CD147抗体对破骨细胞中基质金属蛋白酶活性影响的体外研究

目的:建立人破骨细胞(Osteoclast,OCs)体外诱导分化模型,研究CD147单克隆抗体对OCs分化过程中基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases 9,MMP-9)和基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinases 2,MMP-2)表达及活性的影响。方法:通过采集健康成年志愿者外周血所分离的单个核细胞贴壁培养,应用NF-κB配体激活因子(Receptor or Activator ofNF-KB Ligand,RANKL)与巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导单个核细胞向OCs分化。本实验分为抗体组(RANKL+M-CSF+CD147单克隆抗体)与对照组(RANKL+M-CSF)。抗酒石酸酸性磷酸酶染色(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)与骨吸收实验检测鉴定OCs分化及活性情况,Real-Time PCR技术检测CD147、MMP-9和MMP-2 mRNA在破骨前体细胞(Osteoclast precursor cells,OPCs)中表达情况,明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP-9、MMP-2酶蛋白的活性变化情况。结果:①对照组经TRAP染色和骨吸收实验检测到破骨样细胞形成并具有骨吸收功能,而抗体组OCs分化及活性均受到抑制;②在24、48小时时相点上抗体组CD147、MMP-2及MMP-9 mRNA的相对表达量均低于相应的对照组(P<0.05),且MMP-2、MMP-9 mRNA的相对表达量与CD147 mRNA的表达量呈正相关。③明胶酶谱检测细胞培养上清,可见在24、48小时两时相点上抗体组OCs细胞中MMP-2、MMP-9酶原及活性酶的酶解量均较相应对照组明显降低(P<0.05)。结论:CD147单克隆抗体可以抑制OCs分化成熟过程中MMP-9及MMP-2的表达与活性;CD147对MMP-2、MMP-9活性的调节,可能是其对OCs活化调节的机制之一。     

单核细胞趋化蛋白-1在恶性骨肿瘤中高表达

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)在人转移性骨肿瘤、恶性原发性骨肿瘤、良性骨肿瘤组织中差异性表达及其意义。方法 2008年12月至2010年9月期间,收集转移性骨肿瘤15例、原发性恶性骨肿瘤15例、良性骨肿瘤15例,总共45例骨肿瘤标本。半定量RT-PCR检测各组MCP-1 mRNA的表达水平。应用免疫组织化学S-P法检测MCP-1蛋白的表达水平、Image-Pro Plus(IPP)分析标本中阳性细胞的累积光密度值和阳性表达面积。结果转移性骨肿瘤组MCP-1 mRNA相对表达量(0.862±0.042)高于恶性原发组(0.612±0.051)和良性组(0.171±0.021)(P<0.05)。转移性骨肿瘤组织中MCP-1免疫组化累积光密度(4 532.12±190.02)和阳性面积[(513.32±89.08)μm2]均高于原发性恶性骨肿瘤组[(2 592.11±120.21)、(308.34±79.33)μm2]和良性骨肿瘤组[(551.22±79.12)、(115.91±32.68)μm2],且其在原发恶性组中的表达水平也高于良性组(P<0.05)。结论 MCP-1在恶性骨肿瘤中高表达,在转移性骨肿瘤表达更显著。     

药品带量采购试点医院运行成效

目的探索落实“4+7”城市药品带量集中采购指标任务的科学管控方法,确保各项考核指标完成。方法通过确定“分步管控、逐渐推进”的工作思路,按“探索期、管控期、攻坚期和维持期”科学推进试点的工作方法,结合信息化手段,确保完成“4+7”城市药品带量集中采购指标任务。结果通过探索出的具体管控方法和信息化管控技术,实现“4+7”药品考核指标全部达标。结论所探索的关于落实“4+7”城市药品带量集中采购指标任务的具体管控方法,可以确保完成考核指标,可供试点城市和医疗机构借鉴。     

全信息化实名就医体系的设计与实践

分析了非实名就医存在的医疗安全、医保监管、公共卫生、社会稳定等医疗信息安全风险,通过强化预约渠道分类管控,上线临时身份证明自助办理系统,改造临床医护工作站等,建立信息技术条件下的患者身份验证体系。认为全信息化实名就医体系增强了数据安全质量,规避了非实名就医风险。     

CD147对体外破骨细胞分化成熟的影响

目的建立破骨细胞(osteoclasts,OCs)体外分化成熟的模型,研究CD147对OCs分化成熟的影响。方法从外周血分离单个核细胞贴壁培养,使用破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-κβligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)诱导OCs生成。实验分为对照组、诱导组(RANKL+M-CSF)及阻断组(RANKL+M-CSF+CD147Ab),应用免疫荧光染色和流式细胞术检测CD147在破骨前体细胞(osteo-clast precursor cells,OPCs)的表达;抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察OCs的分化成熟情况及Real-time PCR技术检测CD147及TRAP mRNA在OPCs中的表达变化。结果①CD147分子在OPCs细胞膜上表达。②流式细胞术测得细胞膜表面平均荧光强度对照组(159.55±1.65)、诱导24 h组(171.18±3.46)、诱导48 h组(1...     

一种富含多糖的关节软骨组织总RNA提取方法初探

目的 探索一种适合富含蛋白多糖的关节软骨组织总RNA提取方法.方法 用一步法、Trizol法、plant RNAout法和一步法结合plant RNAout法4种方法提取了兔膝关节软骨组织的总RNA,对各种方法进行比较分析,并以获得总RNA为模板,用RT-PCR的方法对Ⅱ型胶原蛋白进行了扩增.结果 一步法、Trizol法、plant RNAout法获得的总RNA均含有蛋白多糖污染或DNA污染,不能满足实验需要,用一步法结合plant RNAout法提取的总RNA纯度高、完整性和稳定性好,成功逆转录合成双链cDNA.结论 一步法结合plant RNAout法适合关节软骨组织小量、高质量的总RNA的提取.     

缩短急性缺血性脑卒中患者DRT时间

成立多学科协作团队，针对急性缺血性脑卒中患者到院至血管再通时间长开展活动。通过实地调查明确了时间耗费情况，通过原因解析明确了问题真因，针对性制定整合干预措施并执行，分别为运用人工智能技术、创新知情同意模式、构建血管再通方案。通过改进，使急性缺血性脑卒中患者到院至血管再通中位时间由177分钟缩短至113分钟，使更多患者得到了有效救治，提高了患者生活质量     

CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9分泌的影响

目的 建立体外破骨细胞(osteoclasts,OCs)诱导分化模型,研究CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases 9,MMP-9)合成与分泌的影响.方法 采用健康成...