缺锌抑制体外培养大鼠成骨细胞的增殖及分化

为了研究缺锌对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化的影响,从大鼠颅骨分离出成骨细胞,并于ＤＭＥＭ培养基中进行传代培养。锌特异性络合剂ＴＰＥＮ络合掉培养基中的锌建立细胞体外培养的缺锌模型。采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法确定成骨细胞在不同时点ＤＮＡ的合成状况,同时应用流式细胞仪进行细胞周期的分析;采用组织学方法观察细胞骨架的变化、３Ｈ－脯氨酸掺入法确定胶原蛋白的合成;采用酶动力学和放免方法分别测定碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。结果表明,缺锌组成骨细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入量在各个时点明显低于对照组,细胞被阻滞于细胞周期中Ｇ２／Ｍ期,这与细胞骨架受损密切相关。缺锌组胶原蛋白合成、骨钙素含量及碱性磷酸酶活性明显低于对照组。但缺锌补锌组的各个指标与对照组相比无统计学差异。因此,缺锌能够抑制体外培养大鼠成骨细胞的增殖和分化。     

孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ca~(2+)-ATP酶和Na~+、K~+-ATP酶活性

为探索同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的方法。采用孔雀绿比色法测定磷以反映酶活性。结果显示：Ｃａ２＋浓度以及成骨细胞传代培养的代数是影响酶活性的重要因素。Ｃａ２＋有助于提高ＡＴＰａｓｅ活性。Ｃａ２＋浓度为４０μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＴＰａｓｅ活性较高。细胞传代越多，膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性越低。成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ。结论：孔雀绿比色法同步测定大鼠成骨细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性，方法简便、灵敏、可靠。     

2型糖尿病患者红细胞胞浆钙调素活性变化的研究

目的 对２型糖尿病患者红细胞胞浆中可溶性钙调素（ＣａＭ）的活性及其影响因素进行观察。方法 研究对象为７０例２型糖尿病住院患者,其中４６例单用口服降糖药（ＯＨＡ）,磺脲类治疗３２例,双胍类治疗２０例,拜诏苹治疗４例;２４例使用胰岛素（Ｉｎｓ＿、Ｉｎｓ＋ＯＨＡ治疗３周以上。红细胞胞浆可溶性ＣａＭ用纯化ＰＤＥ法测定。结果 （１）２型糖尿病患者红细胞胞冻中可溶性ＣａＭ活性明显低于正常对照组（Ｐ〈０．０５）     

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞胞浆信号传递的影响

目的　胃癌可异位分泌绒毛膜促性腺激素 (hCG) ,且与胃癌的恶性程度及转移有关。探讨hCG对人胃腺癌细胞胞浆信号传递的影响。方法　分别用非同位素检测试剂盒、蛇毒磷酸二酯酶法、3 H cAMP放射免疫法 ,观察hCG对胃腺癌SGC 790 1细胞胞浆内蛋白激酶 (PKC)、钙调素 (CaM )活性及cAMP含量的影响情况。结果　hCG对胞浆PKC活性仅有轻微的刺激作用 ,即当hCG的浓度达10 -6mol/L时 ,细胞内PKC活性与对照相比仅增加了 2倍左右 ;hCG可明显使胞浆内cAMP含量及CaM活性增加 ,当hCG的浓度从 10 -11mol/L增加到 10 -6mol/L时 ,胞内cAMP的水平从 (2 .1± 0 .2 5 )pmol/mg蛋白增至 (9.5 2± 0 .6 4 ) pmol/mg蛋白 (P <0 .0 1) ,而CaM含量由 (11.2± 2 .7)μg/mg蛋白增加到 (2 9.3± 3.4 2 ) μg/mg蛋白 (P <0 .0 1) ,与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 1)。 结论　hCG作用于胃腺癌细胞后可能主要通过激活腺苷酸环化酶 (AC) /cAMP信号传递途径而起作用 ,同时Ca2 + /CaM可能亦参与了其信号传递机制。     

孔雀绿比色法同步测定红细胞溶血液中Ca~（2＋）－ATP酶和Na~＋、K~＋－

用孔雀绿比色法可测出０．１μｇ磷，重现性好，变异系数为２．０３％，回收率为９４．４％～１０３．４％，显色稳定，操作简便。红细胞膜Ｃａ￣（２＋）－ＡＴＰ酶和Ｎａ￣＋、Ｋ￣＋－ＡＴＰ酶经低渗皂素溶血后，在Ｃａ￣（２＋）、ＥＧＴＡ或哇巴因的存在下，水解ＡＴＰ释出的无机磷，用孔雀绿法可分别测出其酶活性。     

肝细胞膜钠泵活性变化在胆红素钙结石成石过程中的作用

目的 探讨肝细胞膜钠泵（Na^ -K^ -ATPase)活性变化在胆红素钙结石成石程中的作用。方法 采用胆红素钙结石兔模型进行研究，对照组28只，胆道不全梗阻组（BO组）36只，胆道不全梗阻加感染组（BOI）组39只，各组再按术后处死时间3d、7d、14d及20d时相分组。动态测定各组各时相肝细胞膜钠泵活性、肝细胞钙及胆汁中胆汁酸含量。结果 BO组及BOI组肝细胞膜钠泵活性及胆汁中胆汁酸含量进行性下降，肝细胞钙含量呈进行性增多，与对照组相比差异有显著性意义（P＜0．01），但BOI组上述变化较BO组明显（P＜0．05）。结论 胆红素钙结石成石成过程中存在肝细胞膜钠泵活性的进行性下降。钠泵活性下降引起肝细胞钙超负荷及胆汁中胆汁酸含量下降，从而促进成石。细菌感染加重上述变化，使结石形成增多。     

豆类膳食降血脂的研究

1973年我们对成都地区30岁以上正常人的血脂进行了调查,发现高脂血症的发生率为11%,个别单位高达25%。高血脂是冠心病的易患因素之一。采取积极措施以降低血脂水平,对于予防高脂血症发展成为冠心病具有重大意义。为了摸索一种既符合我国人民的生活习惯,又可在基层推广的降血脂的膳食疗法,我们于1975年底至1977年春,对川棉一厂和川医两个单位的高血脂对象,采取适量豆类的膳食疗法,进行了一年多的动态观察。现将初步结果报告如下。     

高脂血症及冠心病患者糖、脂代谢的研究——Ⅳ.糖餐后血浆3′,5′—环腺苷酸含量的改变及其与血浆胰岛素的关系

本文对18例正常人、60例无症状高脂血症及42例冠心病患者口服100克葡萄糖后血浆cAMP含量的变化及其与血浆胰岛素的关系进行了研究。结果发现,高脂血症及冠心病患者糖餐后胰岛素升高幅度大于正常组,且峰值后延,但餐后cAMP降低较少,且回升较快,冠心病患者餐后30分钟cAMP先短暂升高后才开始降低。其中Ⅱa型患者餐后cAMP面积及空腹cAMP水平均接近或高于正常组,Ⅱb型及Ⅳ型患者则低于正常组。并对结果进行了讨论。     

慢性缺氧大鼠肺组织磷酸二酯酶活性的研究

目的 探讨磷酸二酯酶（PDE）在缺氧性肺动脉高压发病中的作用。方法 40只wistar大鼠随机分为四组,分别为正常对照组,缺氧1、2、3周组。采用Thompson法及火焰原子吸收分光光度法分别测定大鼠肺组织PDE活性及肺组织总Ca~(2 )含量。结果 缺氧1、2、3周均能引起大鼠平均肺动脉压（mPAP）及肺血阻力（PVR）增高,心输出量降低。缺氧大鼠肺组织Ca~(2 )含量及PDE活性较正常对照组增高。缺氧2周、3周组大鼠肺组织PDE活性与正常对照组比较有显著性差异（P<0.05）。但缺氧1周组大鼠肺组织PDE活性与正常对照组比较差异无统计学意义。结论 慢性缺氧时,肺组织PDE活性增加,通过促进环核苷酸的降解,影响细胞内Ca~(2 )的水平,参与缺氧性肺动脉高压的发病。     

前列腺素E2、环磷酸腺苷在胆红素钙结石形成中的作用

目的探讨前列腺素E 2、环酸酸腺苷在胆红素钙结石形成过程中的作用.方法采用肖氏兔胆红素钙结石模型进行研究,对照组7只,胆道不全梗阻组(BO)36只,胆道不全梗阻加感染组(BOI)39只,实验组再按术后处死时间3天、7天、14天、20天时相分组.动态测定各组各时相肝组织前列腺素E 2(PGE 2)、环磷酸腺苷(cAMP)含量,观察肝细胞及胆汁糖蛋白变化情况.结果实验组肝组织前列腺素E 2、cAMP及肝细胞糖蛋白均较对照组升高有差异(P<0.05),胆汁糖蛋白增多.BOI组上述改变明显于BO组有差异(P<0.05),PGE 2升高与cAMP升高呈正相关(P<0.05).结论胆红素钙结石形成过程中存在肝组织PGE 2升高通过cAMP表达增强引起肝细胞糖蛋白合成增多促进成石这一途径.细菌感染可能通过产生更多的PGE 2,而使结石形成增多.