口腔细菌终末代谢酸的反相梯度高效液相色谱法分析条件研究

目的:探讨测定口腔细菌终末代谢酸的反相梯度高效液相色谱法最佳分析条件。方法:采用高效液相色谱技术梯度洗脱程序,流速110~210 mlPmin,检测波长217 nm,流动相为60% 012 molPL磷酸盐甲醇溶液pH218,对常见的细菌终末代谢酸进行不同培养基、pH值、温度、萃取液、沉淀剂等分析条件进行研究。结果:口腔细菌在牛心脑浸液(BHI)培养液中经48 h厌氧培养,上清液在pH 117的酸度下用乙醚提取可得到理想的色谱分析结果。结论:该方法可推广应用于细菌终末代谢酸鉴定。     

日本血吸虫SIEA26-28kDa的抗雌虫生殖免疫作用--HGPRT是否是主要的靶抗原

目的观察日本血吸虫SIEA26—28kDa抗原的抗雌虫生殖作用。方法用AcA柱层析纯化日本血吸虫早期胚卵中的SIEA和SIEA26—28kDa成分。并以此纯化产物免疫BALB／c小鼠。将小鼠分为三组，分别用SIEA、SIEA26—28kDa和免疫佐剂免疫动物，然后进行尾蚴攻击感染。46天后剖杀动物，冲虫，然后作虫荷测定及虫卵分类计数。结果SIEA26—28kDa免疫组雌虫子宫内减卵率为54．8％。与对照组比较有极显著性差异；该实验组动物肝脏和小肠组织内的虫卵数比对照组分别降低了48.07％和77.41％，且以成熟虫卵数的下降较为显著，分别降低了83．6％和93．3％；粪卵数的下降幅度最为显著，达87．26％。结论SIEA26—28kDa可作为一种抗卵胚发育及抗雌虫生殖的候选抗原分子。     

复方庆大霉素滴眼剂的配制及应用

复方庆大霉素滴眼剂是我院自制的制剂,其主要成份为庆大霉素和地塞米松,经两年来共治疗200例取得满意效果,现介绍如下。1 处方庆大霉素1.5g,地塞米松0.125g,氯化钠7.37g,对羟基苯甲酸乙酯0.3g,注射用水加至1000ml。     

致弱尾蚴免疫血清与日本血吸虫不同发育阶段抗原免疫反应性的研究

目的　通过比较分析日本血吸虫不同发育阶段抗原的异同 ,并以致弱尾蚴免疫血清识别不同发育阶段抗原 ,筛选具有保护性免疫作用的抗原分子。方法　分离制备日本血吸虫未成熟虫卵、成熟虫卵、尾蚴、雄性成虫、雌性成虫等不同发育阶段的抗原 ;采用ELISA分别测定正常尾蚴感染兔血清、紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清抗原的抗体水平 ;通过SDS PAGE电泳和免疫印迹技术 ,分析正常尾蚴感染血清与紫外线照射致弱尾蚴免疫兔血清对不同发育阶段的免疫反应性。结果与结论　SDS-PAGE结果显示未成熟虫卵抗原、成熟虫卵抗原、尾蚴抗原、雄性成虫抗原、雌性成虫抗原蛋白之间互有异同。间接ELISA试验显示致弱尾蚴免疫血清同样能诱导宿主产生高滴度的抗体水平。致弱尾蚴免疫血清共筛选出 2 3种具免疫学活性的抗原分子 ,分子量分别为 :2 4 .5kDa、2 8kDa、36kDa、4 3kDa、4 4kDa、4 8kDa、5 4kDa、5 8.5kDa、6 0kDa、6 2kDa、6 6kDa、6 8kDa、70kDa、75kDa、79kDa、85kDa、87kDa、91kDa、95kDa、97kDa、10 5kDa、10 8kDa、110kDa。其中未成熟虫卵和成熟虫卵抗原各占 11种 ,尾蚴抗原分子 4种 ,雄性成虫抗原分子 3种 ,雌性成虫抗原分子 6种 ,提示这些抗原分子可能为抗日本血吸虫病疫苗候选分子的重要靶标     

日本血吸虫pcDNA3/SjCWL01核酸疫苗的构建及其对小鼠免疫效果观察

目的构建日本血吸虫pcDNA3/SjCWL01核酸疫苗并进行免疫保护效果观察,评价其作为疫苗的潜能。方法将日本血吸虫基因SjCWL01亚克隆入真核表达载体pcDNA3,构建目的基因真核表达质粒,将pcDNA3/SjCWL01质粒转化大肠杆菌DH5α,大量制备DNA疫苗并免疫小鼠3次,间隔2w,末次免疫后2w,用ELISA法检测免疫鼠血清特异性抗体效价,日本血吸虫尾蚴进行腹部皮肤攻击感染,感染后45d剖杀冲虫,分别计算减虫率,每克肝、粪卵减少率。结果重组DNA疫苗(pcDNA3/SjCWL01)与对照组比较,虫荷、每克肝卵、每克粪卵数分别下降了27.6%,39.5%,45.9%。结论表明pcD-NA3/SjCWL01疫苗可诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。     

日本血吸虫真核表达质粒pcDNA3/HGPRT的构建及序列测定

目的应用基因工程技术,对日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guaninephosphoribosyltransferase,HGPRT)进行亚克隆,试图构建真核重组DNA质粒pcDNA3-HGPRT。方法通过筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,克隆HGPRT基因片段,然后将目的片段亚克隆入真核表达载体pcDNA3。结果成功构建了真核重组DNA质粒pcDNA3-HGPRT,为进一步研究HGPRT的功能奠定了基础。     

各种碳水化合物口腔清除率及乳酸产量的研究

目的　观察进食各种碳水化合物后 ,12 0min内唾液乳酸和葡萄糖的变化 ,为龋病的预防和口腔宣教提供依据。方法　采用高效液相色谱技术和Roche葡萄糖自动测定技术对人体摄入六种食物后口腔内酸产量和食物清除率的变化进行观察。结果　 30min后乳酸量为 :葡萄干 >巧克力 >方糖 >果冻 >面包 >土豆片。 12 0min后顺序明显改变为 :土豆片 >果冻 >方糖 >巧克力 >面包 >葡萄干。结论　食物的“粘性”对在口腔内产酸的滞留时间有很大的影响 ,含淀粉量越大 ,滞留时间越长。     

67例老年心、脑血管病患者拔牙体会

在过去的临床实践和理论学习中 ,将患有心脑血管疾病的患者多列为拔牙禁忌。我们在做好充分准备情况下有选择地为 67例老年心脑血管病患者做了拔牙术 ,均收到较好效果。1　临床资料本组男 43例 ,女 2 4例 ,年龄 5 8～ 84岁 ,平均 74 6岁 ;其中二尖瓣狭窄关闭不全、主动脉瓣关闭不全 1例 ,风湿性心肌炎 3例 ,肺心病 6例 ,冠心病 (陈旧性心梗 ) 2 2例 ,高血压心脏病 4例 ,脑梗死后遗症 2 3例 ,高血压Ⅱ期 8例。本组有 6例为住院患者 ,1例风心病、主动脉瓣关闭不全 ,二尖瓣狭窄关闭不全 ,住院期间在内科医生协助及心电监护下实行手术。 2例冠心…