Identification of novel epithelial ovarian cancer biomarkers by cross-laboratory microarray analysis

The purpose of this study was to pool information in epithelial ovarian cancer by combining studies using Affymetrix expression microarray datasets made at different laboratories to identify novel biomarkers.Epithelial microarray expression information across laboratories was screened and combined after preprocessing raw microarray data,then ANOVA and unpaired T test statistical analysis was performed for identifying differentially expressed genes(DEGs),followed by clustering and pathway analysis for these ...     

2009~2018年国家自然科学基金对儿科学研究资助情况回顾与展望

目的 对国家自然科学基金委员会立项资助的儿科研究课题进行回顾整理与数据分析,以了解学科重点支持领域和研究方向、热点的变化。方法 以中国国家自然科学基金数据库为基础,对2009~2018年儿科领域研究课题进行筛选,并对资助力度和研究方向变化进行分析。结果 2009~2018年国家自然科学基金委员会共资助1 017项儿科领域课题,其中面上项目485项（47.69%）,青年基金426项（41.89%）,地区项目73项（7.18%）,重点项目16项（1.57%）,优青项目6项（0.59%）,海外项目7项（0.69%）,其他项目4项（0.39%）。资助经费总额从2009年的842万元增加至2018年的6 625万元,增幅近7倍之多。以生殖系统/围产期医学/新生儿、神经系统和精神疾病、循环系统为一级学科代码申请立项的课题获资助力度最大。结论 近10年来国家自然科学基金委员会对儿科研究的资助力度持续增加,以面上项目和青年基金为主;研究获资助项目申请方向以新生儿、神经系统和精神、循环系统疾病为主。     

妊娠期糖尿病与膳食的关系

目的:研究妊娠晚期母亲总热卡摄入量及三大营养物质与妊娠期糖尿病的相关性及其在妊娠期糖尿病的发生发展中所起的作用,为制定预防、预测和干预妊娠期糖尿病的发生和发展方案,改善母婴结局提供科学依据。方法:采用前瞻性、观察性研究方法,应用标准化的程序和规范对妊娠28～32周在昆明医学院第一附属医院接受产检的全部孕妇进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)与膳食问卷调查。记录孕妇在行OGTT时连续3天的热卡摄入量以及碳水化合物、蛋白质和脂肪各自的摄入量,同时测量并记录孕妇的人口统计学参数。结果:①GDM组平均每天总碳水化合物供能百分数显著低于对照组。②在控制相关混淆因素后,平均每天总能量摄入与OGTT0h血糖值显著正相关;平均每天总蛋白质供能百分数与OGTT2h血糖值显著正相关;平均每天总碳水化合物供能百分数与OGTT2h血糖值显著负相关。结论:①孕期的膳食总热卡和三大营养物质及其结构比例与GDM的发生发展有关。②妊娠期科学合理的饮食指导能够降低不均衡饮食诱发GDM的风险,进而从整体上降低GDM的发生率。     

人乳头状瘤病毒18型阳性肿瘤疫苗的构建及体外活性鉴定

目的: 制备人乳头状瘤病毒（human papilloma virus, HPV）18型阳性的肿瘤疫苗，并观察其体外活性。方法:利用昆虫杆状病毒(简称Bac to Bac)表达系统，将HPV18L1基因重组入穿梭质粒pFastBacHtb，构建HPV18 L1Htb，通过转座反应,将目的基因片段重组入杆状病毒基因     

人乳头状瘤病毒16型多肽疫苗的制备及体内外效应观察

目的 探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型多肽疫苗的制备,并观察HPV16多肽疫苗的体内外效应.方法 (1)针对抗原加工相关转运子(TAP)设计HPV16 E7蛋白的主要组织相容性复合物Ⅰ类分子(MHC-I)的抗原结合表位,利用生物信息学分析平台筛选出一致性较高、特异性及亲和力较强的HPV16 E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗用于以下研究,本研究共筛选出3段多肽,分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pc.(2)C57BL/6小鼠注射鼠肺上皮细胞株TC-1细胞(为鼠源性的HPV16阳性的肿瘤细胞株)后,采用等额抽取的随机方法分为5组,ETPa+二核苷胞嘧啶(CpG)、E7Pb+CpG、E7Pc+CpG[均为实验组,分别加入终浓度为50μg/ml的E7Pa、E7Pb、E7Pc和终浓度为12 mg/L的刀豆蛋白(ConA)]、CpG(为阳性对照,加入终浓度为12 mg/L 的Con A)和空白对照组(不做任何处理).采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组作用不同时间后小鼠脾T淋巴细胞的体外增殖效应,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测小鼠脾T淋巴细胞在不同效靶比下的体外细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性,实时荧光定量RT-PER技术检测小鼠肿瘤组织中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2的表达水平,通过定期测量比较各组小鼠接种HPV16多肽疫苗后体内肿瘤体积的变化.结果 (1)本研究筛选出了一致性较高、特异性及亲和力较强的3段HPV16 E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗,分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pc.(2)MTT比色法检测显示,在接种疫苗24、48、72、96 h后,以E7Pa+CpG组的增殖效应最明显,其细胞增殖率分别为(131±32)%、(302±15)%、(552±28)%、(731±24)%,明显高于空白对照组的(72±15)%、(120±57)%、(176±41)%、(288±29)%(P<0.01);E7Pb+CpG、ETPc+CpG、CpG组的细胞增殖率也均明显高于空白对照组(P<0.05);但E7Pb+CpG、E7Pc+CpG、CpG组间比较,差异则无统计学意义(P>0.05).LDH释放法榆测显示,效靶比为100:1时,E7Pa+CpG、E7Pb+CpG、E7Pc+CpG、CpG和空白对照组CTL 活性分别为(85.9±3.0)%、(55.9±2.5)%、(60.2±1.5)%、(41.0±1.7)%和(4.1±1.0)%,E7Pa+CpG组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);E7Pb+CpG、E7Pc+CpG、CpG组分别与空白对照组比较,差异也有统计学意义(P<0.05);但E7Pb+CpG、E7Pc+CpG、CpG组间比较,差异则无统计学意义(P>0.05).在肿瘤组织及外周血中,小鼠IFN-γ、IL-2的表达水平,E7Pa+CpG组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);E7Pb+CpG、E7Pc+CpG和CpG组分别与空白对照组比较,差异也均有统计学意义(P<0.05);但E7Pb+CpG、E7Pc+CpG、CpG组问比较,差异则无统计学意义(P>0.05).小鼠体内的肿瘤体积,各实验组肿瘤生长均明显被抑制,接种后第60大,E7Pa+CpG组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);E7Pb+CpG、E7Pc+CpG和CpG组分别与空白对照组比较,差异也均有统计学意义(P<0.05);但 E7Pb+CpG、E7Pc+CpG、CpG组间比较,差异则无统计学意义(P>0.05).结论 在动物模型中,针对TAP筛选的HPV16 E7多肽联合CpG制备的HPV16多肽疫苗,可以有效治疗HPV16 E7阳性的肿瘤.     

水通道蛋白1在宫颈病变中的表达及意义

目的:检测宫颈病变组织中水通道蛋白1的表达,探讨该蛋白在宫颈癌形成和演进进程中的意义。方法:用免疫组织化学SP法检测83例石蜡包埋宫颈组织中水通道蛋白1的表达,结合临床病理分型分析其表达的意义。结果:水通道蛋白1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌组织中的阳性率分别为4.0%,33.3%和74.2%,3组样本中水通道蛋白1阳性率的差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌病理学分级1+2级和3级相比,差异有统计学意义(P<0.01)。水通道蛋白1表达阳性率与CIN的分级,与宫颈癌临床分期、组织学分型和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:水通道蛋白1在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中表达升高,可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要作用。     

妊娠期糖尿病的发生率及其危险因素的研究(摘要)

目的 研究妊娠期糖尿病(geslational diabetes mellitus,GDM)在本地区的发生率,探讨母亲人13统计学参数及某些临床指标与GDM的关系,以期建立本地区妊娠妇女发生GDM的高危评分体系,改善母婴结局,为临床干预提供理论依据.方法 对1 004例孕妇进行GDM的流行病学调查.GDM的诊断参照1998年WHO GDM诊断标准,同期将109名GDM孕妇与218名血糖正常的孕妇按年龄接近(±1岁)、产次/民族相同、检查孕周接近(±1周)、孕次接近(±1次)的标准按病例:对照=1:2的比例配对后比较两组身高、腿长、腿长比身高(leg to height ratio,LHR)、坐高、躯干比身高(trunk to height ratio,THR)、孕前体重指数(body mass index,BMI)、首诊至口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)时的体重净增、孕28～30周OGTT的血糖值、OGTT时的BMI/血红蛋白(hemoglobin,Hb)/血小板/红细胞压积/腰臀比,分析这些因素与GDM发生的相关性及各自的危险程度.结果 (1)本地区2003年8月至2004年11月GDM的期间罹患率为11.01%(109/990);(2)GDM组年龄、坐高、THR、OGTY时的BMI、首诊至OGTT时的体重净增、OGTY0 h/2 h的血糖值、Hb显著高于对照组;而身高、腿长、LHR显著低于对照组;(3)用4分位数转换后腿长、LHR、坐高、THR、首诊至OGTT时的体重净增、Hb各区间GDM发生率有显著统计学差异;(4)腿长短于70 cm、LHR小于0.44、首诊至OGTT时体重净增大于14.5 kg、孕28～30周Hb高于123 cm/dL是GDM发生的独立危险因素.结论 (1)本地区GDM期间罹患率为11.01%,与既往对同种族人群采用同种诊断标准的研究结果一致;(2)孕妇身材与GDM发生相关,腿长短于70 cm,腿长与身高比率小于0.44是GDM发生独立危险因素;(3)孕期体重增长过快,首诊至OGTT时体重净增大于14.5 kg,以及孕28～30周Hb高于123 mg/dL是GDM发生的独立危险因素,提示营养过剩或不合理的饮食结构与GDM密切相关.     

妊娠期糖尿病的发生率及其危险因素的研究

目的 研究妊娠期糖尿病(geslational diabetes mellitus,GDM)在本地区的发生率,探讨母亲人13统计学参数及某些临床指标与GDM的关系,以期建立本地区妊娠妇女发生GDM的高危评分体系,改善母婴结局,为临床干预提供理论依据.方法 对1 004例孕妇进行GDM的流行病学调查.GDM的诊断参照1998年WHO GDM诊断标准,同期将109名GDM孕妇与218名血糖正常的孕妇按年龄接近(±1岁)、产次/民族相同、检查孕周接近(±1周)、孕次接近(±1次)的标准按病例对照=12的比例配对后比较两组身高、腿长、腿长比身高(leg to height ratio,LHR)、坐高、躯干比身高(trunk to height ratio,THR)、孕前体重指数(body mass index,BMI)、首诊至口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)时的体重净增、孕28～30周OGTT的血糖值、OGTT时的BMI/血红蛋白(hemoglobin,Hb)/血小板/红细胞压积/腰臀比,分析这些因素与GDM发生的相关性及各自的危险程度.结果 (1)本地区2003年8月至2004年11月GDM的期间罹患率为11.01%(109/990);(2)GDM组年龄、坐高、THR、OGTY时的BMI、首诊至OGTT时的体重净增、OGTY0 h/2 h的血糖值、Hb显著高于对照组;而身高、腿长、LHR显著低于对照组;(3)用4分位数转换后腿长、LHR、坐高、THR、首诊至OGTT时的体重净增、Hb各区间GDM发生率有显著统计学差异;(4)腿长短于70 cm、LHR小于0.44、首诊至OGTT时体重净增大于14.5 kg、孕28～30周Hb高于123 cm/dL是GDM发生的独立危险因素.结论 (1)本地区GDM期间罹患率为11.01%,与既往对同种族人群采用同种诊断标准的研究结果一致;(2)孕妇身材与GDM发生相关,腿长短于70 cm,腿长与身高比率小于0.44是GDM发生独立危险因素;(3)孕期体重增长过快,首诊至OGTT时体重净增大于14.5 kg,以及孕28～30周Hb高于123 mg/dL是GDM发生的独立危险因素,提示营养过剩或不合理的饮食结构与GDM密切相关.     

grp78真核表达载体构建及其稳定转染HeLa细胞系建立

目的 构建人grp78基因真核表达载体,并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系.方法 用RT-PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区,将PCR产物克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/grp78并测序鉴定.用构建成功的pcDNA3.1(+)/grp...