西宁地区儿童急性呼吸道感染病毒病原学检测分析

目的:探讨西宁市儿童常见呼吸道病毒感染的病原学特点和分布特征。方法:采集141例急性呼吸道感染住院患儿的咽拭子标本,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行合胞病毒(RSV),流感病毒A、B型(IFV A、B),副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型(PIVⅠ、Ⅱ、Ⅲ),腺病毒(ADV),冠状病毒(HCoV)OC43/HKU1、229E/NL63,博卡病毒(HBoV),偏肺病毒(hMPV)检测。结果:从141份鼻咽拭子样本中检测出呼吸道病毒阳性22例,阳性率为15.6%。检出4种呼吸道病毒,其构成比分别为ADV 45.5%、PIVⅡ26.1%、HCoV-229E/NL63 17.4%、IFV A 13.0%。不同性别间患儿呼吸道病毒阳性率无统计学差异(P>0.05)。<6个月组阳性率最低(6.3%),3～6岁年龄组阳性率最高(29.2%)。结论:西宁地区急性呼吸道感染病毒病原检出率低于全国水平,ADV为西宁地区急性呼吸道感染的首位病毒病原体,HCoV-229E/NL63是该地区急性呼吸道感染的病原之一。     

2009—2010年青海省新甲型H1N1流感流行特征分析北大核心

目的分析2009—2010年新甲型H1N1流感在青海省的流行情况。方法收集"中国流感监测信息系统"中青海省报告的甲型H1N1流感病原学监测数据和全国第6次人口普查人口数据资料,采用Excel 2003软件建立数据库进行统计分析。结果全省确诊甲型H1N1流感2 034例,发病高峰在2009年9—10月。西宁市标化发病率为78.48例/10万,为全省各地最高。男性甲型H1N1流感发病率高于女性,差异有统计学意义(χ2=1 190.9150,P<0.0001)。在控制了性别因素的影响后,甲型H1N1流感发病率随年龄增加而降低,差异有统计学意义(χ2=36.5890,P<0.0001)。结论青海省甲型H1N1流感发病高峰在2009年9月份出现,较往年普通季节性流感提前,病例主要集中在西宁地区,发病率男性较女性高并随年龄增加而降低。     

青海省2011-2012年乙型流感病毒HA1基因特性研究

目的 了解2011-2012年青海省乙型流感病毒HA1基因变异情况。方法 随机选择2011-2012年流感病原监测中分离到的乙型流感毒株,提取病毒RNA,通过RT-PCR法扩增病毒HA1基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,采用DNA Star 5.0 MegAlign和MEGA4.0生物软件对测序结果进行分析处理,推导出氨基酸序列并进行基因特性分析。结果 12株Victoria系乙流感病毒HA1区域核苷酸序列与2009-2011年WHO推荐疫苗株B/Brisbane/60/2008同源性为88.6%~95.7%,氨基酸替换数在2~5个,所有分离株均在1个相同的氨基酸位点发生了相同的替换,部分分离株在320位减少了一个糖基化位点。5株Yamagata系乙型流感病毒HA1区域核苷酸序列与2011-2012年WHO推荐疫苗株B/Wisconsin/01/2010HA1区相比较同源性为97.7%~99.3%,氨基酸替换数在2-3个,所有分离株均在2个相同的氨基酸位点发生了相同的替换(N116K,D196N),在196位增加了一个糖基化位点。结论 青海省2011-2012年乙型流感病毒HA1基因特性正在逐渐发生变异,但尚未形成抗原漂移,今后在流感监测工作中要加强流感病原学的监测,及时发现新的乙型流感病毒变异株。     

小鼠阴道黏膜HSV-2感染细胞凋亡与Fas Bcl-2的关系

目的探讨单纯疱疹病毒2型(herpes simp lex virus type 2,HSV-2)直接感染诱导小鼠阴道黏膜的细胞凋亡情况与Fas,Bc l-2蛋白水平的关系。方法建立HSV-2阴道感染小鼠模型。用TUNEL染色研究HSV-2诱导阴道上皮细胞凋亡,检测Fas,Bc l-2蛋白的水平,分析其与细胞凋亡的相关关系。结果22份标本有凋亡细胞阳性表达,并同时伴有炎症及坏死。Fas蛋白阳性率高(24/24),Bc l-2蛋白阳性率低(2/24)。结论HSV-2直接感染小鼠阴道后可同时诱导阴道上皮细胞凋亡及炎症坏死,Fas蛋白呈高水平,与凋亡细胞指数呈正相关(r=0.9660,P<0.05),提示Fas对HSV-2诱导的黏膜细胞凋亡起上调作用。     

青海省2006年流感局部爆发流行中的病原体检测

目的：分析上呼吸道疾病局部爆发流行中流感病毒感染的检测方法及意义。方法：采用试剂盒现场快速检测（ELISA法）标本中的流感病毒抗原。标本运输至实验室,接种到狗肾传代细胞（MD-CK）进行病毒分离,血凝及血凝抑制试验鉴定毒株型别。结果：快速检测阳性率12%,病毒分离阳性率73.7%。结论：病毒分离在流感病毒的检测中具有敏感性好的优点,但快速抗原检测在现场诊断中也值得采用。     

青海省流感病毒病原学监测及H3亚型血凝素基因变异研究

目的 监测青海省2007～2008年度季节性流感病毒型与亚型分布,了解2007～2008年度部分A/H3N2分离株血凝素(HA)基因变异情况.方法 采集监测哨点医院流感样病例的鼻咽双拭子标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2007～2008年度部分H3亚型流感病毒进行HA基因测序,分析HA基因变异情况.结果 2007～2008年度在哨点医院送检标本中共分离到144株流感病毒,其中124株为A/H3N2,B型20株,型与亚型有明显分布强弱特征.H3亚型HA序列分析,青海省6株分离株与2008、2009年部分省份分离株及江西同期分离株接近,与WHO 2008～2009年度疫苗推荐株相近.结论 WHO推荐的2006～2007年度疫苗株A/Hiroshima/52/2005滞后于在我省流行的流感病毒毒株.     

青海省西宁地区甲型H1N1流感抗体水平的调查

目的 了解西宁地区普通人群甲型H1N1流感病毒抗体水平,为科学评估和防控疫情提供参考依据.方法 2009年12月～2010年4月连续5个月,随机选择在医院就诊和血站献血的人员2132人,采集静脉血进行甲型H1H1流感血清抗体水平检测和分析.结果 调查期间人群总体阳性率为38.18％,GMT水平为1∶24.35.疫苗接种人群的阳性率和GMT水平为89.71％和1∶51.75,明显高于未接种疫苗人群的33.57％和1∶22.76.非疫苗免疫人群中,6～24岁年龄组抗体阳性率和GMT水平最高(45.29％～50.25％,1∶27.8～1∶31.86),3岁以下、60岁及以上年龄组最低(21.62％～22.45％,1∶18.31～1∶19.84).随着时间的推移未接种疫苗人群抗体的阳性率和GMT水平呈逐步上升的趋势.结论 普通人群总体阳性率水平为41.02％,但幼儿和老年人保护性抗体比例仍然较低,提示该人群是今后甲型H1N1流感重点保护的对象.     

高原地区儿童脑炎脑膜炎症候群病原监测分析

目的 了解高原地区脑炎脑膜炎症候群病例病原种类及其流行特征.方法 收集2010年1月-2011年12月在青海省妇女儿童医院和青海红十字医院就诊的≤14岁脑炎脑膜炎症候群病例基本信息及临床信息,对所有脑脊液标本进行肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟球菌等8种细菌的培养鉴定以及乙脑病毒等4种病毒的核酸检测.结果 共有254例脑炎脑膜炎病例脑脊液标本进行了实验室检测,共检出阳性菌株21株,细菌检出率为8.27％;以金黄色葡萄球菌、结核杆菌检出率最高,各占整个阳性标本的23.81％;其次为大肠杆菌和隐球菌,各占阳性标本的19.05％;另检出肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟球菌,分别占阳性标本的9.52％和4.76％;病毒核酸检测阳性19份,病毒检出率为7.48％,主要为肠道病毒,共15份,占整个阳性标本的78.95％,检出腮腺炎病毒和单纯疱疹病毒核酸阳性各2份,各占阳性标本的10.53％.结论 高原地区脑炎脑膜炎症候群仍以细菌感染略占优势,而肠道病毒引起的脑炎也不容忽视.     

2010年青海省流感病毒病原学监测及H3亚型HA1基因序列分析

目的监测青海省2010年季节性流感病毒型与亚型分布,并了解2010年部分A/H3N2分离株血凝素(HA)基因变异情况。方法采集全省各监测哨点医院鼻咽双拭子标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2010年部分H3亚型流感病毒进行HA基因测序,分析HA基因变异情况。结果2010年全省哨点医院送检标本中共分离63株流感病毒,其中42株为A/H3N2,B型15株,AH1N1流感病毒6株,型与亚型有明显分布强弱特征。选取10株H3N2亚型分离株进行HA序列分析,发现与同期南京分离株接近,与WHO2010年度疫苗推荐株相距甚远,不在同一分支。结论 2010年青海省流行的H3N2亚型流感病毒的抗原性和基因特性发生了改变。     

H9N2禽流感病毒血凝素蛋白的主要特性及B/T细胞抗原表位预测分析

目的应用生物信息学方法分析人源和禽源H9N2禽流感病毒血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)的主要特性,预测可能的B/T细胞抗原表位。方法以H9N2禽流感病毒HA蛋白的氨基酸序列一级结构为基础分析其保守性,采用ProtParam预测H9N2禽流感病毒HA蛋白的理化特性,SOPMA预测其二级结构,MotifScan预测翻译后修饰位点,DNAStar分析其序列的亲水性指数、柔韧性指数、可及性参数以及抗原指数并推测B细胞抗原表位的可能位置,采用SYFPEITHI的T细胞表位预测工具分别预测CTL和Th细胞表位。结果人源和禽源H9N2禽流感病毒HA蛋白氨基酸序列分别有90和75个变异位点,其中有38个突变位点与氨基酸置换均相同,有14个突变位点相同但氨基酸置换不同。人源和禽源毒株中还各有38和23个特异性突变位点。HA蛋白存在多个糖基化、酰胺化及磷酸化等翻译后修饰位点。除了蛋白激酶C磷酸化位点外,其他类型的翻译后修饰位点在人源和禽源毒株中均有一些变化。经综合各种单参数,HA蛋白均为亲水性蛋白。人源和禽源H9N2禽流感病毒HA蛋白含有4个B细胞表位,8个CTL细胞表位和6个Th细胞表位,以人源和禽源的B细胞和Th细胞表位差异较大,而CTL细胞表位有部分序列相同。结论人源和禽源H9N2禽流感病毒HA蛋白的氨基酸序列有一定差异,其B/T细胞抗原表位的不同,可为H9N2禽流感病毒疫苗的研制提参考。