丝棉木种子化学成分及其抗肿瘤活性

目的 研究丝棉木Euonymus maackii Rupr.种子的化学成分及其抗肿瘤活性.方法 丝棉木种子95%乙醇提取物乙酸乙酯部位采用硅胶、D101、反相HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.MTT法测定其抗肿瘤活性.结果 从中分离得到10个化合物,分别鉴定为1β-甲基正丁酰氧基-2β-苯甲酰氧基-4α-羟基-6α-呋喃酰氧基-9β,12-二乙酰氧基-β-二氢沉香呋喃(1)、6α,9β,12-三乙酰氧基-1β,2β,8β-三苯甲酰氧基-β-二氢沉香呋喃(2)、6α,9β,12-三乙酰氧基-1β,8β-二苯甲酰氧基-2β-正己酰氧基-β-二氢沉香呋喃(3)、6α,9β,12-三乙酰氧基-1β,8β-二苯甲酰氧基-2β-正辛酰氧基-β-二氢沉香呋喃(4)、6α,9β,12-三乙酰氧基-1β,8β-二苯甲酰氧基-2β-正癸酰氧基-β-二氢沉香呋喃(5)、卫矛羰碱(6)、6α,12-二乙酸基-1β,9α-二乙酸(β-呋喃羧氧基)-4α-羟基-2β-2-甲基丁酯-β-二氢沉香呋喃(7)、6α,9β,12-三乙酰氧基-1β,8β-二苯甲酰氧基-2β-羟基-β-二氢沉香呋喃(8)、6α,12-二乙酸基-1β,9 α-二乙酸(β-呋喃羧氧基)-4α-羟基-1β-2-甲基丁酯-β-二氢沉香呋喃(9)、6α,9β,12-四乙酰氧基-1β,8β-二苯甲酰氧基-β-二氢沉香呋喃(10).化合物6对Hela细胞有明显的抑制作用,IC50为9.76 μg/mL.结论 化合物1为新化合物.化合物6有一定的抗肿瘤活性.     

川桑中桑皮素的提取工艺优化

目的：探讨川桑中桑皮素的最佳提取工艺。方法：以桑皮素含量为指标,利用4 因素3 水平L9（34）正交试验,分析乙醇浓度、提取时间、溶媒倍数、提取次数对桑皮素提取效率的影响。HPLC 法测定桑皮素含量：YMCPack ODS-A 色谱柱（5 μm,4.6 mm×250 mm）;流动相为甲醇- 水（80：20）;柱温25 ℃;流速1.0 mL·min-1;检测波长268 nm。结果：最佳提取工艺：提取前提取溶剂浸泡3 h,回流提取3 次,每次提取时间均为0.5 h,提取溶媒倍数均为20 倍。最优提取条件下测得川桑中桑皮素含量为1.510 mg·g-1。结论：乙醇浓度、溶媒倍数、提取次数对桑皮素提取效率均有显著影响,提取时间无显著影响。     

HPLC 法同时测定丝棉木中2 种成分含量

目的：建立同时测定丝棉木中卫矛羰碱（compound 1）和6α,12- 二乙酸基-1β,9α- 二乙酸（β- 呋喃甲酸酯基）-4α- 羰基-2β-2- 甲基丁酯-β- 二氢沉香呋喃（compound 2）含量的高效液相色谱（HPLC）法,测定丝棉木叶、种子和茎中这2 种成分的含量。方法：石油醚提取,挥干石油醚,甲醇溶解,HPLC 法检测。Syncronis C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇- 水（72∶28）,流速1.0 mL·min-1,紫外检测波长为254 nm,柱温25℃。结果：compound 1 和compound 2 的线性范围分别为0.17~2.72 mg·mL-1 （r1=0.999 7）和0.10~1.60 mg·mL-1 （r2=0.999 5）;检出限分别为10.3 μg·mL-1、13.8 μg·mL-1;平均加样回收率分别为96.1%~110.7%、99.6%~103.5%。丝棉木叶中compound 1 含量范围0.02~0.03 mg·g-1,compound 2 未检出;种子中compound 1 和compound 2 含量范围分别为1.64~3.06 mg·g-1、0.53~1.41 mg·g-1;茎中compound 1 和compound 2 均未检出。结论：建立的高效液相色谱法简便、快捷、稳定、准确,可用于测定丝棉木中2 种成分含量。同一株丝棉木的叶、种子、茎中2 种化合物含量不同;不同株丝棉木的相同部位2 种成分含量差异显著。     

平地木化学成分及含量分析

目的：研究平地木的化学成分,测定平地木中化学成分的含量。方法：利用硅胶、D101 大孔吸附树脂、C18等色谱方法分离,制备色谱仪纯制,用质谱（mass spectrometry,MS）、紫外光谱（ultraviolet and visible spectrum,UV）、红外图谱（infrared spectroscopy,IR）、核磁共振谱（nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR）等波谱方法鉴定其分子结构。以自制的化合物 2 单体为对照品,用高效液相色谱法（ high performance liquid chromatography,HPLC）测定平地中化合物2 的含量。结果：从平地木中发现四种化合物,分别为2- 甲基-5-［10′（顺） - 十五烯基］ - 间苯二酚（1）,2- 甲基-5-［8′（顺）- 十三烯基］- 间苯二酚（2）,2- 甲基-5- 十三烷基间苯二酚（3）,2- 甲基-5- 十五烷基间苯二酚（4）。平地木根、茎、叶中化合物2 的含量分别为16.79 mg·g^-1、19.39 mg·g^-1 和24.59 mg·g^-1。结论：化合物1 为新化合物,化合物3 和化合物4 为首次从平地木中发现。     

桑皮素对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨桑皮素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制及其凋亡诱导作用。方法用10、15、20μmol/L桑皮素作用Hela细胞24 h后,在扫描电镜、透射电镜及倒置显微镜下观察细胞形态学变化;利用MTT法检测桑皮素对Hela细胞的增殖的影响;应用Hoechst单染实验检测Hela细胞的凋亡情况;采用qRT⁃PCR和Western blot检测Bax、Bcl⁃2 mRNA及蛋白的表达。结果桑皮素(2.5、5、7.5、10、15、20、25μmol/L)处理Hela细胞24、48 h,能明显的抑制Hela细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性。桑皮素(10、15、20μmol/L)处理Hela细胞24 h,细胞呈现早期凋亡。与0μmol/L桑皮素组比较,桑皮素(10、15、20μmol/L)能显著上调Bax mRNA及蛋白表达(P<0.05),下调Bcl⁃2 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。结论桑皮素通过上调Bax表达和下调Bcl⁃2表达,从而诱导Hela细胞发生凋亡。     

桑皮素对人前列腺癌Du145细胞的抑制作用

目的:为探讨桑皮素对Du145细胞的增殖抑制及其诱导凋亡的影响。方法:用5、10和15μmol/L的桑皮素作用于Du145细胞24 h后,在倒置显微镜及透射电镜下观察细胞形态学变化;利用CCK-8法来检测桑皮素对Du145细胞的增殖的影响;应用流式细胞术和DNA fragmentation实验检测Du145细胞的凋亡情况;采用Western blot技术检测Gli1和VEGF蛋白的表达变化。结果:发现桑皮素能够抑制Du145细胞的生长,并诱导Du145细胞发生凋亡甚至死亡,作用24h后IC50=16.5μmol/L;与对照组相比,细胞凋亡率显著升高,当作用浓度≥15μmol/L后细胞晚期凋亡明显增多;随着桑皮素作用浓度的增加,Gli1和VEGF蛋白表达量明显下降。结论:桑皮素诱导Du145细胞的凋亡,并降低了Hh信号通路中Gli1和VEGF因子的表达。     

黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞治疗帕金森病的新思路

帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种黑质神经元发生损伤坏死的中枢神经退行性疾病。现在以药物治疗为主要手段,现有药物主要作用在关键信号靶点以缓解病情,但未能彻底修复变性神经元。近几年细胞治疗技术逐渐渗入到临床试验,已然成为社会焦点。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）是一种成体多能干细胞,其自我增殖和多向分化能力已被公认。BMSCs 可以应用于PD 中以探索更加有效的治疗策略。黄芪甲苷是中药黄芪的特征成分,具有抗炎,抗氧化以及抗凋亡等活性作用。另外黄芪甲苷对神经干细胞具有保护作用,研究亦发现黄芪甲苷在PD 模型中发挥保护神经作用。该文就BMSCs 治疗PD 现状和黄芪甲苷对PD 治疗作用的研究进展作一综述,以此为基础提出了黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞治疗帕金森病的新思路。