显减少,平均阴茎容量峰/基线比率也明显降低.注射前列地尔后,阴茎海绵体动脉收缩期峰值流速(PSV)及阻力指数(RI)明显小于非老年性ED患者,舒张末期流速(EDV)高于非老年性ED患者.结论 老年性ED以器质性病变为主,病程长,程度重,其中尤以血管性ED发病率较高.血管病变导致的阴茎海绵体动脉供血不足和静脉关闭不全是老年性ED发病机制中重要环节.     

吸烟对前列腺增生患者勃起功能及一氧化氮合酶和一氧化氮的影响

目的 探讨吸烟对良性前列腺增生(BPH)患者勃起功能及阴茎海绵体内血浆中一氧化氮(N0)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.方法 选择90例BPH患者,吸烟BPH组51例,不吸烟BPH组39例.另选取体检健康男性40例为正常对照组.采用勃起功能国际问卷表(IIEF-5)对受试者进行调查,分别取阴茎海绵体内血液,采用硝酸还原酶法和分光光度比色法测定血浆中NO含量及NOS活性.结果 与正常对照组比较,吸烟BPH组及不吸烟组勃起功能障碍(ED)发生率明显增高(P＜0.05),IIEF-5评分、NO含量及NOS活性明显减少(P＜0.05).与不吸烟BPH组比较,吸烟BPH组ED发生率明显增高(P＜0.05),IIEF-5评分、NO含量及NOS活性明显减少(P＜0.05).吸烟组IIEF-5评分、NO含量及NOS活性与烟龄及烟量均呈高度负相关(P＜0.01).结论 BPH患者ED发生率较高,阴茎海绵体内血浆中NOS活性降低、NO含量下降可能是BPH致ED的原因之一,吸烟与ED的发生密切相关.     

2型糖尿病大鼠高同型半胱氨酸血症对阴茎海绵体内钙敏感受体的影响

目的观察钙敏感受体(Ca SR)在高同型半胱氨酸(Hcy)血症2型糖尿病(T2DM)大鼠阴茎海绵体内的表达。方法雄性Wistar大鼠50只,随机选10只为正常对照组给予正常饮食,其余40只给予高脂高糖饮食,4 w后按25 mg/kg经尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病(DM)实验模型,选取30只造模成功大鼠随机分成三组:DM模型组,胰岛素治疗组和叶酸治疗组,16 w后,注射阿扑吗啡观察大鼠阴茎勃起次数。断头取血,酶联免疫法测量大鼠血中Hcy含量,同时取大鼠阴茎组织,采用激光共聚焦检测大鼠阴茎海绵体内Ca SR表达情况。结果与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠血Hcy水平明显升高(P0.05),阴茎勃起次数明显减少,大鼠阴茎海绵体组织中Ca SR蛋白的表达明显升高。胰岛素和叶酸治疗后阴茎海绵体内Ca SR蛋白的表达及Hcy水平明显降低(P0.05),阴茎勃起次数明显增加。结论 T2DM高Hcy血症大鼠阴茎组织中Ca SR蛋白表达明显增高,这可能是T2DM大鼠勃起功能障碍的原因之一。     

糖尿病大鼠阴茎海绵体组织氧化损伤的研究

目的观察糖尿病雄性大鼠阴茎海绵体组织中氧化损伤变化以及应用胰岛素对氧化损伤的影响,探讨氧化损伤在糖尿病性勃起功能障碍(ED)发病机制中的作用。方法老年雄性SD大鼠30只,随机分为3组:A组(n=10)为对照组;B组(n=12)为糖尿病无干预组;C组(n=13)为糖尿病胰岛素干预组。采用腹腔注射STZ法制作糖尿病模型并进行筛选。8 w后取大鼠阴茎海绵体组织进行组织匀浆,采用黄嘌呤氧化法测定阴茎海绵体组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性;用TBA法测定丙二醛(MDA)含量;一氧化氮(NO)含量;同时用RT-PCR法检测胞外型SOD基因(SODEX基因)的表达。结果与A组相比,B、C组的SOD活性显著下降,MDA、NO含量均显著升高,SODEX基因的表达显著下降(P<0.05);与B组相比,C组的MDA、NO含量均显著下降,SOD活性显著升高,SODEX基因的表达显著升高(P<0.05)。结论糖尿病雄性大鼠阴茎海绵体组织自由基代谢明显障碍,脂质过氧化产物增加,同时氧自由基清除能力下降;而控制血糖能部分抑制氧化损伤。提示氧化损伤可能在糖尿病性ED的发生发展中起一定作用。本研究为糖尿病性ED的预防和治疗提供新的策略。     

补肾益心片对高血压大鼠性功能及阴茎海绵体的干预研究

目的观察补清结合法中成药补肾益心片对自发性高血压大鼠(SHR)血压及其勃起功能的干预作用。方法将原发性高血压雄性大鼠分为3组,补肾益心片组、缬沙坦组、模型对照组。分别予以补肾益心片、缬沙坦、生理盐水灌胃。治疗4周后,检测阴茎海绵体组织内一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)浓度以及Ang(1-7)的浓度。颈部皮下注射阿扑吗啡(APO)记录阴茎勃起次数以检测大鼠的勃起功能。结果补肾益心片及缬沙坦均可提高阴茎海绵体组织内NO含量,提高阴茎海绵体Ang(1-7)含量,两组之间无统计学意义。补肾益心片组、缬沙坦组治疗后血压都明显降低,与干预前对比有统计学意义。干预后补清结合法中成药补肾益心片组和西药缬沙坦组大鼠阴茎勃起数大幅增加,有统计学意义。结论补肾益心片可以改善SHR的勃起功能,增加高血压大鼠阴茎海绵体NO、Ang(1-7)的含量。     

糖尿病性勃起功能障碍患者阴茎血管形态及血流动力学改变

目的观察糖尿病性勃起功能障碍(ED)患者阴茎血管形态及血流动力学改变,探讨糖尿病性ED的血管性病因。方法应用CDUS检测18例糖尿病性ED及20例非血管性ED患者阴茎海绵体动脉(CA)及其分支血管螺旋动脉(HA)形态及血流动力学参数,比较两组之间的差异。结果糖尿病性ED患者CA血管壁较毛糙,3例一侧CA内可见血栓,且CA的分支血管HA显示多为1级或2级。阴茎海绵体内药物注射(ICI)前后糖尿病性ED患者CA内径增加百分比明显低于非血管性ED组〔(58.29±5.85)%vs(78.54±9.94)%,P<0.01〕;ICI后糖尿病性ED患者CA的PSV、RI亦明显低于非血管性ED组〔PSV(22.23±7.38)vs(44.87±9.45)cm/s,P<0.01;RI:0.89±0.07 vs 1.09±0.09,P<0.01〕,而DD-VV则明显高于非血管性ED组〔(11.03±2.85)vs(3.85±2.28)cm/s,P<0.01〕。结论 CA及其外周HA受损可能是糖尿病性ED患者血管病变的主要因素,而阴茎静脉关闭机制不良可能是其继发病变。     

联合基因治疗小型猪冠状动脉闭塞的实验研究

目的　探讨联合血管内皮生长因子 (VEGF)及促血管生成素 1(Ang 1)基因治疗小型猪冠脉闭塞的疗效。方法　在小型猪冠脉闭塞模型的心肌内注射质粒PCD2 /VEGF和 (或 )PCD2 /Ang 1,检测外源基因在心肌中的表达并观察其生物学作用。结果　逆转录 PCR及免疫组化染色均检测到外源基因的表达。转PCD2 /VEGF和 (或 )PCD2 /Ang 1基因治疗组毛细血管计数及小动脉计数均高于空载质粒对照组 (P <0 0 5 ) ,联合基因治疗组血管计数最高。冠状动脉造影证明联合基因治疗组促进闭塞冠脉侧支循环建立更为有效。结论　心肌内联合注射PCD2 /VEGF及PCD2 /Ang 1基因能够获得外源基因mRNA及蛋白的有效表达 ,与单基因治疗相比联合基因治疗能更有效地促进血管生成及侧支循环的建立。     

超声介导载基因微泡靶向传输血管内皮生长因子促心肌血管新生

目的　探讨超声介导载血管内皮生长因子 16 5 (VEGF165)基因靶向微泡促梗死心肌血管新生的可行性。方法　构建真核表达质粒 pcDNA3 1-/VEGFcDNA165,将其包载于脂质泡中 ,超声辐射下向鼠心肌传输。采用RT PCR、WesternBlot检测mRNA、蛋白表达 ,观察微血管密度评价血管新生效果。结果　 (1)成功构建VEGF165基因 ;(2 )脂质体微泡可包载VEGF165基因 ;(3)超声介导辐射下向心肌靶向传输VEGF165基因 ,实验组基因表达及血管密度高于空白对照组 ,但低于VEGF165基因心肌直接注射。结论　具有心肌显影功能的脂质体载VEGF165基因微泡在超声辐射下可向大鼠梗死心肌靶向传输 ,并产生促血管新生效应。     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体Cx43 mRNA的表达

目的探讨糖尿病性勃起功能障碍（DMED）大鼠阴茎海绵体缝隙连接蛋白43（Cx43）mRNA的表达。方法 W istar大鼠150只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组,每组分为糖尿病（DM）30只,非糖尿病（NDM）20只。DM大鼠腹腔注射链尿菌素（55 mg/kg）建立DM动物模型后,注射阿朴吗啡,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组分别于8、12及16周观察大鼠阴茎勃起情况,筛选DM性ED大鼠模型,测定其阴茎海绵体组织Cx43 mRNA表达。结果 DMED模型成功Ⅰ组23只、Ⅱ组21只、Ⅲ组20只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组NDM大鼠Cx43 mRNA表达量分别为0.845±0.176、0.836±0.120、0.845±0.136,DM大鼠分别为0.493±0.157、0.426±0.164、0.378±0.253,DM大鼠Cx43 mRNA表达与NDM相比差异有统计学意义（P〈0.05）;随DM病程延长,Cx43 mRNA表达明显下降（P〈0.05）。结论 Cx43 mRNA在DMED大鼠海绵体中表达降低,Cx43 mRNA水平下调可能是DMED的发病机制之一。     

阴茎海绵体自行注射前列腺素E1治疗30例糖尿病性阳萎疗效分析

目的观察阴茎海绵体自行注射前列腺素E1治疗糖尿病性阳萎的疗效。方法对30例合并有勃起功能障碍的糖尿病病人，在医生指导下施行自行阴茎海绵体内注射前列腺素E1。结果病人勃起所需适宜剂量为15μg2例，20μg22例，25μg1例，30μg2例，40μg1例，2例注射40μg无有效勃起。勃起持续时间为24～106分钟(50.7士19.5分钟)。不良反应有局部轻度疼痛和不适6例，局部少量出血3例，未发生阴茎长时间持续勃起。结论阴茎海绵体内自行前列腺素E1注射是一项有效的治疗糖尿病性勃起功能障碍的可供选择的治疗方法。     

综合疗法治疗难治性阳痿有效

对于勃起障碍,单独使用对血管作用的药物给阴茎海绵体内注射无效的患者,增用阻滞剂可能有效。研究者给38例(41～75岁,平均年龄62岁)曾进行阴茎海绵体内注射前列地尔不同剂量,甚少或无效的患者,每天给口服甲磺酸多沙唑嚷,逐渐增加到4mg而不用再注射药物。其后,只在打算过性生活时,注射前列地尔到阴茎海绵体内。在接受注射治疗前平均勃起功能指数是30;单独注射治疗该指数是36;而在联合治疗4、8和12周后,该指数分别是49、46和52。     

血管内皮生长因子基因治疗小型猪冠状动脉闭塞的实验研究

目的探讨应用血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗动物实验性冠状动脉闭塞的疗效.方法中国实验用小型猪19只,结扎左冠状动脉前降支中远段,心肌内多点注射自行构建的pcD2/hVEGF121真核表达质粒.应用逆转录聚合酶链反应、VEGF免疫组化染色、Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色等方法检测VEGF基因在心肌中的表达及其生物学作用,用常规冠状动脉造影观察VEGF基因治疗对闭塞冠脉侧支循环建立的作用.结果转移VEGF基因后,小型猪心肌内VEGF mRNA高表达,VEGF免疫组化染色提示VEGF蛋白表达水平升高;Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色显示心肌毛细血管增加;冠状动脉造影证明VEGF基因治疗能够促进闭塞冠脉侧支循环的建立.结论心肌内注射pcD2/hVEGF121真核表达质粒能够获得VEGF mRNA和蛋白的有效表达,促进心肌毛细血管增生,促进侧支循环建立.