RNAi干扰黑色素瘤细胞Notch1基因表达对小鼠肿瘤免疫机制影响

目的 探讨靶向Notch1的siRNA抑制恶性黑色素瘤Notch通路对小鼠机体抗肿瘤免疫的影响.方法 采用RNA干扰小鼠黑色素瘤细胞B16F1 Notch1基因的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测转染前后肿瘤细胞分泌免疫抑制因子转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的变化.制作小鼠黑色素瘤模型,在肿瘤生长过程中瘤内注射si-Notch1,记录肿瘤生长情况,手术切除肿瘤组织,流式细胞术检测肿瘤组织中gp100抗原特异性CD8+T细胞的比例,ELISA法比较各组肿瘤匀浆上清中IFN-γ和免疫抑制因子TGF-β的含量变化,免疫组化法分析肿瘤组织中FoxP3+Treg细胞的数量.结果 siNotch1转染后,成功下调了黑色素瘤细胞Notch1基因的表达.ELISA实验结果显示,转染后siNotch1组、siNC组和mock组细胞上清TGF-β分泌量分别为(0.665±0.242)、(1.413±0.153)和(1.623±0.111) ng/mL,F=40.237,P=0.000 48;VEGF的分泌量分别为(399.9±79.42)、(397.3±107.0)和(388.6±136.8) ρg/mL,差异无统计学意义,F=0.015,P=0.986;IL-10的分泌量为(38.93±12.45) 、(41.84±9.85)和(45.81±9.36) ρg/mL,差异无统计学意义,F=0.525,P＝0.604.siNotch1瘤内注射之后,小鼠肿瘤生长明显减慢.流式细胞术检测结果显示,siNotch1组、siNC组和mock组gp100抗原特异性CD8+T细胞的比例分别为(5.54±1.68)％、(2.43±1.09)％和(2.57±1.16)％,F＝12.643,P=0.000 25.免疫组化结果显示,FoxP3平均阳性细胞数分别为23.13±6.75、38.63±10.68和41.75±12.10,F=7.802,P=0.003.肿瘤组织匀浆ELISA结果显示,siNotch1组、siNC组和mock组IFN-γ的浓度分别为(10.047±1.775)、(4.121±1.379)和(3.698±1.253)ng/mL,F＝45.660,P＝0.000 23;TGF-β的浓度分别为(3.738±1.203)、(7.663±2.114)和(7.545±2.080)ng/mL,F=11.687,P=0.000 39.结论 siNotch1抑制黑色素瘤细胞Notch通路后,可以降低其分泌TGF-β的含量,从而降低其对淋巴细胞的抑制作用,增加肿瘤组织中gp100抗原特异性CD8+T细胞的浸润,促进IFN-γ的分泌,降低Treg细胞的比例,增强机体抗肿瘤免疫功能.     

多西紫杉醇单周与三周方案对转移性乳腺癌的有效性及安全性的meta分析

目的比较分析多西紫杉醇单周与三周方案对转移性乳腺癌的有效性与安全性.方法对Pubmed、Co-chranelibrary、EMbased、CNKI、ASCO会议摘要以及WHO官网进行相关文献搜索,检索截止时间为2013年3月11日.纳入有关多西紫杉醇单周与三周方案安全性与有效性的随机对照试验.结果共6个研究包括5篇全文和一篇会议摘要纳入meta分析.多西紫杉醇单周方案与三周方案相比,无论在ORR、PFS、OS等方面均无统计学差异.在安全性分析中,单周方案3～4级中性粒细胞减少性发热的发生率显著低于三周方案（纳入3篇文献,共356例患者,OR0.16,95%CI0.06～0.43,P〈0.001）.同样中性粒细胞减少以及神经毒性的发生率单周方案也显著降低.结论多西紫杉醇单周化疗方案对转移性乳腺癌患者的有效性与三周方案相同,但鉴于单周方案的不良反应发生率低、耐受性好,老年患者或-般情况较差的患者更适合单周方案化疗.     

不同临床期别宫颈鳞癌患者血清差异蛋白质的表达

目的寻找不同临床期别宫颈鳞癌患者之间的血清差异蛋白质。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪（SELDI-TOF-MS）和弱阳离子结合芯片（CM10）,检测宫颈鳞癌患者可手术治疗组（Ⅰa期、Ⅰb期、Ⅱa期）与不能手术治疗组（Ⅱb期、Ⅲa期、Ⅲb期、Ⅳ期）的血清蛋白质、以及血清鳞状细胞癌抗原（SCCA）≥4.5ng/ml组与SCCA〈1.5ng/ml组之间有分类意义的差异蛋白质。结果相对分子质量在1002～18369范围内,共有43种蛋白质质谱峰值有显著性差异（P〈0.05）,其中质荷比（M/Z）为11523.83、11679.13、5841.076、7971.04、16109.71、15932.17的蛋白质,在宫颈癌可手术治疗组的含量显著低于不能手术治疗组（P〈0.01）。SCCA≥4.5ng/ml组与SCCA〈1.5ng/ml组之间获得相同的差异蛋白质。以单个差异蛋白质11679.13（M/Z）作为分类变量建立宫颈癌手术组与不能手术组的诊断树模型,分类正确率为93.18%（41/44）。结论宫颈癌早中期可手术治疗组与中晚期不能手术治疗组血清中存在差异蛋白质,SCCA组≥4.5ng/ml与SCCA〈1.5ng/ml组之间存在相同的差异蛋白质;以单个差异蛋白质作为分类变量建立的诊断树模型,给临床分期提供重要的参考。     

医院基因检测集中化管理的探讨

目的精准医疗大趋势下,分析医院基因检测医疗活动的特点和问题,探讨规范医院基因检测的意义和价值,以及在医院精准医学学科发展过程中,将基因检测集中化管理的必要性。方法回顾性分析目前医院基因检测的特点,以及临床应用中存在的问题,提出医院基因检测集中化管理的可行性方案。结果医院内基因检测属于医院重要的医疗活动,作为医院重要的医疗活动,具有明显的临床价值,医患认可度高。用发展的眼光看趋势,医院内集中化管理基因检测更安全、管理成本更低,减少不必要的流程和环节,可建立起基因数据库做科研,综合性价比更高,同时,也是医院规划精准医学领域长远发展的基础。结论医院通过将院内的基因检测活动进行集中化管理,使基因检测临床实践既合理又合规,减少"医疗纠纷"风险,拓展了医院新技术、新业务,为构建精准医学系统工程打下根基,最终,有利于该医院在精准医学新科技浪潮中取得领先地位。     

rAAV/HCV核心抗原基因转染树突状细胞的实验研究

目的:研究rAAV/丙型肝炎病毒核心抗原基因[hepatitis C virus(HCV)core gene]转染树突状细胞(dendritic cell,DC)的可行性。方法:构建重组质粒AAV(d16-95)/Core p5(简称rAAV/Core),并以pSH3包装系统制备该病毒。分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),以rAAV/Core病毒转染DC前体细胞(基因转染组),采用巨噬细胞集落刺激因子、白介素-4、肿瘤坏死因子-α诱导成熟。3d后,收集部分DC,以流式细胞仪检测rAAV/Core转染效率及HCV核心抗原在DC中的表达情况。7d后,收集细胞,PCR/Southern blot分析rAAV/Core DNA在DC染色体的整合情况。显微镜下观察DC形态,流式细胞仪检测DC表面分子标志CD1a、CD40、CD80、CD83、CD86的表达情况。结果:rAAV/Core成功转染DC,质粒DNA整合到DC染色体上,HCV核心抗原基因在DC内表达,DC成熟不受病毒转染影响,具有典型DC外观并高表达特异的成熟DC表面标志。结论:rAAV/Core转染和制备DC的成功为丙型病毒性肝炎的DC免疫治疗打下实验室基...     

131I-美罗华治疗难治性复发性B细胞淋巴瘤9例

非霍奇金淋巴瘤 (ＮＨＬ)对常规放化疗较敏感 ,但易出现复发及耐药。单克隆抗体美罗华 (Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ)的成功应用成为淋巴瘤治疗领域最重要的进展 ,但仍有部分无效。将单抗与细胞毒性放射性核素连接 ,利用单抗特异性靶向作用和放射性核素所产生的β射线的内照射效应 ,可大大提高治疗的反应率和缓解率。自 2 0 0 1年 10月以来 ,我们应用13 1Ｉ 美罗华治疗难治性复发性Ｂ细胞淋巴瘤 9例 ,取得理想的临床疗效 ,现报道如下。1　资料与方法1 1　临床资料　男性 6例 ,女性 3例 ,年龄 4 5～ 5 9岁 ,平均 5 3岁。 9例均为经多次放化疗后复发的…     

HER2表达与乳腺癌预后的相关性研究

为了研究乳腺癌HER2表达与预后的关系 ,探讨其作为乳腺癌预后指标的可行性 ,采用免疫组化法 (IHC)检测 185例乳腺癌标本的HER2表达 ,并随访其生存时间。 185例中失访 6 5例 ;12 0例有 10年预后随访资料 ,其中死亡 2 8例。所有检测标本的HER2的阳性率为 37 3%;不同HER2表达级别生存曲线比较差异有统计学意义 ,各生存曲线之间比较差异有统计学意义 ,P值均小于 0 0 1;HER2阴性者 40和 6 0个月生存率比高表达患者高 ;HER2过度表达与生存期呈负相关(P <0 0 5 )。结果说明 ,乳腺癌患者HER2高表达预示生存时间缩短 ,HER2是乳腺癌预后不良的一项独立指标。     

短期化疗对兔腹主动脉顺应性的影响

目的 比较短期化疗前后兔腹主动脉顺应性的变化，了解化疗药物对血管力学特性的影响。方法将15只新西兰兔随机等分为5组，其中4组接受1周期化疗（卡铂100mg／m^2，第1、3、5天；异环磷酰胺1500mg／m^2，第1、3、5天；足叶乙贰100mg／m^2，第l～3天），另1组为对照组。分别测量各组兔腹主动脉比顺应性（化疗组分为化疗后第2、7、14、21天进行观察）。结果短期化疗前后兔腹主动脉顺应性显著变化，化疗后第14天下降最明显，而第21天则基本恢复。结论短期化疗能够降低兔腹主动脉比顺应性，降低的程度与化疗后时间相关，并具有可逆行性。     

口服康赛宁的临床观察

对32例进行口服康赛宁用药的肿瘤病人作了初步观察,用药后1月复查,发现大部分病人病情稳定,无任何不良反应及器官毒性反应,口服使用安全。     

治疗性手术对中晚期消化系肿瘤患者细胞免疫功能的影响

1材料和方法1．1临床资料中晚期消化系肿瘤患者24例，男17例，女7例；年龄27－67岁，平均47.4岁。肝癌10例，大肠癌10例，胃癌4例。术后患者13例，男9例，女4例；年龄27—67岁，平均43．6岁；其中肝癌3例，大肠癌7例，胃癌3例。在术前和术后第2周取外周血。对照组为健康人共11人。1．2主要试剂和方法CD系列单克隆抗体和碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物（APAAP）购于军事医学科学院。淋巴细胞分离液为上海试剂二厂产品。IL－2标准品由本室提供。C57／J‘鼠由南方医院动物室提供。MTT为Sigma公司产品。T细胞亚群和IL－ZR检测’］：AP…